DDX46基因对结肠癌细胞电离辐射敏感性的影响及机制研究

目的 探讨DDX46基因对结肠癌细胞的电离辐射敏感性的影响及其作用机制。方法 DDX46基因RNA干扰慢病毒转染的SW480细胞为实验组,空载质粒慢病毒转染的SW480细胞为对照组。两组细胞转染72 h后,分别进行0和4 Gy X射线照射,采用CCK-8方法检测两组的细胞活力;实验组联合4 Gy X射线照射24 h后,采用免疫荧光技术和Western blot法检测细胞γ-H2AX foci数量以及DNA损伤修复通路关键蛋白的表达水平,确定DDX46与辐射诱导的DNA损伤修复的关系。结果 4 Gy X射线照射24 h后,实验组的细胞活力比照射前降低（15.02±3.92）%（t=-4.696,P<0.05）,比对照组降低（17.43±1.83）%（t=4.844,P<0.01）;而对照组照射前后比较差异无统计学意义（P>0.05）。同时,实验组γ-H2AX foci数量相比于对照组增加了（43.03±17.6）%（t=-3.108,P<0.05）,ATM的蛋白水平显著升高（t=7.530,P<0.01）,而ATM的活性形式p-ATM以及ATM的下游靶蛋白Rad50的蛋白水平则明显降低（t=4.260、4.260、P<0.05）,同时γ-H2AX的蛋白表达水平也有一定程度的升高（t=-3.090,P<0.05）,DNA-PK在两组细胞内的蛋白水平变化不大。结论 沉默DDX46可以提高结肠癌细胞系SW480的辐射敏感性,其机制可能是DDX46表达沉默抑制结肠癌细胞系SW480中ATM的活化,从而抑制辐射诱导的DNA损伤的修复,提高SW480的辐射敏感性。     

MIM与VEGF在胃癌中的表达及其预后意义的研究

目的 检测MIM(missing in metastasis)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胃癌中的表达,并探讨其变化与胃癌病理参数及预后的关系.方法 在含有282例胃癌标本的组织芯片上,利用免疫组织化学检测MIM和VEGF在胃癌和胃正常组织中的表达,并统计分析相关结果与胃癌临床参数和预后的关系.结果 MIM在胃癌中阴性表达率分别为66.3%,VEGF在胃癌中阳性表达率为64.5%.MIM的阴性表达与淋巴结转移(阳性)、肿瘤分化程度(低分化)、TNM分期(晚期)有关;VEGF的阳性表达和患者年龄(＞60岁)、肿瘤部位(贲门、胃底)和肿瘤分化程度(低分化)有关.Cox模型结果显示,MIM和VEGF是胃癌独立的预后因素.结论 MIM和VEGF可能是胃癌预后的重要影响因素,MIM可作为胃癌治疗的新靶点.     

MTSS1、Ezrin及Annexin Ⅱ在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨结直肠癌组织中肿瘤转移抑制蛋白1(MTSS1)、埃兹蛋白(Ezrin)及膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)的表达及其与肿瘤转移的关系。方法:应用组织芯片和免疫组织化学技术检测240例结直肠癌组织中MTSS1、Ezrin及AnnexinⅡ的蛋白表达,分析3种蛋白的表达与结直肠癌各种临床病理特征的关系及三者的相关性。结果:MTSS1在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率显著高于低分化、Dukes D期结直肠癌(均P<0.01);Ezrin在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率高于低分化、Dukes D期结直肠癌(P<0.01,P<0.05);AnnexinⅡ在中高分化、Dukes A+B+C期结直肠癌的阳性表达率高于低分化、Dukes D期结直肠癌(均P<0.05)。经Spearman相关分析,MTSS1和Ezrin、Ezrin和AnnexinⅡ、AnnexinⅡ和MTSS1在结直肠癌中的表达均呈明显正相关(r=0.259,P<0.01;r=0.405,P<0.01;r=0.215,P<0.01)。结论:MTSS1、Ezrin及AnnexinⅡ在结直肠癌组织中的异常表达与肿瘤的转移密切相关,联合检测可作为一组有效的结直肠癌诊疗指标之一。     

胆囊癌组织中微淋巴管密度的检测意义

目的: 探讨使用D2-40（淋巴管内皮细胞标志物）检测胆囊癌组织中微淋巴管密度（lymphatic microvessel density, LMVD）的临床意义。方法: 应用组织芯片和免疫组织化学（S-P法）技术以D2-40单克隆抗体检测59例胆囊癌（其中肝脏侵犯13例,淋巴结转移27例）的癌中心与癌周组织和6例正常胆囊组织中LMVD的表达,并分析其与胆囊癌病理参数的关系。结果： LMVD在胆囊癌周边组织中的表达明显高于正常胆囊组织和癌中心组织中的表达（P＜0.01）。在胆囊癌中,D2-40阳性表达与患者性别、年龄、肝脏侵犯无关（P＞0.05）,而与胆囊癌的淋巴结转移及临床分期（Nevin分期）有关（P＜0.05）。结论： D2-40 可以特异性识别人胆囊癌组织中微淋巴管内皮细胞,其标记的微淋巴管主要分布于癌周组织;LMVD可用来评估胆囊癌淋巴转移风险。     

长链非编码RNA SNHG14对胃癌增殖与侵袭迁移作用的基础研究

【摘要】目的：长链非编码RNA（lncRNA）已经被确认为基因表达的关键调控因子,其调控作用与人类的多种癌症有关。本研究的目的是研究lncRNA SNHG14在胃癌（gastric cancer,GC）进展中的可能作用。方法：应用qRT-PCR,检测出SNHG14在68对胃癌组织和癌旁组织中,以及三个胃癌细胞系MGC-803、BGC-823、SGC-7901和人类正常胃上皮细胞株GES-1中的表达量。分析胃癌组织及胃癌细胞株内的SNHG14表达水平与胃癌的各种临床病理特征的相关性。使用siRNA沉默SNHG14后观察胃癌细胞株的的功能。CCK-8增殖实验用于评估SNHG14对胃癌细胞增殖的影响,Transwell实验用于检测胃癌细胞迁移和侵袭能力。结果： SNHG14的表达量在胃癌细胞株和胃癌组织中与对照组相比显著上调。相关分析显示SNHG14的表达量与胃癌组织的TNM分期,肿瘤大小,浸润深度以及淋巴结转移等有显著的相关性。结论： SNHG14可能通过促进胃癌细胞的增殖和转移来影响胃癌的进展,有可能会成为诊断胃癌的新型生物标志物,也有可能在胃癌的生物治疗中作为候选靶点。     

基于CT血管成像及图像融合技术的胃结肠静脉干的解剖学研究

目的 运用CT血管成像(CTA)及图像融合技术研究活体状态下胃结肠静脉干(GCT)解剖学特点。方法 回顾性分析南京医科大学附属无锡市第二医院2017年1月—2018年2月收治的80例术前诊断为胃癌、胰腺癌或右半结肠癌的患者的影像学资料,其中男46例、女34例,年龄39~83(68±10.1)岁。80例均行腹部CT平扫及增强扫描,将原始图像进行CTA和CT结肠成像(CTC)重建,并将图像融合,得到血管及肠道的三维图像。观测指标:(1)GCT的长度、管径、走行及其GCT的组成;(2)中结肠静脉汇入上级静脉的分布情况;(3)胰十二指肠上前静脉汇入上级静脉的分布情况。结果 (1)69例(86.25%)患者出现GCT,长度为2.5~25.2(9.2±3.6)mm;管径为3.3~7.2(4.8±0.9)mm。GCT均自腹侧至头侧向右走行,其属支共有右结肠静脉、中结肠静脉、胃网膜右静脉和胰十二指肠上前静脉4个来源。其中,35例(50.73%)由胃网膜右静脉和右结肠静脉、中结肠静脉构成“2支”型或“3支”型胃结肠干,7例(10.14%)由胃网膜右静脉和胰十二指肠上前静脉构成“2支”型胃胰干,27例(39.13%)由右结肠静脉、中结肠静脉、胃网膜右静脉和胰十二指肠上前静脉构成“3支”或“4支”型胃胰结肠干。(2)77例患者出现中结肠静脉,其中53例(68.83%)汇入肠系膜上静脉,20例(25.97%)汇入GCT,2例(2.60%)汇入肠系膜下静脉,2例(2.60%)汇入脾静脉。(3)46例(57.50%)胰十二指肠上前静脉直接汇入肠系膜上静脉;34例(42.50%)胰十二指肠上前静脉参与了GCT的组成,其中汇入胃网膜右静脉者12例,汇入右结肠静脉者10例,汇入胃网膜右静脉与右结肠静脉合干者7例,直接汇入GCT者5例。结论 CTA及图像融合技术可以直观地显示GCT血管解剖及变异,为临床腹部血管术前评估提供可靠的信息,具有较高的临床应用价值。     

急性胰腺炎中E-钙粘蛋白的诊断价值

目的：探讨E‐钙粘蛋白（E‐cad）在急性胰腺炎中的表达及对其严重性的诊断价值。方法24只雄性SD大鼠随机均分为对照组、轻症急性胰腺炎组（MAP组）和重症急性胰腺炎组（SAP组）。通过腹腔注射L‐精氨酸造模,建模24h后测定血清中淀粉酶活性及E‐cad表达变化,胰腺组织进行病理组织学观察,蛋白免疫印迹（Westernblot）检测胰腺组织E‐cad的蛋白表达。结果MAP组和SAP组胰腺病理评分、血清淀粉酶值明显高于对照组（P＜0．05）,SAP组与MAP组比较差异也有统计学意义（P＜0．05）;血清E‐cad酶联免疫吸附试验（ELISA）检测结果显示：MAP组（1025．50±131．33）pg／mL和SAP组（1561．75±144．82）pg／mL均明显高于对照组（626．50±72．12）pg／mL,且两组之间比较差异也有统计学意义（P＜0．05）;Westernblot检测胰腺组织中SAP组E‐cad表达强于对照组及MAP组。结论E‐cad在急性胰腺炎早期表达明显增高,对其严重性具有一定的诊断价值。     

长链非编码RNA SNHG14可能通过促进胃癌细胞增殖和转移影响胃癌的进展

目的：研究长链非编码RNA（long non?coding RNA,lncRNA）SNHG14在胃癌（gastric cancer,GC）进展中的作用。方法：应用RT?qPCR检测SNHG14在68对胃癌组织和癌旁组织、3个胃癌细胞系（MGC?803、BGC?823、SGC?7901）和人类正常胃上皮细胞株GES?1中的表达量。分析胃癌组织及胃癌细胞株内的SNHG14表达水平与临床病理特征的相关性。使用siRNA沉默SNHG14后观察胃癌细胞株的功能。CCK?8增殖实验评估SNHG14对胃癌细胞增殖的影响,Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力。结果：胃癌细胞株和胃癌组织中SNHG14的表达量与正常对照相比显著上调。相关分析显示SNHG14的表达量与胃癌组织的TNM分期（P < 0.05）、分化程度（P < 0.001）、肿瘤大小（P < 0.01）及浸润深度（P < 0.05）等有显著相关性。通过siRNA沉默SNHG14的表达后,能够显著抑制胃癌细胞的增殖（P < 0.01）、迁移（P < 0.01）和侵袭（P < 0.05）能力。结论：SNHG14可能起到促癌作用,通过促进胃癌细胞的增殖和转移来影响胃癌的进展。SNHG14在治疗和诊断胃癌中具有潜在价值,有可能成为诊断胃癌的新型生物标志物或胃癌生物治疗的候选靶点。