实时定量RT-PCR的原理及方法

实时定量RT-PCR广泛应用于定量检测mRAN表达水平,为基础研究、分子药物学和生物技术研究提供了一种有力的方法。该法具有易操作、高通量、敏感性高和特异性强的特点,随着新酶、新探针和新仪器的发展而得到快速的发展。本文将对实时定量RT-PCR的定量原理、仪器应用、探针种类的研究进展以及细胞因子mRNA表达水平检测上的应用作一综述。     

空肠弯曲菌检测与基因分型的研究进展

随着分子生物学技术的迅猛发展，空肠弯曲菌的基因诊断与分型方法因其敏感性、特异性、分型率和分辨力高于传统的检测方法，且操作简便、快速而备受重视。本文对空肠弯曲菌常规生化检测方法、PCR方法、RELP分型、RAPD分型、PCR－RFLP分型、核糖体分型、鞭毛蛋白基因分型、AFLP分型的进展作了综述。     

空肠弯曲菌检测与基因分型的研究进展

随着分子生物学技术的迅猛发展,空肠弯曲菌的基因诊断与分型方法因其敏感性、特异性、分型率和分辨力高于传统的检测方法,且操作简便、快速而备受重视。本文对空肠弯曲菌常规生化检测方法、PCR方法、RELP分型、RAPD分型、PCR-RFLP分型、核糖体分型、鞭毛蛋白基因分型、AFLP分型的进展作了综述。     

PCR法和培养法调查食品和水中空肠弯曲杆菌的比较研究

目的　PCR方法和培养法调查食品和水中空肠弯曲杆菌的比较研究。方法　用空肠弯曲杆菌VS1基因的序列为模板设计一对引物 ,建立一种快速从食品和水中检测空肠弯曲杆菌的PCR方法 ;同时对南京地区的屠宰场、超市和牛奶场等地采取 10 0份鸡肉、10 0份生牛奶及 10 0份井水及自来水进行空肠弯曲杆菌PCR法和培养法双向检查。结果　研究表明该PCR方法只对空肠弯曲杆菌能特异的扩增出 35 8bp片段 ,而其它结肠弯曲杆菌、胎儿弯曲杆菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、沙门氏菌、大肠杆菌等均不能扩增出 ,检测灵敏度达 8CFU/ml,特异性与常规生化检查是一致的 ,发现 30 % (30 / 10 0 )的鸡肉为阳性、30 % (30 / 10 0 )的生牛奶为阳性、14 % (14 / 10 0 )的水为阳性。结论　调查结果表明在市场上销售的鸡肉、牛奶、牛奶制品及井水存在不同程度空肠弯曲杆菌污染 ,如果加工不当或饮食习惯不卫生 ,会对消费者的健康构成潜在威胁。