使用高灵敏ELISA测定血清胰岛素

<正> 虽然ELISA已被广泛应用于测定激素。但是至今临床上还是使用放射免疫法测定血清胰岛素。其主要原因是目前一般使用的ELISA灵敏度难以达到足以测定空腹血清胰岛素的水平。作者通过使用抗胰岛素抗体包被的聚苯乙烯球(直径3.2mm)与50μl的胰岛素或待测血清在一小试管中反应。继之与使用N-(ε-马来酰亚胺已酰)琥珀酰亚胺酯(EMCS)作为双功能试剂制备的抗胰岛素Fab′-辣根过氧化酶(HRP)交联物     

维生素D的生物合成

六十年代末,以活性型维生素D的发现为转机,有关维生素D作为维生素的概念从根本上被推翻了。按其化学结构和对靶细胞的作用方式看来,应将其视为一种类固醇激素。维生素D视为激素的另一根据是,它是在体内特定的组织细胞(表皮细胞)中,在阳光紫外线的作用下产生的。最近发现,将最终活性物1,25-二羟维生素D_3作用于其产生细胞,对维生素D_3的生物合成亦有调节作用,故可将其生物合成     

Fab′——HRP交联物微量亲和纯化法及其应用——微量EIA测定胰岛素

为了提高EIA测定的灵敏度,使用亲合纯化后的抗体是十分必要的~([1])。目前多数方法是将抗体进行亲和纯化后再与HRP交联.制备高纯度的酶标抗体~([2～4])。这     

抗生物素的提取和高效率交联抗生物素与辣根过氧化酶

蛋清经过丙酮、硫酸铵沉淀、离子交换提取抗生物素。抗生物素使用 S—乙酰巯基琥珀酸酐处理以导入巯基。使用 N-(ε-马来酰亚胺已酰)琥珀酰亚胺酯将马来酰亚胺基导入辣根过氧化酶(HRP),然后与经化学修饰的抗生物素上巯基反应,高效率制备抗生物素—辣根过氧化酶交联物。这种交联方法不影响酶活力,抗生物素和 HRP 的回收率分别高达61.5%和79.3%。抗生物素—HRP 交联物可用于建立高灵敏度酶免疫测定法和免疫组织化学染色。     

血清TSH受体抗体检测对预测Graves病复发的意义

采用酶免疫法(EIA)测定和观察Graves病人血清TSH受体抗体(TRAb)在用他巴唑治疗过程中的变化并对部分病例停药后随访2年的结果表明,(1)治疗1年时血清TRAb持续存在的患者具有反覆发作的倾向。(2)停药时TRAb阳性是患者尚未达到免疫学缓解、可能在近期内复发的重要标志。     

酶免疫法检测血清TSH受体抗体

本文介绍酶免疫法检测血清TSH受体抗体(TRAb)。用水溶性豚鼠脂肪细胞膜蛋白(SGFM)包被聚苯乙烯球(直径3.2mm)依次与待测血清和辣根过氧化酶标记的葡萄球菌A蛋白进行反应,以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺为底物,450nm比色测定结果。将30例正常人的OD均值加2倍标准差(0.09 0.06)作为正常值的上限,38/40(95％)未经治疗的Graves病患者及15/15(100％)的复发患者TRAb为阳性。TRAb与SGFM的结合能够被TSH所抑制,说明本方法检出的是与TSH受体特异性结合的自身抗体。     

血清及胆汁SIgA夹心EIA测定法

本SIgA夹心酶免疫(EIA)定量分析法是以抗人分泌成分(SC)抗体包被固相载体、辣根过氧化物酶(HRP)标记抗人IgA抗体的Fab′片断作为酶标抗体。本方法灵敏度达O.625ng/孔,特异性强,批内变异系数和批间变异系数分别为5.8～9.3％和6.2～9.2％,回收率为99.6～108.7％,与相应的RIA法高度相关(r=0.961),标本用量甚微,2～4μl血清就可测定。用本方法测定117例正常成人血清,SIgA正常值为2.98～18.15μg/ml(8.04±3.60μg/mld);16份“T”管胆汁标本测定结果为40.8±25.0μg/ml。     

使用半乳糖苷酶交联物建立高灵敏度酶免疫测定技术

目前高灵敏度β—D—半乳糖苷酶荧光定量法和这种高回收率、高活力Fab’—β—D—半乳糖苷酶交联物的制备法在本室建立。现将方法简述如下:1.β—D—半乳糠苷酶的微量荧光定量法:以4—甲基伞型酮β—D—半乳糖作为酶底物,用NaCO_3终止酶反应,EIF—105D酶免疫荧光仪《温州鹿城生化仪器厂)测定。小至10~(-20)mol/管β—D—半乳糖苷酶能被