利用基因芯片观察抑郁症大鼠模型基因表达的变化

目的：采用高通量基因芯片观察大鼠抑郁症模型基因表达的变化,结合基因功能分类体系探讨抑郁症的发病机制.方法：实验于2004-04/2005-10在成都康弘集团实验动物中心和哈尔滨医科大学完成.采用Willner法对32只雄性SD大鼠构造大鼠抑郁症模型,应激刺激造模结束后将大鼠分为模型组和正常组,每组各8只.由基因芯片检测8只模型组和8只正常组大鼠的基因表达谱,识别差异表达基因并注释于GO基因功能分类体系,分析差异表达基因与疾病的相关性.结果：实验纳入大鼠数量为16只,实验中无意外死亡、丢失及补充,进入结果分析大鼠数量为16只.对模型组和正常组,通过t检验筛选得到207个差异表达基因,涉及神经肽激素活性、信号传导通路、核糖体生成以及蛋白质转运与降解.具有钙调蛋白依赖的蛋白激酶活性基因钙调蛋白依赖的蛋白激酶1、钙调蛋白依赖的蛋白激酶2G、钙调蛋白依赖的蛋白激酶2抑制物α、具有囊泡介导转运功能的基因突触蛋白表达下调也表明这些通路在大鼠抑郁症模型中可能被抑制;有神经肽激素活性的精氨酸加压素表达下凋,验证了情感性精神障碍的精氨酸加压素的假说,即抑郁症患者精氨酸加压素功能降低,在躁狂症患者则升高.进一步验证了抑郁症的病理机制所涉及的可能是神经传递功能的多个环节.结论：单胺递质的释放、信号传导以及神经肽调节的表达变化涉及抑郁症的发病机制,提示多种功能通路与抑郁症的发病机制相关.     

发现乙型肝炎病毒受体——肝细胞的钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白

乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)属于嗜肝DNA病毒科正肝病毒属.HBV基因组为不完整的双链DNA,约3.2 kb;其包膜蛋白包括S、M及L蛋白,均为多次跨膜蛋白.S、M、L蛋白具有相同的C端,即为相同氨基酸序列的S区,但N端不同[1].丁型肝炎病毒(HDV)是HBV的卫星RNA病毒,具有HBV 的3种包膜蛋白,只有在与HBV共存时才能够包装为感染性颗粒及增殖.在研究HBV侵入细胞机制研究方面,HDV可以作为HBV的替代[2].全球目前有近3亿人感染HBV,并有约1500万人同时感染了HDV.     

一个细胞融合实验体系的建立及初步应用

目的建立-个细胞融合实验体系，观察凝血酶（thrombin，Th）对I型人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type I，HIV-1）包膜糖蛋白（envelope glycoproteins，Env）介导的细胞融合的影响。方法采用携带HIV-1 JRFL 株env基因的表达质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与携带HIV-1tat基因的表达质粒pcTat共转染293T细胞，检测到细胞膜表面Env表达后，将pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat分别按1：2、2：3、1：1、2：1、5：1、10：1共转染293T细胞，然后再与Magic5A细胞进行融合实验，计数融合细胞数目并确定最适宜的融合条件，建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。在所建立融合体系基础上利用Th处理Env表达细胞。观察对融合作用的影响。结果pSV—Ⅲ-JRFL-dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，可建立稳定的细胞-细胞融合实验体系。Th能够增强细胞融合，且融合细胞数随着Th浓度增高而逐渐增加。Th处理10min与处理30min比较，融合增强作用更加显著。结论质粒pSV—Ⅲ-JRFL—dCT与pcTat按1：1、2：1共转染293T细胞，与MagieSA细胞进行融合实验可得到稳定的细胞-细胞融合实验体系，111对HIV-1包膜介导的细胞融合有促进作用。     

安佳欣胶囊对抑郁症模型大鼠基因功能类表达影响的初步研究

目的研究安佳欣胶囊对抑郁症模型大鼠基因功能类表达的影响。方法分析抑郁症大鼠模型组和安佳欣胶囊组各8例样本的基因表达谱数据,筛选差异表达基因。利用基因功能分类体系Gene Ontology中的生物学过程子树和细胞组分子树,寻找和分析显著聚集差异表达基因的复合功能类,从分子水平和基因功能模块水平探索安佳欣胶囊对抑郁症模型大鼠基因表达谱的影响。结果筛选出330个差异表达基因,并进一步识别了8个差异表达基因功能模块,主要涉及糖代谢、蛋白转运、谷氨酰胺代谢、凋亡诱导和神经发生。通过文献证实进一步发现了差异功能模块中7个可能与抑郁症发病相关的基因(Pfkm、Gpx1、Stx1a、Ninj2、Plp、Evl、Nrn1)在两组动物中差异表达。结论安佳欣胶囊可能增加抑郁症模型大鼠的单胺递质合成和释放,改善神经保护和神经发生功能,这些改变可能与安佳欣胶囊的抗抑郁作用有关。     

浅谈〖伤寒论〗中的寒热并用法

张仲景首创的寒热并用法就是针对寒热错杂病证而设。本文试以《伤寒论》中寒热并用的一部份方证为例,略述管见。《伤寒论》中,寒热并存的证候,归纳起来有四种:一、表寒里热。如大青龙汤、桂枝二越婢一汤等。二、上热下寒证。如黄连汤、栀子干姜汤、乌梅丸,干姜黄连黄芩人参汤等。三、寒热互结证。如半夏、生姜、甘草三泻心汤。四、真寒假热证。如白通加猪胆汁汤、通脉四逆加猪胆汁汤等。这四种类型的证候表现     

利用基因芯片观察抑郁症大鼠模型基因表达的变化

目的:采用高通量基因芯片观察大鼠抑郁症模型基因表达的变化,结合基因功能分类体系探讨抑郁症的发病机制。方法:实验于2004-04/2005-10在成都康弘集团实验动物中心和哈尔滨医科大学完成。采用Willner法对32只雄性SD大鼠构造大鼠抑郁症模型,应激刺激造模结束后将大鼠分为模型组和正常组,每组各8只。由基因芯片检测8只模型组和8只正常组大鼠的基因表达谱,识别差异表达基因并注释于GO基因功能分类体系,分析差异表达基因与疾病的相关性。结果:实验纳入大鼠数量为16只,实验中无意外死亡、丢失及补充,进入结果分析大鼠数量为16只。对模型组和正常组,通过t检验筛选得到207个差异表达基因,涉及神经肽激素活性、信号传导通路、核糖体生成以及蛋白质转运与降解。具有钙调蛋白依赖的蛋白激酶活性基因钙调蛋白依赖的蛋白激酶1、钙调蛋白依赖的蛋白激酶2G、钙调蛋白依赖的蛋白激酶2抑制物α、具有囊泡介导转运功能的基因突触蛋白表达下调也表明这些通路在大鼠抑郁症模型中可能被抑制;有神经肽激素活性的精氨酸加压素表达下调,验证了情感性精神障碍的精氨酸加压素的假说,即抑郁症患者精氨酸加压素功能降低,在躁狂症患者则升高。进一步验证了抑郁症的病理机制所涉及的可能是神经传递功能的多个环节。结论:单胺递质的释放、信号传导以及神经肽调节的表达变化涉及抑郁症的发病机制,提示多种功能通路与抑郁症的发病机制相关。     

HIV-1疫苗研究新策略

1981年发现艾滋病（Acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）以来的20年间，AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和非洲地区人口死亡的首要原因。来自联合国艾滋病规划署（UNAIDS）最新的流行病学统计数据显示，到2004年底，全球感染艾滋病病毒（HIV）的人已达3940万，较前一年新增490万（http：／／www．unaids．org）。HIV感染正以前所未有的速度蔓延，预防性疫苗是最有前景的控制HIV感染的策略，却面临着诸多科学的挑战，如：（1）缺乏对免疫与保护相关性的了解；（2）对灵长类保护试验与人体保护性疫苗相关性的知识有限；（3）HIV基因的变异及由此导致的病毒免疫学性状的变异对疫苗效力的影响。尽管如此，科学界一致认为研制出安全、有效的HIV疫苗完全可能。