人子宫内膜细胞体外培养模型的建立

【目的】构建人子宫内膜细胞体外培养模型。【方法】收集子宫内膜组织,采用酶消化、筛网滤过、梯度离心的方法获得腺上皮与基质细胞混合细胞进行体外原代培养,采用光学显微镜下观察体外培养的细胞形态,采用波形蛋白和角蛋白单克隆抗体进行免疫组化法鉴定子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞。【结果】倒置显微镜下发现子宫内膜细胞中腺上皮细胞和基质细胞呈混合生长,其中基质细胞占大部分,为72．0％;腺上皮细胞占小部分,为24．5％,基质细胞和腺上皮细胞免疫组化染色后呈阳性,细胞纯度分别为24．5％和70．5％,两种细胞加起来的纯度为95％。【结论】该方法操作简便,效率高,可建立一个稳定实用的人子宫内膜细胞体外培养体系。     

4000/姜黄素对TNF - α诱导大鼠海马神经元损伤的保护作用及其机制

目的：观察姜黄素对TNF-α诱导的大鼠海马神经元损伤的结构性保护作用并研究其机制。方法：大鼠海马神经元原代培养至第5天,神经元被分为四组。每组分别加药后,马上在倒置显微镜下对神经元进行动态拍照1小时并在加药后48小时进行静态拍照以观察神经元的形态改变。另外一批神经元被原代培养至第7天,也被分为四组,然后加入药物。马上在激光共聚焦显微镜下观察神经元荧光标记的Ca2+浓度变化。结果：药物处理后1小时和48小时,对照组、姜黄素组和姜黄素加TNF-α组神经元的形态是正常的。但加药后1小时,TNF-α组神经元胞体肿胀,树突及次级分支逐渐萎缩并最终消失。加药后48小时,TNF-α组神经元生长稀疏,胞体小,几乎没有轴突和次级分支从胞体伸出,不能形成网状结构。激光共聚焦扫描提示TNF-α诱导Ca2+快速内流入胞浆。姜黄素可以部分拮抗TNF-α诱导的Ca2+浓度增加。TNF-α组和姜黄素加TNF-α组Ca2+荧光强度较基础荧光强度分别增加53.40±1.58和25.36±0.76。两组差别有统计学意义。结论：姜黄素对大鼠海马神经元有结构性保护作用,其机制是姜黄素可以阻止TNF-α诱导的Ca2+快速内流,通过NMDA受体维持神经元胞浆的Ca2+平衡。     

姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,TNF-α和NMDA(N-甲基D-天冬氨酸)对大鼠海马脑片LTP产生明显的抑制作用(P0.05);而姜黄素可以部分拮抗TNF-α和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与对照组相比无显著差异(P0.05);TNF-α、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递没有显著影响。结论:姜黄素对TNF-α损伤的大鼠海马神经元有功能性保护作用,其机制可能是姜黄素部分拮抗TNF-α诱导的神经元细胞膜上的NMDA受体过度激活,维持神经元的长时程增强。     

Sema3A及其受体在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 检测Sema 3A及其受体在子宫内膜异位症中的表达,探讨Sema 3A及其受体在子宫内膜异位症的发生和发展中的意义。方法 收集2013年1月1日至12月31日在中山大学附属第一医院妇科住院并行手术治疗的腹膜子宫内膜异位症（PEM）患者24例、卵巢子宫内膜异位囊肿（OEM）患者24例和结直肠子宫内膜异位症（CREM）患者20例,采用免疫组化SP法检测异位病灶腺上皮细胞中Sema 3A、Plexin A1和NRP-1的表达,并与26例非子宫内膜异位症患者在位内膜（EuE-NEM）、22例子宫内膜异位症患者在位内膜（EuE-EM）中的表达进行比较。结果 Sema 3A在EuE-EM组腺上皮细胞中的表达比EuE-NEM组腺上皮细胞中的表达高（309.09±66.61、207.69±56.02）,差异有统计学意义（P<0.01）。PEM、OEM、CREM的异位病灶腺上皮细胞之间的Sema 3A、Plexin A1、NRP-1的免疫组织化学HSCORE评分差异均无统计学意义（P>0.05）。PEM组、OEM组、CREM组中异位病灶腺上皮细胞中的Sema 3A、Plexin A1、NRP-1的表达均比内膜异位症患者组的在位内膜和非内膜异位症患者组的在位内膜腺上皮细胞中的表达高（P值均<0.05）。结论 Sema 3A及其受体在不同类型内膜异位症病灶腺上皮细胞中的表达增高,提示其高表达可能参与了子宫内膜异位症的发生发展。