利用重组痘苗病毒表达人CD20基因

目的获得重组人 CD2 0分子并研究编码人 CD2 0的基因在痘苗病毒中的表达。方法从 p GEM- T- EASY/ CD2 0载体上酶切下编码人 CD2 0分子的 c DNA,亚克隆到 p JSA1175载体上 ,重组质粒与野生痘苗病毒共转染 TK- 143细胞。结果APAAP检测到重组病毒感染的细胞表面有 CD2 0分子表达 ,富集后病毒滴度约为 1× 10 9pfu/ ml。结论人 CD2 0基因在痘苗病毒中表达 ,为研究其功能以及研制单克隆抗体奠定了基础     

人CD20胞外区基因在原核系统中的表达

目的 将ＣＤ２０胞外区在大肠杆菌中表达,并研究表达产物作为抗原筛选抗体的可能性。方法 设计引物从ＰＵＣ１９／ＣＤ２０质粒上钓取取ＣＤ２０胞外区基因,克隆到ＰＥＸＳＥ１载体上,在大肠杆功各融合表达。结果 表达产物的相对分子建立了检测ＣＤ２０ｍＡｂ的ＥＬＩＳＡ方法。结论 为研制ＣＤ２０分子的ｍＲｂ奠定了基础。     

人CD19基因在痘苗系统中的表达

目的 在痘苗系统中表达人ＣＤ１９基因,为研究ＣＤ１９分子的豚研制抗ＣＥ１９的单克隆抗体（ｍＡｂ）打下基础。方法 用ＰＣＲ技术扩增人ＣＤ１９全长基因,并 组人克隆载体ｐＧＥＭ－Ｔ,进行序列测定。将ＣＤ１９全长基因克隆人痘苗表达载体ｐＪＳＡ１１７５中,用脂 本介导的方法,与野生 人转染ＴＫ－１４３细胞。运用蓝斑筛选获避人ＣＤ１９全长基因的重组痘苗病毒,并用此重组病毒感染ＴＫ－１４３细胞,以ＡＰＡＡＰ法     

人CD28分子突变体的构建和表达

在肿瘤免疫中,发挥主要作用的是Ｔ细胞免疫。Ｔ细胞要完全活化,需要两种信号途径同时活化：第一种信号是经典的ＭＨＣ／多肽－ＴＣＲ／ＣＤ３途径,第二种信号是ＣＤ２８共刺激途径。ＣＤ２８共刺激途径的阻断,将导致Ｔ细胞克隆的耐受和凋亡。因此,ＣＤ２８分子的研究成为免疫学、肿瘤学等领域关注的热点之一。大量研究结果表明,ＣＤ２８分子的活化可促进Ｔ细胞增殖、多种淋巴因子,特别是ＩＬ２的分泌量增高２０～５０倍,并能介导有效的ＣＴＬ杀伤效应〔１〕。目前,国外研究主要集中于ＣＤ２８分子在Ｔ细胞活化、信号转导机制,以…     

人CD19分子胞外区在大肠杆菌中的表达研究

本实验应用计算机优化设计，利用ＰＣＲ 和分子克隆技术，以ｐＵＣ１９／ＣＤ１９ 重组质粒为模板，扩增出人ＣＤ１９ 分子的胞外区基因，并与表达载体相连，经３０ ℃扩增菌体，４２ ℃诱导，实现了在Ｅ－ｃｏｌｉ 中融合表达相对分子质量（ Ｍｒ） 为４１ ０００ 的蛋白谱带。初步纯化的包涵体可溶于２ ％ ＳＤＳ，为对其单克隆抗体（ｍＡｂ） 的制备奠定了基础。