一个完全纯化的枯草杆菌噬菌体φ29脱氧核糖核酸细胞外包装系统

利用完全纯化的细胞外包装系统,能使噬菌体φ29的DNA与基因3产物gp3的复合物DNA—gp3高效地装入了原衣壳(prohead)。φ29DNA的包装蛋白gp16(基因16的产物)于大肠杆菌中超量生产然后被提纯几至同质。纯化的gp16能将23％的纯化DNA—gp3装入提纯的原衣壳中,而感染了噬菌体的细菌抽提物中的gp16则能将26％的DNA—gp3装入。此纯化系统不需寄主蛋白。包装过程需要三磷酸腺苷,最适比例为每个DNA—gp3复合物配100个gp16分子,这个比例与感染φ29的菌体内两者的比例相似。     

鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒弱毒G80株的免疫原性

从广州市郊鸡场分离出一株ILT病毒,暂定名为G_(80)株。经CAM(鸡胚绒毛尿膜)和CEKC(鸡胚肾单层细胞)连续传13代之后,对鸡的毒力已减弱,以此减弱毒株经鼻眼途径免疫鸡只,每鸡接种0.3ml,测得其最大安全浓度(LD—O.max)为10~(4.95)EID50/0.2ml以上,获得100％保护的最小有效浓度处于10~(3.25)和10~(3.75)EID_(50)/0.2ml之间(相当于最大安全浓度的1/28～1/15),取其不致引起任何临床反应的浓度10~(2.25)EID_(50)/0.2ml(相当于最大安全浓度的1/500)对鸡免疫,保护率为16/21(76％)。免疫发生期短于4天,能产生同居感染和接触免疫,但不会引起IIT的临床症状。经鸡体连续通过5代证明毒力稳定。本弱毒株可进一步进行其它有关试验和大田试验,以评价其作为疫苗的使用价值。     

肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定

目的 获得能够特异性高亲和力结合肝脏特异性去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor, ASGPR)的RNA适配子,为开发诊断和治疗肝脏疾病的靶向性试剂和药物奠定基础.方法 合成一个长度为115 nt含有25个随机序列的单链DNA随机文库,通过体外转录构建出单链RNA适配子随机文库,以肝脏ASGPR大亚基为靶蛋白,采用SELEX(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选具有高亲和力的ASGPR特异性RNA适配子;通过膜结合测定实验、凝胶阻滞实验鉴定筛选适配子对靶蛋白的特异性和亲和力.结果 经过12轮筛选获得了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子.结论 成功地筛选出了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子库.