PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究

目的探讨能否在基因芯片上进行不同的荧光掺入PCR反应并根据基因芯片上荧光的变化判断基因的变异.方法利用健康外周血,正常脐血DNA,X连锁遗传性铁粒幼细胞贫血(XLSA)家系成员6人外周血DNA做PCR-SSCP,并测序确定.设计检测此点突变的Taqman探针进行荧光PCR反应,在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.利用4步位点特异PCR结合SYBR荧光染料初筛HLAA2,并在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.结果PCR-SSCP分析与测序确定X连锁遗传性铁幼粒细胞贫血家系两患者的ALAS2基因第5外显子有G514A点突变,母亲、外祖母为杂合子携带者.设计Taqman探针时此家系中六位成员DNA与二份正常男性脐血DNA检测与预期结果相符.将上述结果中同样的样本移入芯片进行PCR反应,结果与常规荧光PCR反应的结果一致.SYBR荧光染料PCR反应与芯片上SYBR荧光染料PCR反应的结果与预期完全相符.结论利用TaqMan探针与SYBR Green荧光染料可以在PCR基因芯片上顺利进行PCR反应,根据基因芯片上荧光的变化检测出点突变与单核苷酸多态性.为基因芯片的临床应用打下了基础.     

生物芯片在血液学中的应用

生物芯片技术是近年来发展的一类微量分析技术，具有快速、并行、多样、微型化和自动化的特点。本文对近年来生物芯片的制作过程及其在血液肿瘤发病机制、诊断、治疗研究中的应用进行综述。     

生物芯片在血液学中的应用

生物芯片技术是近年来发展的一类微量分析技术,具有快速、并行、多样、微型化和自动化的特点。本文对近年来生物芯片的制作过程及其在血液肿瘤发病机制、诊断、治疗研究中的应用进行综述。     

白血病多发家系的遗传因素分析

目的 通过一家族多发性白血病家系的基因连锁分析结合国内外文献探讨白血病发病的遗传因素。方法 收集4代20人中有3人患有急性粒细胞白血病M1亚型的家系。应用DNA IQ试剂盒从骨髓涂片上提取DNA，酚氯仿抽提法从外周血提取DNA。逆转录-多重巢式PCR方法筛查白血病常见融合基因。利用Powerplex试剂盒进行微卫星多重荧光PCR扩增。结果 筛查家系中5位成员未发现融合基因。确认3例白血病患者代表位于11条不同染色体上11个基因的微卫星没有共同连锁关系。其他2个微卫星由于在这个家族中的多态性不高，无法确认或者排除基因的连锁关系。结论 仅仅根据不充分的家系特征和某些细胞遗传学异常就认定白血病多发家系是遗传性白血病显然还缺乏证据。