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VEGF基因沉默抑制HCT116裸鼠移植瘤生长及血管生成的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 应用RNAi技术沉默血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)基因,探讨其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠移植瘤生长及其血管生成的影响.方法 将自行构建的以VEGF基因为靶向表达短发夹状RNA的重组质粒(pAVU6 27-VEGF-siRNA)转染到结肠癌HCT116细胞株中(C组),以空质粒(pAVU6 27)转染为阴性对照(B组),经G418筛选出阳性克隆细胞,未转染质粒的HCT116细胞株为空白对照(A组),建立裸小鼠皮下移植瘤模型.通过测量移植瘤的质量、体积观察移植瘤生长;免疫组化检测瘤组织中VEGF蛋白表达及组织内的微血管密度(microvessel density,MVD)改变.结果 C组肿瘤瘤块的体积(0.169±0.009)cm3和质量(0.192±0.022)g明显小于A、B组(P<0.05).A、B组荷瘤组织中VEGF均表达强阳性,表达位于肿瘤细胞的细胞质及细胞膜上,呈棕黄色.C组荷瘤组织中VEGF呈弱阳性表达,组间差异显著(P<0.05).C组荷瘤组织中MVD明显小于两对照组,组间差异显著(P<0.05).VEGF表达与MVD呈显著正相关(r=0.810,P<0.01).结论 应用RNAi技术沉默VEGF基因能明显抑制人结肠癌细胞系HCT116裸小鼠移植瘤的生长,其机制与其抑制移植瘤中VEGF的表达和瘤组织内血管生成有关. 相似文献
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目的 通过建立体外模拟CO2气腹环境,研究CO2气腹对人胃癌MKN-45细胞增殖和细胞周期的影响。方法 建立体外模拟CO2的气腹环境,在全自动气腹机作用下维持密闭培养箱内压力为12mmHg,作用时间4h。处理后用MTT法检测细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察细胞周期变化。结果 MTT法检测细胞增殖结果显示,气腹组人胃癌MKN-45细胞的增殖速度与对照组比较无显著性差异(P〉0.05);流式细胞仪检测人胃癌MKN-45细胞周期,CO2气腹组增殖指数与对照组比较无显著性差异(P〉0.05)。结论 体外模拟持续12mmHg CO2气腹环境,连续对人胃癌MNK-45细胞作用4h,不会促进胃癌细胞的增殖和生长。 相似文献
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Stat3靶向RNA干扰重组体的构建及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
目的设计针对Stat3的发夹样RNA干扰重组体,通过脂质体转染结肠癌细胞HCT116观察其干扰效果,为探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。方法设计针对Stat3编码区的有短发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,克隆到载体Pavu6+27中构建重组体Pavu6+27-Stat3,再对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析。脂质体法转染重组体至大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒(Pavu6+27)转染为对照;RT-PCR法观察Stat3基因表达改变。结果酶切鉴定和测序分析均提示Stat3靶向RNA干扰重组体的构建成功,Pavu6+27-Stat3转染后HCT116细胞Stat3基因表达较空载体Pavu6+27转染的对照组显著下降。结论Stat3靶向RNA干扰重组体成功构建,并能有效抑制HCT116细胞中Stat3基因表达。本实验为下一步利用RNAi技术沉默肿瘤细胞中Stat3基因的表达,诱导肿瘤细胞凋亡或抑制其增生,为探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础。 相似文献
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目的 研究VEGF-C在直肠癌中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系.方法 对2007年12月至2008年8月行直肠癌手术治疗的82例中低位直肠癌患者的肿瘤组织标本和各站淋巴结,用免疫组化方法检测VEGF-C在直肠癌组织中以及CK20在直肠癌D3站淋巴结中表达的情况,结合系膜淋巴结的病理结果,阐述VEGF-C在直肠癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系.统计方法采用X~2检验.结果直肠癌中VEGF-C的表达在肿瘤分期各组中差异有统计学意义(X~2=8.529,P<0.05),在无淋巴结转移组和系膜0淋巴结转移组中差异有统计学意义(X~2=4.712,P<0.05),在患者性别与年龄对比中差异无统计学意义(X~2=0.227,P>0.05;X~2=0.037,P>0.05),无淋巴结转移组与系膜淋巴结转移组的VEGF-C表达差异有统计学意义(X~2=4.712,P<0.05),而系膜淋巴结转移组与D3淋巴结转移组的表达差异无统计学意义(X~2=0.017,P>0.05).结论 VEGF-C的表达与肿瘤分期及淋巴结转移有关,但与患者的性别和年龄无关;VEGF-C的表达在促进直肠癌发生区域淋巴结转移的同时,也可能促进D3淋巴结微转移. 相似文献
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Objective: To compare laparoscopic gastrectomy and conventional surgery on the dissemination and seeding of tumor cells. Methods:Intraoperative peritoneal lavage cytologic examination was performed in 65 patients with gastric cancer, during laparoscopic gastrectomy (n = 34) and conventional surgery (n = 31). Cytology was examined twice, immediately after opening the peritoneal cavity and just before closing the abdomen. Saline was poured into the peritoneal cavity, and 100 ml fluid was retrieved after irrigation. Laparoscopic instruments were lavaged after surgery with 100 ml saline. Carbon dioxide (COz) was derived through the trocar side orifice after pneumoperitoneum during laparoscopic gastrectomy and filtered through 100 ml saline. Cytologic examination of the filtrate was performed after the filtration process. Results: The incidence of positive cytology during laparoscopic surgery was 32.26% in the preoperative lavage and 22.58% in the postoperative lavage. The incidence of positive cytology during conventional surgery was 41.18% before lavage and 26.47% after lavage. Only one positive cytology was detected in the CO2 filtrate gas. The incidence of positive cytology in the lavage of the instruments during laparoscopic surgery was 6.45 %. Conclusion: During gastric laparoscopic surgery, CO2 pneumoperitoneum does not affect tumor cell dissemination and seeding. In this study, laparoscopic techniques used in gastric cancer surgery were not associated with a higher risk for intraperitoneal dissemination of cancer cells than the conventional surgery. 相似文献