松果菊苷对db/db糖尿病小鼠心肌细胞脂质代谢紊乱的改善作用

目的 探究肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside)对糖尿病心肌病db/db小鼠模型心肌细胞糖脂代谢紊乱是否具有保护作用及可能作用机制。方法 将29只SPF级6周龄雄性db/db小鼠和db/m小鼠,适应性饲养1周后,按照数字表法随机取9只db/m小鼠作为正常对照组(db/m组,n=9),将db/db小鼠分为糖尿病心肌病组(db/db组,n=10)和松果菊苷干预组(db/db+ECH组,n=10)。其中db/db组和db/m组每天按照0.05ml/10g标准进行0.9%NaCl溶液灌胃10周。db/db+ECH组小鼠按松果菊苷300mg/(kg·d)灌胃干预10周。每周监测各组小鼠体质量,观察小鼠摄食、饮水及活动情况。于小鼠第18周龄用2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠并处死,取尾静脉血测定空腹血糖(FBG);分离血清检测各组小鼠血清脂质水平变化;采用HE染色观察心肌组织病理改变;苏丹红Ⅱ染色观察心肌细胞脂质蓄积情况;免疫印迹(Western blot)法检测糖脂代谢相关蛋白PPAR-α、CPT -Ⅰ、CD36和GLUT-4的表达水平;real-time PCR测定心肌细胞PPAR-α、CPT -Ⅰ、CD36和GLUT-4 mRNA的表达水平。结果 与db/m组比较,db/db组小鼠体质量、血糖和血脂水平显著升高(P＜0.05);同时HE染色切片显示,与db/m组比较,db/db组小鼠心肌细胞可见明显的肥大、坏死,心肌细胞排列结构紊乱;而db/db+ECH组小鼠心肌细胞形态有所缓解,细胞间隙减少,排列较规则。苏丹红Ⅱ染色观测心肌细胞脂质蓄积结果提示相较于db/m组,db/db组小鼠心肌细胞发生严重的脂质变性,可见不同大小的脂质液泡,同时伴有PPAR-α、CPT -Ⅰ和GLUT-4蛋白表达量显著降低(P＜0.01),CD36蛋白表达量显著增加(P＜0.01),且PPAR-α、CPT -Ⅰ、GLUT-4 mRNA表达量明显降低,CD36 mRNA水平上调(P＜0.01)。与db/db组比较,db/db+ECH组上述指标均有明显逆转,且切片观察小鼠心肌细胞脂质沉积显著减少。结论 松果菊苷能够明显改善db/db小鼠心肌细胞糖脂代谢紊乱,其机制可能与通过调控PPAR-α/CPT -Ⅰ信号转导途径有关。     

血管内皮生长因子对培养内皮细胞增殖和移行的影响

目的　研究低氧培养心肌细胞分泌出的血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白对培养内皮细胞增殖和移行的影响。方法　将培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)分为 4组 :正常对照组 ,低氧培养组 ,含VEGF的低氧培养心肌细胞分泌液组 (分泌液组 ) ,分泌液 +低氧培养组。分别采用流式细胞仪、免疫组织化学等方法检测VEGF对HUVECs细胞周期、增殖细胞核抗原表达、氚一亮氨酸掺入量及HUVECs移行的影响。结果　VEGF增加正常培养和低氧培养HUVECs由静止期 DNA合成前期向DNA合成期的转换 ,使DNA合成期及DNA合成后期 分裂期细胞数增加 ,从而促进HUVECs增殖 ,并使常氧和低氧培养HUVECs增殖细胞核抗原的表达、氚一亮氨酸掺入量及移行细胞数目增加。低氧抑制HUVECs的增殖和移行 ,VEGF可拮抗低氧对HUVECs增殖、移行的抑制作用。结论　低氧培养心肌细胞分泌出的VEGF蛋白不仅增加常氧培养HUVECs增殖、移行 ,而且能够拮抗低氧的抑制作用     

吡格列酮对2型糖尿病患者血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的:探讨吡格列酮对2型糖尿病(T2DM)患者血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响。方法:70名T2DM患者,随机双盲分为安慰剂组(A组,35例)和吡格列酮组(B组,35例),治疗3个月后,检测两组患者服药前后空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖基化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:治疗后吡格列酮组FBG、FINS、HbA1c、TG、PAI-1明显下降(P<0.01),HDL-C、ISI显著升高(P<0.01),t-PA无明显变化,且PAI-1与FINS、TG呈正相关(r=0.437,r=0.342,P<0.05),与ISI呈负相关(r=-0.552,P<0.01);安慰剂组各参数于治疗前后无显著性差异。结论:吡格列酮能够显著降低T2DM患者的PAI-1。     

乳鼠心肌细胞培养

目的　鉴于心肌细胞的培养具有简便、定量、重复性好以及不受神经体液因素的影响等特点 ,使得心肌细胞培养有着广阔的应用前景。本文将心肌细胞的分离、纯化、培养及其优点进行一综述     

松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢的影响

目的 探讨松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢影响的特点,并初步探讨其对db/db糖尿病小鼠肝脏组织中成纤维细胞因子21（fibroblast growth factor 21,FGF21）含量的影响,寻找松果菊苷调节2型糖尿病血脂代谢可能的途径。方法 取6周db/db小鼠20只,随机选取10只作为模型组,剩余10只作为实验组,另取6周db/m小鼠8只（SPF级）作为空白对照组,适应2周后检测空腹血糖均>16.7mmol/L进入实验。各组予以灭菌蒸馏水、松果菊苷、灭菌蒸馏水灌喂8周后,取血清测总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）的水平,并取肝脏组织测FGF21的水平。结果 模型组血清TG、TC及LDL含量明显高于对照组（P<0.01）,血清HDL的含量明显低于对照组（P<0.01）;实验组血清TG、TC及LDL的水平明显低于模型组（P<0.01）,血清HDL的含量明显高于模型组（P<0.01）;模型组小鼠肝脏中FGF21表达的水平显著低于对照组（P<0.01）,实验组小鼠肝脏中FGF21表达的水平显著高于模型组（P<0.01）;模型组小鼠血清ALT、AST的含量显著高于对照组（P<0.01）,实验组小鼠血清ALT、AST的含量显著低于实验组（P<0.01）。结论 松果菊苷给药8周后能够显著改善db/db糖尿病小鼠血脂代谢紊乱,且不加重肝功能损害,其作用机制可能与其提高肝脏组织中FGF21表达水平有关。     

雌二醇对胃癌细胞周期的影响

目的:初步探讨雌二醇（E2）对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法:SGC-7901细胞分为E2干预组和对照组,E2干预组加入不同浓度E2（0.1μmol/L、1.0μmol/L）干预24小时,对照组加入等体积含无水乙醇的培养基。CCK8检测E2对胃癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的分布,PCR检测E2对胃癌细胞雌激素受体ERα和ERβ mRNA表达水平的影响,Oncomine公共数据库查询ERα的表达情况。结果:E2对胃癌细胞的增殖抑制率具有浓度依赖性。E2处理组SGC-7901细胞G0/G1期细胞比例［(68.866±3.336)%］较对照［(59.333±0.294)%］显著增加,G2期和S期细胞总比例下降,1.0μmol/L E2作用可使胃癌细胞SGC-7901发生G1期阻滞（P<0.01）。两种雌激素受体（ERα和ERβ）均表达于胃癌细胞SGC-7901,且其相关基因ERα和ERβ mRNA表达水平不随E2浓度的增加而改变。利用Oncomine公共数据库查询发现ERα在胃癌中的表达高于癌旁。结论:E2直接作用可抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,引起G1期阻滞。     

中青年与老年冠心病患者肥胖情况比较

目的 探讨中青年冠心病患者相对于老年冠心病患者的肥胖发病情况.方法 选取住院治疗的中年冠心病患者,按年龄分为中青年组和老年对照组,对其肥胖情况进行统计分析.结果 中青年冠心病组患者的肥胖程度显著高于老年冠心病患者.结论 肥胖的年轻化可能是心血管疾病年轻化的重要原因之一,早期预防肥胖可能是减少和延缓心血管发病的有效途径...     

吡格列酮对2型糖尿病患者血浆致动脉硬化指数的影响

将70名2型糖尿病患者以随机双盲法分为吡格列酮组(35例)和安慰剂组(35例),治疗3个月后,检测两组服药前后空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的水平,并计算胰岛素敏感指数和血浆致动脉硬化指数。治疗后吡格列酮组空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、甘油三酯、血浆致动脉硬化指数明显下降(P<0·01),高密度脂蛋白胆固醇、胰岛素敏感指数显著升高(P<0·01),且血浆致动脉硬化指数与胰岛素敏感指数呈负相关(r=-0·578,P<0·01);安慰剂组各参数于治疗前后比较差异无统计学意义(P>0·05)。说明吡格列酮能够显著降低2型糖尿病患者的血浆致动脉硬化指数。     

线粒体DNA突变与衰老及冠心病的关系

近年来,线粒体DNA(mtDNA)与衰老和某些心脏疾病的研究发展较快,mtDNA突变不仅可导致器官老化,而且可引发多种心血管疾病,其结果可能是mtDNA突变造成线粒体氧化磷酸化(OXPHOS)功能障碍、ATP产生不足所致.本文就此作一综述.     

血管内皮生长因子真核表达载体的构建及其在培养鼠心肌细胞中的表达

目的　构建血管内皮生长因子 (VEGF1 6 5)真核表达载体 ,并检测其在鼠心肌细胞中的表达。方法　应用DNA重组方法 ,将编码hVEGF1 6 5全长cDNA克隆于真核表达载体pCR3中 ,构建pCR3.hVEGF1 6 5真核表达载体 ,使用脂质体包裹的方法将真核表达载体pCR3.hVEGF1 6 5转染至培养鼠心肌细胞中 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)、Southernblot、免疫组织化学染色、酶联免疫吸附测定法检测VEGF1 6 5基因在心肌细胞中的表达和分泌。结果　将构建好的真核表达载体pCR3.hVEGF1 6 5转染心肌细胞后 ,VEGFmRNA及蛋白水平明显增高。结论　成功构建了真核表达载体pCR3.hVEGF1 6 5,其转染心肌细胞后能够获得较高水平的VEGF蛋白。