以新型沙丁胺醇抗原为基础建立ELISA法测定沙丁胺醇残留量

合成了一种新型沙丁胺醇抗原, 并以此建立酶联免疫分析法 (ELISA)。利用4-氨基苯甲酸作为偶联剂使沙丁胺醇与载体蛋白连接得到免疫抗原, 免疫家兔得到沙丁胺醇多克隆抗体。以克伦特罗-卵蛋白代替包被抗原所建立的ELISA法对沙丁胺醇的半数抑制浓度 (IC₅₀) 为8.97 ng·mL⁻¹, 该抗体检测克伦特罗时有较强的交叉反应 (107%), 有望同时测定食物中的克伦特罗和沙丁胺醇残留。用该法测定猪肝中的沙丁胺醇加标量, 回收率在70%～99%, 批内差<13.3%, 批间差<14.3%。利用该法可快速、灵敏地检测沙丁胺醇的药残量, 为最终开发商品化的酶联免疫试剂盒打下良好的基础。     

四环素人工抗原的合成与鉴定

目的:对牛血清白蛋白进行羧基化和四环素的衍生化,制备更高偶联比的四环素(TC)-牛血清白蛋白(BSA)偶联物并进行鉴定.方法:四环素通过两步衍生化后,形成一种活泼的重氮化中间产物,与羧基化的BSA上的表位羧基反应,合成TC-BSA偶联物.结果:HPLC-MASS图谱鉴定表明成功的制备了四环素衍生物,红外及紫外扫描图谱表明,偶联成功,计算得偶联比分别为7:1和11:1. 结论:BSA经过羧基化后的偶联效果明显好于未经羧基化的BSA,并成功制备了TC-BSA人工抗原.     

特布他林人工抗原的合成和抗体的制备

特布他林是一种在食品中禁用的β-兴奋剂类药物,为建立针对β-兴奋剂的残留快速检测方法,作者研究了特布他林免疫原的合成和抗体的制备方法.采用1,4-丁二醇缩水甘油醚(BDE)、对氨基苯甲酸(ABA)将特布他林(TER)分别与cBSA、cOVA偶联,合成了特布他林免疫原和包被抗原,并对其进行了紫外分析.用特布他林免疫原TER-cBSA免疫新西兰大白兔,获得了多克隆抗体,采用间接ELISA法检测抗体的性质,所得抗体效价达到51 200,IC50值为9.25 ng/mL,证明了特布他林人工抗原偶联成功,所制备的特布他林抗体具有很高的灵敏度.