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视网膜色素上皮单细胞层的培养 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统培养视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞,为视网膜色素上皮细胞转运等功能的研究提供体外模型。方法:将ARPE-19细胞接种到底部为层黏蛋白包被的微孔滤膜的小室(内室)中,并将此小室放到6孔培养板(外室)内进行培养。用吉姆萨染色观察细胞生长情况,并用含有台酚蓝的培养液检测细胞间的紧密连接。结
果:将1.0×105•mL-1的ARPE-19细胞混悬液1.5 mL接种于内室的层黏连蛋白包被的微孔滤膜上进行培养,大约第5天细胞长满滤膜,经吉姆萨染色,在光学显微镜下确认视网膜色素上皮细胞充分融合,在层黏连蛋白表面形成一整齐的单细胞层,且台酚蓝不能通过该单细胞层。结论:培养在层黏连蛋白包被的微孔滤膜上的视网膜色素上皮细胞,如同体内的视网膜色素上皮细胞一样形成单
细胞层,细胞间形成功能性的紧密连接,可作为视网膜色素上皮细胞转运等功能研究的体外模型。 相似文献
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神经外科病人以急、危重为特点,病人经过抢救,病情稳定后很多会有昏迷、偏瘫、精神障碍等后遗症而不能经口进食,且病程长、消耗大,容易引起不同程度的营养不良。以往对这类病人采用的肠内营养方式主要为鼻胃管鼻饲,我科自1998年开始应用经皮内镜下胃造口术(PEG),取得良好的效果,现将其护理体会报告如下。1临床资料1.1一般资料60例患者中男45例,女15例,年龄29~86岁。其中脑外伤34例,脑血管意外18例,脑积水2例,运动神经元性疾病1例,缺氧性脑病5例,其中气管切开23例。全部病例均表现为不能经口吞下食物,但胃肠功能尚可,术前均有留置鼻胃管进… 相似文献
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乳腺癌预后的分子标志物研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
准确判断乳腺癌的预后有利于临床疗效评价.目前乳腺癌预后相关的分子标志物研究已成为一个热点,现就此领域的研究现状及最新进展作一综述. 相似文献
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宇航员进入微重力环境后可出现一系列眼部改变,这些改变若得不到及时干预或治疗,将导致宇航 员出现长期或永久的视力损害,不仅影响飞行任务的执行,还威胁宇航员的人身安全。尽管目前宇 航员出现这些眼部改变的确切机制尚不明确,但相关研究已发现,宇航员进入微重力环境后会出现 颅内压升高、神经系统改变、生化改变及淋巴、静脉系统循环障碍,这些可能都参与了疾病的发生 与发展。现归纳国内外近50年来关于宇航员进入微重力环境后出现的眼部改变及其可能的发生机制, 以期寻找针对这些眼部改变的预防和治疗措施,为宇航员筛查、训练及防治工作提供相关理论支持。 相似文献
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目的探讨乳腺癌前哨淋巴结(SLN)活检的可行性、准确性以及比较几种方法对SLN转移灶检出率的差异。方法对86例乳腺癌患者用亚甲蓝示踪行SLN活检,获取的SLN分别进行常规HE染色、连续病理切片、免疫组化测定CK19和MUCI粘蛋白、RT-PCR法测定CK19和MUCI粘蛋白,比较4种方法对SLN转移灶的检出率。结果86例乳腺癌患者中,80例检出SLN,检出率93.0%,共切除151枚SLN。SLN常规HE染色法预测腋窝淋巴结转移状态敏感性94.74%(36/38),准确率97.50%(78/80),假阴性率5.26%(2/38)。常规HE染色诊断检出率46.36%;连续切片诊断检出率54.30%;免疫组化检测检出率56.29%;RT-PCR法CK19、MUCI粘蛋白联合检测检出率73.50%。结论SLN活检可有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,RT-PCR法检测乳腺癌SLN转移最敏感。 相似文献
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目的:分析地塞米松对低渗诱导的人小梁细胞容积敏感性氯电流的影响,探讨容积敏感性氯通道(VACC)在激素性青光眼(GIG)发病中的可能机制。方法:人小梁细胞悬液接种于直径35 mm塑料培养皿中单层生长,按培养液中是否含地塞米松分组,即正常培养液组和地塞米松培养1、3和7 d组,共4组,采用全细胞膜片钳技术分别记录4组细胞在低渗状态下的氯电流密度值,比较各组数值的差异。结果:正常培养液组小梁细胞低渗刺激后,在+100和-100 mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值分别为(19.94±0.87)和(-6.53±0.41)pA/pF。地塞米松培养1、3和7 d组的小梁细胞低渗刺激后,在+100和-100 mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值分别为(19.39±1.40)和(-6.42±0.28)pA/pF、(17.97±2.35)和(-5.82±0.94)pA/pF、(17.16±1.16)和(-5.65±0.43)pA/pF。地塞米松培养1 d组小梁细胞较正常培养液组低渗刺激后的外向和内向电流密度值减小,但差异无统计学意义(P>0.05);地塞米松培养3和 7 d组小梁细胞较正常培养液组小梁细胞低渗刺激后的外向和内向电流密度值明显减小(P<0.05)。结论:地塞米松导致体外培养的正常人小梁细胞容积敏感性氯电流密度值降低,进而影响小梁细胞容积调节,可能是导致GIG房水流出阻力增加的原因之一。 相似文献
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肿瘤细胞向血管外游走过程中内皮细胞调控机制的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:阐明肿瘤细胞向血管外游走过程中内皮细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及Rho/Rho激酶的调控作用。方法:利用肿瘤细胞向血管外游走的体外模型,观察肿瘤细胞的血管外游走状况,并测定肿瘤细胞游走过程中血管内皮单细胞层的电阻变化;通过Western blot评价肿瘤游走过程中内皮细胞肌球蛋白轻链(MLC)的磷酸化水平。结果:肿瘤细胞可以穿过血管内皮细胞游走至血管外;并且肿瘤细胞向血管外游走过程中跨血管内皮细胞层的电阻下降、内皮细胞MLC的磷酸化水平升高;而内皮细胞肌球蛋白轻链激酶抑制剂(ML-7)及Rho抑制剂(C3转移酶)、Rho激酶抑制剂(Y-27632)能够抑制上述变化。结论:内皮细胞MLCK及Rho/Rho激酶可以通过控制MLC的磷酸化水平来引起内皮细胞骨架蛋白的改变,从而调控肿瘤细胞穿过内皮细胞间缝隙向血管外游走。 相似文献