共转录因子CITED1在小鼠骨代谢中的调控作用

目的在体研究CITED1在骨代谢即成骨/破骨平衡中的调节作用,为骨质疏松的治疗提供相应的理论基础。方法利用野生型小鼠(WT小鼠)和构建的CITED1基因敲除小鼠(KO小鼠),显微电子计算机断层扫描(CT)定量测量WT小鼠和KO小鼠股骨长度、骨量和骨皮质以及骨松质厚度等骨骼表型。用ELISA检测骨代谢的血液学相关指标。用RT-qPCR检测骨标志基因的表达,从分子水平探究骨代谢改变的原因。结果 KO小鼠颅骨成骨细胞中CITED1表达极少,表明敲除成功。KO小鼠股骨长度、骨量和骨皮质以及骨松质厚度显著高于WT小鼠。KO小鼠外周血血清中I型原胶原肽(P1NP)、骨钙素(OC)和骨碱性磷酸酶(BALP)浓度均显著高于WT小鼠,而抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的浓度显著低于WT小鼠。RT-qPCR结果显示,KO小鼠颅骨成骨细胞中OC和BALP基因表达较WT小鼠显著增加(P<0. 001);同时,KO小鼠颅骨成骨细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的表达较WT小鼠显著降低(P<0. 05)。结论小鼠CITED1敲除后可以通过上调OC和BALP基因表达,下调TRAP基因的表达,促进骨形成,抑制骨吸收。     

经斜侧方入路椎体间融合术与经椎间孔腰椎椎体间融合术治疗腰椎退行性疾病的疗效比较

目的探讨经斜侧方入路椎体间融合术(OLIF)与经椎间孔腰椎椎体间融合术(TLIF)应用于腰椎退变性疾病治疗中的临床价值。方法选择2015年3月至2018年5月90例腰椎退变性疾病患者,利用随机数字表法分为研究组与对照组,每组45例。研究组予以经斜侧方入路椎体间融合术治疗,对照组予以经椎间孔腰椎椎体间融合术治疗。比较两组手术情况、治疗效果及随访情况。结果研究组手术时间、术中出血量显著少于对照组(P0.05);两组治疗前VAS法、ODI量表评分比较,差异未见统计学意义(P0.05),治疗后两组VAS法、ODI量表评分均较之前有所下降(P0.05),但组间比较差异未见统计学意义(P0.05);两组治疗后均予以1年有效随访,研究组1级融合率为93.33%(42/45),与对照组[86.67%(39/45)]比较,差异未见统计学意义(P0.05)。结论应用经斜侧方入路椎体间融合术、经椎间孔腰椎椎体间融合术治疗腰椎退行性疾病患者均可获得理想疗效,但前者手术用时、术中出血量更低。     

cAMP/PKA/CITED1信号通路介导的甲状旁腺激素在骨代谢中的作用机制

目的在动物整体水平上分析甲状旁腺激素(PTH)对成骨的调节作用,探讨Glu/Asp丰富羧基端域Cbp/p300相互作用反式激活因子1(CITED1)在骨代谢中的调节作用。方法以间断小剂量PTH皮下注射的野生型C57BL小鼠为实验组,同体积生理盐水皮下注射的野生型C57BL小鼠为对照组。处死后取股骨检测小鼠的骨代谢表型,如皮质骨、松质骨的厚度和骨量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测量小鼠血清中Ⅰ型原胶原肽(PⅠNP)、骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的浓度。取1日龄野生型C57BL小鼠头盖骨制备颅骨成骨细胞,分别经含PTH(PTH处理组)、含PTH和蛋白激酶A(PKA)信号通路特异性抑制剂H 89 2HCl(共处理组)及不含此两制剂(未处理组)的培养基培养,Real-time PCR和Western blot检测PTH处理组、共处理组、对照组颅骨成骨细胞中骨代谢相关分子的表达。结果显微CT定量测量结果,实验组小鼠反映皮质骨及松质骨的骨量和骨厚度指标均较对照组明显增高(P <0. 05,P <0. 01)。ELISA检测结果示,实验组小鼠外周血清中PⅠNP、OC、BALP水平较对照组显著增加,TRAP浓度较对照组显著降低(P <0. 01,P <0. 05)。Real-time PCR结果显示,共处理组颅骨成骨细胞OC、碱性磷酸酶(ALP)的mRNA表达较PTH处理组显著下降,TRAP的mRNA表达较PTH处理组增加(P均<0. 01)。Western blot细胞定位结果发现,不用PTH刺激的未处理组,CITED1蛋白均定位于细胞浆中;PTH处理组,CITED1明显转向细胞核;加H 89 2HCl的共处理组CITED1向胞核转移被抑制。结论PTH可能通过cAMP/蛋白激酶A(PKA)信号通路促进共转录因子CITED1出入细胞核,特异性地调节OC及ALP基因的表达,参与骨代谢的调节。     

上调长链非编码RNA SNHG12表达减轻过氧化氢诱导的神经细胞活性下降及细胞凋亡和过度自噬

背景：脊髓损伤后的继发性损伤被认为是其致残率高的主要因素。抑制氧化应激和细胞凋亡的病理级联反应,延缓疾病进程,是减轻脊髓损伤的一大治疗方向。长链非编码RNA SNHG12被认为与细胞的氧化还原稳态具有相关性,其能否调控过氧化氢过载引起的神经细胞氧化损伤目前仍未知。目的：探究长链非编码RNA SNHG12在过氧化氢诱导神经细胞HT22氧化损伤中的作用及机制。方法：(1)100μmol/L过氧化氢干预HT22细胞6 h,建立细胞氧化损伤模型。(2)通过转染提升HT22细胞中SNHG12表达水平,采用CCK-8、锥虫蓝染色、TUNEL染色和蛋白质免疫印迹实验评估SNHG12表达水平对HT22细胞活力、凋亡和自噬的影响。(3)采用荧光素酶实验验证SNHG12/miR-320a/SIRT5的靶向关系。(4)通过转染分别促进HT22细胞中miR-320a和SIRT5上调,采用逆转实验探讨miR-320a和SIRT5在SNHG12发挥保护作用中的调控作用。结果与结论：上调SHNG12表达可以减轻过氧化氢诱导的细胞活性下降、细胞凋亡和过度自噬。荧光素酶实验证实SHNG12/miR-320a/SIRT5...     

杂交术治疗多节段颈椎病后生物力学有限元分析

目的　有限元分析法探讨应用Mobi-C假体的颈人工椎间盘置换（artificial cervical disc 　replacement, ACDR）联合椎间植骨融合术（Anterior cervical decompression and fusion,ACDF）治疗多节段颈椎病的生物力学特点。 方法　在已验证的下颈椎有限元模型基础上,对模型施加了头颅预载荷74 N及1.8 Nm纯力矩,模拟2组行C-ADR联合ACDF手术方式及1组行三节段ACDF手术方式,在各工况下分析术后2组杂交术式假体各部件的应力特点和3组重建模型各节段关节突关节的应力改变。 结果　⑴杂交术式重建模型中Mobi-C假体上终板应力均高于下终板应力;⑵终板应力分布主要集中在终板中央偏后,最高值分别为M1组79.4Mpa,M2组为70.9Mpa;内衬应力分布集中于中央两翼,最高值分别为M1组11.6Mpa,M2组为14.4Mpa;⑶三处理组与正常组相比,行C-ADR节段的关节突关节应力增加;行ACDF节段的关节突关节应力降低;而三节段融合组邻段关节突关节应力较正常组及杂交术式组明显增高。 结论　应用Mobi-C假体的杂交术式治疗多节段颈椎病,假体不易出现下沉,较多节段融合术式能更好的维持邻段关节突关节应力。     

内固定治疗原发性胸腰椎化脓性感染的效果

目的:探讨内固定治疗原发性胸腰椎化脓性感染的临床疗效。方法:选取2010年1月至2017年12月深圳市第二人民医院收治的原发性胸腰椎化脓性感染患者27例,患者均采用一期固定,自体髂骨植骨,病灶清除手术,对比术前与术后各项感染指标及影像学表现进行临床疗效分析。结果:患者术前与术后2周,术后6个月白细胞(WBC),红细胞沉降率(ESR),C反应蛋白(CRP),降钙素原(PCT),视觉模拟评分法(VAS),日本骨科协会(JOA)评分评估治疗,脊柱后凸角度(Cobb角),组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:内固定应用于脊柱化脓性感染是安全而有效的。