阳离子交换一步层析法纯化抗gp130单克隆抗体

目的:建立从小鼠腹水中纯化抗gp130单克隆抗体(mAb)B-S12的一步层析方法。方法:小鼠mAb腹水样品经离心后,进行阳离子交换层析柱纯化。检查了上样缓冲液的pH值和洗脱液的离子强度梯度对mAb纯度的影响。纯化后mAb的生物学活性用MTT比色法检测。结果:在pH4.0、20mmol/LHEPES缓冲液条件下上样,用0～1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,可获得纯度超过90%的mAbB-S12,回收率为52%。纯化后的mAb对XG-2细胞有明显的促增殖作用。结论:建立的一步纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高及生物学活性好。