DiI荧光示踪剂在小鼠骨髓细胞肝内移植中的研究

1 ,1’ 双十八烷 3,3,3’ ,3’ 四甲基吲哚羧花青 高氯酸盐 (DiI )是一种新的荧光物质。 1986年Honig等[1] 首次报道DiI可作为荧光示踪剂用于培养的神经细胞和骨骼肌细胞。本研究发现 ,DiI可标记骨髓细胞。报道如下。一、材料与方法1.实验动物 :供、受者均采用健康雄性BALB/C小白鼠 ,重 (2 0± 2 ) g ,共 2 4只 ,由哈尔滨兽医研究所提供。实验动物分成 2组 ,供者组 16只 ,受者组 8只。2 .实验方法 :(1)DiI购于美国Sigma公司。用无水乙醇溶解DiI结晶颗粒 ,配成含 1mmol/LDiI的溶液 ,并用0 .2 μm滤过膜滤过 ,在室温下 ,密闭避光保…     

冠状动脉微循环功能障碍的研究进展

临床上发现10%~30%的患者有典型的心绞痛症状,但是冠状动脉造影时常没有明确的冠状动脉狭窄。现认为此类现象是由冠状动脉微循环功能障碍引起的,且发现冠状动脉微循环功能障碍患者的不良心血管事件发生率高。随着人们对冠状动脉微循环功能障碍的重视,逐渐发现了冠状动脉微循环功能障碍的多种发病机制,也提出了多样性的评估诊断方法及药物治疗手段,现就冠状动脉微循环功能障碍的研究进展进行总结,为冠状动脉微循环功能障碍的循证管理策略提供依据。     

人组织因子途径抑制物基因在兔颈动脉损伤血栓形成中的作用

Objective To observe the effects of tissue factor pathway inhibitor(TFPI) on thrombosis formation in rabbit carotid arteries after ballon injury. Methods Fouty rabbits with the weight 2.5-3.0 kg were respectively divided into 4 groups, Ad-TFPI, Ad-LacZ, PBS and normal control groups. The normal control group was not given any treatment and other 3 groups were given 0.2 ml Ad-TFPI, Ad-LacZ or PBS reproduced by the Dispatch catheter respectively after the PTCA balloon iniury on the right carotid arteries. Ten days after gene transfer the repeated balloon injury was performed in the 3 groups, and the first balloon injury was performed in the normal control group by the same method. The carotid blood flow was recovered immediately after the injury. Thirty minutes later all the animals were sacrificed. The injured carotid arteries and one part of contralateral normal artery were cut down, scissored along the long axis, flattened and fixed in the 2% glutaral. The platelet aggregation and thrombosis formation on the luminal surfaces was observed under electron microscope. Results The electron microscope results showed that the vascular endothelial cell structure was integrated and lined up in order in the nomal artery which had no any injury. After the balloon injury in the normal control group, the structure of the endothelial cell was disintegrated, and there was some platelet aggregation but no fibrosis formation. A large amount of platelet aggregated but no fibrosis formed in Ad-TFPI group after the repeated balloon injury. A large amount of fibrosis formed and red cells piled up in the Ad-LacZ and PBS group. The positive rate of thrombosis formation among groups had siginificant differences(χ2=14.95, P<0.01). The positive rate in Ad-TFPI group(20%) was lower than that in Ad-LacZ group(80%, χ2=7.20, P<0.01) and PBS group(70%, χ2=5.05, P<0.05), but was higher than that in the normal control group(10%, χ2=0.39, P>0.05). The positive rate in Ad-LacZ group(80%) was higher than in the normal control group(10%, χ2=9.90, P<0.01) and in the PBS group(70%, χ2=0.27, P> 0.05). The positive rate in PBS group(70%) was higher than that in the normal control group(10%, χ2=7.50, P< 0.01). Conclusions The repeated balloon injury method can cause a large amount of fibrosis formation in the rabbit carotid. TFPI gene inhibits thrombosis formation in balloon-injured rabbit carotid arteries.     

组织因子途径抑制物基因转移对动脉血栓形成的抑制作用

目的:研究日本凝血病毒(HVJ)-人工病毒包膜(AVE)脂质体介导的组织因子途径抑制物(TFPI)基因转移对损伤血管局部血栓形成抑制作用的有效性及安全性。方法:在兔球囊损伤髂动脉局部分别转染含TFPI基因(TFPI组)或pcDNA3．1质粒(空质粒组)的HVJ-AVE脂质体复合物或HVJ-脂质体(空载体组)或生理盐水(盐水组),1,3和7天后用逆转录多聚酶链反应和免疫组化法检测血管局部TFPI表达;组织病理学和扫描电镜观察比较各组血栓形成情况;各组实验动物观察6个月评价这种疗法的安全性。结果:TFPI基因转移后1天即检测到TFPI mRNA表达,第3天为高峰;TFPI组血栓形成例数明显少于其它3组(P<0.05);体内凝血指标及生化指标无明显变化;重要脏器组织病理学检查未见明显变化;各器官未见到HVJ感染及复制迹象。结论:HVJ-AVE脂质体介导TFPI基因转移能够安全而有效地抑制损伤血管局部血栓形成。     

人组织因子途径抑制物腺病毒表达系统的构建及体内表达

目的构建携载人组织因子途径抑制物(tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础。方法利用基因重组技术,将人TFPI基因连接到穿梭质粒pDC316中,然后将腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre以及重组穿梭质粒pDC316-TFPI共转染293细胞,并在其中发生Cre重组酶介导的位点,特异性重组及腺病毒包装,扩增后进行滴度测定。将包装成功的携带人TFPI基因的重组腺病毒(Ad-TFPI)转染兔颈动脉,并用携带LacZ报告基因的重组腺病毒(Ad-LacZ)作为对照,3d后RT-PCR、ELISA法检测人TFPImRNA、蛋白的表达。结果得到了携带人TFPI基因的重组腺病毒,包装的病毒蚀斑形成单位(plaqueformationunit,PFU)滴度为7.6×1012/L。在Ad-TFPI转染兔颈动脉后3d,RT-PCR法和ELISA法均检测出TFPI表达,Ad-LacZ转染后未测到人TFPI的表达。结论成功构建了人TFPI腺病毒表达载体,为下一步的基因治疗提供了基础。     

论生活习惯病

生活习惯 ,也称为生活方式 ,是指人们个体或群体日常生活的常规行为 ,包括饮食、衣着、运动、作息、交流、嗜好等所有的生活习好。生活习惯最终受社会发展的客观变化、社会经济模式的性质所决定 ,为一定的社会经济模式条件下反映民族、阶级、社会群体、个人活动重要特征系统的总和。近些年来 ,社会医学家针对生活习惯问题开展综合性的社会医学研究 ,客观地揭示出生活在不同条件下、不同年龄、性别、职业、社会成分的全体居民及其人群健康的社会制约关系 ,发现生活习惯和生活条件在许多方面对个体和社会健康起着决定和中介作用。健康的生活可…     

胺碘酮、心律宁和普鲁卡因胺对缺血性室性心律失常疗效的比较研究

目的探讨冠心病患者室性心律失常的有效治疗方法。方法通过动态心电图及12导联心电图观察胺碘酮、心律宁及普鲁卡因胺对冠心病室性心律失常的临床疗效。结果胺碘酮组疗效明显优于心律宁组及普鲁卡因胺组，经t检验证实有统计学意义（P〈0．05），且未发现明显副作用。结论胺碘酮治疗冠心病室性心律失常临床疗效较好，是一种较安全的药物治疗方法，临床可推广应用。     

塞莱昔布对肝癌细胞抑制作用的实验研究

如何提高肝癌的治疗效果,降低发生率及死亡鲻率,一直是医学研究的热点.近年来,非甾体类消炎药物（NSAIDs）的抗肿瘤作用已逐步得到认同,这就为肝癌的治疗开辟了新的途径,其中特异性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞莱昔布（Celecoxib）的上市使得临床应用此类药物治疗肝癌的可能性大大提高.本研究首次检测到大鼠肝癌细胞CBRH7919中COX-2的表达,并且应用Celecoxib观察其对肝癌细胞的抑制作用,现介绍如下.     

心肌梗死急性期坏死心肌内的细胞移植研究

近年来,为了逆转心肌梗死后心力衰竭的发生,学者们尝试将细胞移植技术应用于心血管领域来修复受损的心脏、替代坏死的心肌细胞。本实验旨在通过大鼠急性心肌梗死模型探讨体外培养的胚胎心肌细胞在急性心肌坏死内存活的可能及其衍变。一、材料与方法1.实验动物:纯种系Wistar大鼠(雄性,体重2 5 0～3 0 0 g) ,购自哈尔滨医科大学第二临床医学院动物实验中心。2 .实验试剂:DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶(Gibco公司) ;5 溴脱氧尿核苷(BrdU )、抗BrdU单克隆抗体(Br dU Ab ,Sigma公司)。3 .实验分组:大鼠平均分为3组。移植组与空白组:开胸…     

心肌组织柯萨奇毒-腺病毒受体表达与病毒持续感染的关系

目的探讨心肌组织中柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)表达与病毒性心肌病发病的关系。方法应用免疫组化技术检测慢性心肌炎和扩张型心肌病(DCM)心肌组织中CAR的表达;应用巢式聚合酶链反应检测相应心肌组织中柯萨奇B组病毒(CVB)RNA和腺病毒(AV)DNA,并以冠心病和先心病等非感染性心脏疾病心肌组织及意外事故死亡者正常心肌标本为对照组。结果26例心肌炎和39例DCM心肌组织中均检测到较高水平CAR表达(0.011 6±0.003 6),而对照组仅有较低表达(0.004 0±0.0025),两组比较差异有非常显著意义(P< 0.001)。心肌炎和DCM患者心肌中CVB RNA 阳性率分别为42%和35.9%(平均38.5%),AV DNA阳性率分别为15.4%和10.3%(平均12.3%),对照组14例均为阴性。心肌组织病毒核酸阳性者CAR免疫组化面积积分(0.013 1±0.003 4)较阴性者(0.010 1±0.003 0)明显增高(P< 0.001)。结论CAR在慢性心肌炎和DCM心肌组织中表达明显增高,心肌组织中CVB和AV感染与CAR表达上调相关,在慢性心肌炎和DCM的发病过程中可能起重要作用。