慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响

目的： 探讨脑中性内肽酶（NEP）外源表达对神经毒物质β淀粉样肽（Aβ）诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法: 采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞，制备高滴度病毒载体，感染Aβ处理的SK-N-SH细胞，用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果: 胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ，其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡，细胞存活率于感染病毒后48 h最强，为对照的170%（P＜0.01）,NEP活性组的凋亡率为3.86%，低于对照组的6.41%；RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达，抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论: NEP可以降解Aβ，可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。     

人参皂苷Rg1对Aβ_(25-35)诱导的Alzheime′rs病细胞模型作用的研究

目的研究人参皂苷Rg1对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导的神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)损伤的保护作用。方法用Aβ25-35处理人SK-N-SH细胞,模拟Alzhermer′s(AD)病人体内神经元病理损伤,并以人参皂苷Rg1拮抗其作用。采用MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、中性内肽酶(NEP)基因的表达情况;Western Blot检测细胞APP和NEP蛋白的表达情况。结果20μmol/LAβ25-35诱导SK-N-SH细胞24 h细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为33.9%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性降低。而人参皂苷Rg1能提高细胞的存活率,减少细胞损伤,使细胞培养液及细胞内MDA含量降低,SOD活性提高(P<0.01),RT-PCR结果显示人参皂苷Rg1可降低APP基因的表达并提高NEP基因的表达,同时Western Blot结果显示人参皂苷Rg1可降低APP蛋白的表达并提高NEP蛋白的表达。结论人参皂苷Rg1对Aβ25-35造成的细胞毒性具有一定的保护作用,其作用机理可能与人参皂苷Rg1能提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及下调APP基因的表达,上调NEP基因的表达,从而抑制细胞凋亡有关。     

新形势下医学专科学校生物化学分层教学研究

分层教学起源于美国,从1916年开始,国外对分层教学进行了大量研究.在国外,分层教学有多样形式,美国“分层教学”与“小班化”教学、“主体教育”与“赏识教育”相结合,有基础班,提高班等[1].但在中国,学校多数是大班额超负荷教学,如何实施分层教学值得探究.高职高专因生源数量相对不足,使新生的成绩和综合素质偏低且差距逐渐拉大.关键词：医学专科学校;生物化学;分层教学分类号：G424 文献标识码：B文章编号：1674-0947（2014）01-0075-03     

砷的生化效应及治疗白血病的机理

砷是自然界分布广泛的一种化学物质 ,常见的中药砷剂主要包括砒石、砒霜和雄黄 ,许多砷化合物曾用于治疗梅毒、气喘、疟疾、结核病、寄生虫病。由于砷化合物具有高毒性 ,所以砷制剂已被更安全 ,更有效的药物所替代。但近年来研究发现 ,砷剂治疗白血病 ,尤其是急性早幼粒细胞白血病 (Ｍ3或ＡＰＬ)和慢性粒细胞白血病 (ＣＭＬ)具有明显的临床疗效。砷化合物是公认的有毒物质 ,砒霜 (Ａｓ2 Ｏ3)由口摄入的急性中毒剂量是 5～ 50ｍｇ ,致死剂量在 6 0～2 0 0ｍｇ范围内变化。慢性中毒表现为皮肤色素沉着、末梢神经炎、心血管损害等。1　砷的生物…     

医学专科学校生物化学教学如何面对新的教学问题

近几年来,我校为适应医学专科学校面向基层的教学方针,对基础课程教学课时做了较大地调整,使生物化学的教学面临着课时少而内容多的教学难题.如何在课时少的情况下,比较系统完整地讲授这门课程,使学生能够较全面掌握其基本内容,是广大生物化学教师面临的一个问题.对此,我们进行了一些教学改进和探索,并收到了较好的教学效果,现总结报告如下.     

人参皂苷Rg1对A?25-35诱导的SK-N-SH细胞凋亡的保护作用

人参皂苷Rg1是从人参中提取的主要有效成分,也是中药古方开心散的活性组份之一,属原三醇类化合物,是近年研究较多的一种人参单体,其主要的靶器官是中枢神经系统。目前关于开心散作用于阿尔茨海默病(Alzheimer dis-ease,AD)模型的研究较多,但有关开心散中的某一活性组分作用于AD     

生物化学多媒体教学效果分析

随着计算机技术的普及和各种计算机软件的广泛应用,多媒体教学已被高等院校广泛采用,并深受广大师生的欢迎.但有关多媒体教学与传统教学效果的比较,文献报道少见.为此,笔者采用了多媒体和传统教学法,以学生期末考试的成绩为评价指标,对两者教学效果进行了比较分析,现报告如下.     

临床生化检验实验教学的改革与探索

临床生化检验是医学检验专业的主要专业课程之一,是一门以实验为主的学科。临床生化检验的实验教学是临床生化检验教学的重要组成部分,在医学检验专业的教学中占有重要地位。为进一步提高临床生化检验实验教学的质量和水平,改革和完善该课程的实验教学工作,为学生在今后的工作中打下牢固基础,我们采取了以下措施。1临床生化检验实验教学中存在的问题从近几年来临床生化检验实验教学的情况和效果来看,主要存在如下几个方面的问题:①“重理论轻实践”,使学生对实验课不够重视,或逃避实验课,或上实验课时敷衍了事,影响了实验教学的效果和质量。…     

bcl-2基因在肿瘤组织中表达的研究进展

以往人们认为肿瘤的发生是由于细胞增殖和死亡的动态失衡而引起细胞增殖的失控所致，即刺激细胞增殖的癌基因被激活或抑制细胞增殖的癌基因被抑制或突变失活，使细胞增长的速度超过了死亡速度，从而导致肿瘤的发生。而近年来，随着对bcl-2基因认识和研究的不断深入，越来越多的资料显示：与细胞恶性增殖和分化受阻一样，细胞凋亡异常     

人参皂苷Rg1对Aβ25-35诱导的Alzheimer's病细胞模型作用的研究

目的研究人参皂苷Rg1对β-淀粉样肽（Aβ25-35）诱导的神经母细胞瘤细胞（SK-N-SH细胞）损伤的保护作用。方法用Aβ25-35处理人SK-N-SH细胞，模拟Alzhermer’s（AD）病人体内神经元病理损伤，并以人参皂苷Rg1拮抗其作用。采用MTT比色法检测细胞活力；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率；DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化；化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；RT-PCR检测细胞淀粉样肽蛋白前体（APP）基因、中性内肽酶（NEP）基因的表达情况；Western Blot检测细胞APP和NEP蛋白的表达情况。结果20μmol／LAβ25-35诱导SK-N-SH细胞24h细胞活力下降（均P〈0．01），细胞凋亡率为33．9％，DNA断裂呈片段状，细胞培养液及细胞内MDA含量增加，SOD活性降低。而人参皂苷Rg1能提高细胞的存活率，减少细胞损伤，使细胞培养液及细胞内MDA含量降低，SOD活性提高（P〈0．01），RT—PCR结果显示人参皂苷Rg1可降低APP基因的表达并提高NEP基因的表达，同时Western Blot结果显示人参皂苷Rg1可降低APP蛋白的表达并提高NEP蛋白的表达。结论人参皂苷Rg1对Aβ25-35造成的细胞毒性具有一定的保护作用，其作用机理可能与人参皂苷Rg1能提高SK—N—SH细胞的抗氧化能力以及下调APP基因的表达，上调NEP基因的表达，从而抑制细胞凋亡有关。