促红细胞生成素肝细胞A2受体及其配子ephrinA1与恶性肿瘤关系的研究进展

促红细胞生成素肝细胞(EphA2)及其配体ephrinA1的表达、功能及其在肿瘤细胞中的信号转导与多种恶性肿瘤发生发展密切相关,EphA2和ephrinA1的表达受肿瘤细胞种类和微环境的影响,进而诱导肿瘤细胞及相关细胞信号转导,产生相应的生物学行为。EphA2、ephrinA1系统有望成为恶性肿瘤药物治疗的新靶点。     

EphA2及其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达及与血管生成的关系

  目的  检测酪氨酸激酶受体EphA2及其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达,并探讨其与胶质瘤血管生成的关系。  方法  采用免疫组织化学S-P法检测62例胶质瘤组织及8例正常脑组织中EphA2、EphrinA1的表达情况,并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度（microvesseldensity,MVD）。探讨EphA2、EphrinA1的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。  结果  EphA2、MVD在胶质瘤中阳性表达明显高于正常脑组织,二者差异显著（P<0.01）。而且随着肿瘤恶性程度增加,EphA2及MVD蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高,高级别脑胶质瘤（Ⅲ~Ⅳ）中EphA2及MVD强阳性表达明显高于低级别胶质瘤组,差异有显著统计学意义（P<0.01）。EphrinA1则具有相反的趋势,在大多数恶性脑胶质瘤中呈低水平表达,在低级别胶质瘤和正常组织中呈较高水平表达,且胶质瘤级别越低EphrinA1表达越高。EphA2表达与MVD呈显著正相关（r=0.713,P<0.01）,EphrinA1表达与MVD呈显著负相关（r=-0.772,P<0.01）,EphA2的表达与EphrinA1呈显著负相关（r=-0.912,P<0.01）。  结论  EphA2在恶性脑胶质瘤中特异性高表达、EphrinA1特异性低表达与胶质瘤的侵袭性和恶性程度密切相关,且EphA2过表达和EphrinA1的缺陷表达可能协同促进胶质瘤组织新生血管的生成,在胶质瘤的发病及恶性进展中发挥重要作用。      

γ干扰素在小鼠生殖道沙眼衣原体感染中的作用机制

目的利用鼠衣原体感染小鼠生殖道,探讨γ干扰素(IFN-γ)在小鼠生殖道沙眼衣原体感染中的作用机制。方法通过对小鼠进行鼠衣原体阴道接种得到生殖道感染模型,观察野生型小鼠、IFN-γ基因缺陷小鼠的生存状态,测定体温、体质量、血细胞分类及计数、鼠衣原体(Cm)包涵体计数,观察生殖道组织病理损伤情况,分析外周血中T淋巴细胞亚群水平(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺),免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及白细胞介素(IL-1β、IL-17A、IL-12)表达水平。结果小鼠被Cm感染2周后,生存状态差,无干扰基因缺陷组小鼠体温显著高于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组小鼠(P<0.05),体质量低于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组小鼠(P<0.05);无干扰基因缺陷组巨噬细胞水平低于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组(P<0.01);无干扰基因缺陷组Cm包涵体计数最高,野生组次之,注射IFN-γ的基因缺陷组最低(P<0.01),无干扰基因缺陷组外周血中的IL-17A、IgG、IgM水平最低,注射IFN-γ的基因缺陷组的免疫因子水平与野生组接近(P<0.05)。结论IFN-γ通过影响巨噬细胞活化水平,介导沙眼衣原体生殖道感染后的免疫应答,促进IL-1β、IL-17A分泌量﹐达到沙眼衣原体清除的目的。     

Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度分析

目的对Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度进行分析和评价。方法建立Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的的数学模型,找出影响不确定度的因素,并对各个不确定度分量进行评估。结果计算出了各变量的不确定度,取包含因子K=2,置信概率为95%,Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的扩展不确定度为0.0364。结论此评价方法适用于Lowry法测量重组艾塞那肽蛋白含量的不确定度评估。     

费休氏容量法测量冻干人用狂犬病疫苗中水分含量的不确定度分析

目的对费休氏容量法测量冻干人用狂犬病疫苗中水分含量的不确定度进行分析,为评价该方法的准确性和可靠性提供科学依据。方法建立费休氏容量法测量冻干人用狂犬病疫苗中水分含量的数学模型,找出影响不确定度的因素,并对各个不确定度分量进行评估。结果计算出各变量的不确定度,取包含因子K=2,置信概率为95%,费休氏容量法测量冻干人用狂犬病疫苗中水分含量的扩展不确定度为0.082%。结论卡尔费休容量法检测冻干人用狂犬疫苗中水分含量时,不确定度主要由测定时卡尔费休试液的消耗体积和滴定度F值产生,该评价方法适用于冻干狂犬疫苗水分测定的不确定度评定与报告。     

人脑星形细胞瘤中EphA2-ephrinA1、CD105的表达及与预后的关系

目的 检测酪氨酸激酶受体EphA2及配体ephrinA1在人脑星形细胞瘤中的表达,并探讨其与脑星形细胞瘤预后的关系。方法 采用免疫组织化学法检测55例手术切除人脑星形细胞瘤组织及15例正常脑组织中EphA2、ephrinA1的表达情况,并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。结果 EphA2（51/55）、CD105-MVD(34.26±12.61)在星形细胞瘤中阳性表达明显高于正常脑组织,两者差异有统计学意义(P<0.01);而且随着星形细胞瘤病理级别越高,EphA2及CD105-MVD蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高,ephrinA1则具有相反的趋势,随星形细胞瘤级别越低ephrinA1表达越高。EphA2表达与CD105-MVD呈显著正相关( r=0.713, P<0.05),ephrinA1表达与CD105-MVD呈显著负相关( r=－0. 772, P < 0. 05),EphA2的表达与ephrinA1的表达呈显著负相关( r=－0. 912, P < 0. 05)。EphA2、CD105-MVD和ephrinA1均是重要的星形细胞瘤预后相关风险因子。EphA2、CD105-MVD阳性ephrinA1阴性的星形细胞瘤患者较三者均阳性或三者均阴性或EphA2、CD105-MVD阴性ephrinA1阳性的患者生存期明显缩短。结论 EphA2及CD105-MVD在星形细胞瘤中特异性高表达、ephrinA1特异性低表达与星形细胞瘤不良预后密切相关,EphA2和ephrinA1有望成为脑星形细胞瘤诊断和特异性靶向治疗及预后评估的新靶点。     

Xpert 技术对痰液和纤支镜洗液标本中结核分枝杆菌检测价值

目的 评价GeneXpert MTB/RIF（Xpert）技术在肺结核病实验室诊断中的应用价值。方法 收集2018年1月—12月苏州市第五人民医院收治的疑似肺结核患者标本566份,其中痰标本421份,纤支镜洗液145份,分别采用Xpert 法、荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法、结核培养法进行检测,收集数据,分析比较Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时的敏感度和特异度,并与结核培养结果做比较,评价Xpert技术的检测效能。结果 对痰标本的检测,Xpert 技术、荧光定量PCR法、痰涂片法、结核培养法检测的阳性率分别为36.8%、24.0%、19.0%、32.1%;对纤支镜洗液标本的检测,四种检测方法的阳性率分别为54.5%、33.1%、12.4%、41.4%,可见Xpert 技术的阳性检出率明显高于其他三种检测方法。以培养法作为金标准,Xpert 方法检测痰标本的敏感性和特异性分别为77.0%和82.2%,阳性预测值和阴性预测值分别为67.1%和88.3%,符合率为80.5%,Kappa值为0.57。Xpert 方法检测纤支镜洗液标本的敏感性和特异性分别为93.3%和72.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.9%和93.9%,符合率为81.4%,Kappa值为0.633。结论 Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时具有较高的敏感性和特异性,能显著提高结核病的诊断效率,在肺结核的早期诊断、早期治疗等方面具有较高的临床应用价值。     

钩端螺旋体vwA1和vwA2基因原核表达产物功能的初步研究

目的 构建致病性问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株vwA1和vwA2基因原核表达系统,初步了解目的重组表达产物rVwA1和rVwA2与血小板性出血相关性.方法 采用高保真PCR扩增问号钩体赖株vwA1和vwA2基因并测序,常规方法构建vwA1和vwA2基因原核表达系统.采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rVwA1和rVwA2表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析柱提纯rVwA1和rVwA2.采用实时荧光定量RT-PCR检测问号钩体赖株感染人脐静脉内皮细胞株HUVEC前后vwAl-mRNA和vwA2-mRNA水平变化.采用流式细胞术检测rVwA1与人血小板膜糖蛋白结合能力.采用酶切试验及SDS-PAGE观察人血管性血友病因子裂解酶ADAMTS13水解rVwA2的情况.结果 所克隆的钩体vwA1和vwA2基因与报道的相应基因比较,其核苷酸和氨基酸序列相似性均为100％.所构建的vwA1和vwA2基因原核表达系统能分别表达可溶性rVwA1和rVwA2.问号钩体赖株感染HUVEC 8 h后,钩体vwAl-mRNA和vwA2-mRNA水平均显著上调(P＜0.05).流式细胞术检测结果显示,钩体rVwA1与人血小板结合率为60.8％.人ADAMTS13可水解重组人vWF-A2( rhvWF-A2),但不能水解钩体rVwA2.结论 vwA1和vwA2基因可能在钩体感染中发挥作用,其中vwA1基因产物功能与钩体病出血密切相关.     

EphA2-ephrinA1与恶性肿瘤发生的关系及靶向治疗潜能探讨

0引言 酪氨酸蛋白激酶(RTK)受体Eph家族成员EphA2及其配体ephrinA1在恶性肿瘤发生发展中的作用是目前热点研究之一.多项研究证实EphA2在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、脑胶质瘤、胃肠、胰腺癌等多种恶性肿瘤细胞中高表达,与患者的不良预后和复发密切相关.EphA2与其配体ephrinA1的复杂交互作用引发了致癌作用,与信号蛋白交互作用促进细胞黏附、增殖、分化和转移.现在科学家们正在通过多种方法验证EphA2作为一种新的抗癌药物治疗靶点.