整体改革临床检验实验教学的尝试

《临床检验》（下称临检），是检验专业的主要专业技术课程之一，实验是整个教学过程的重要环节，从培养专科学生掌握三基即“基础理论、基本知识、基本技术”成为合格的“实用型”人才出发，我们在其实验教学过程中，从整体上对实验内容进行改革以适应部队现代化建设和医院科技发展的需要，经多届检验大专队改革尝试，已取得较好效果。     

HCV 高变区1模拟表位串联基因诱导免疫应答的实验研究

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)模拟表位的串联基因免疫后在小鼠体内引起的免疫反应特点。方法:10只Balb/C小鼠随机分为2组,每组5只,试验组给予pCDNA3.1-target gene质粒免疫,对照组给予pCDNA3.1质粒免疫。采用淋巴细胞增殖实验检测脾细胞增殖情况,并检测小鼠脾细胞培养上清中的细胞因子(IL-4、10,IFN-,γTNF-α)水平。结果:肽1、肽5、肽6、肽7刺激基因免疫小鼠脾细胞后,小鼠脾细胞平均增殖指数(PI)分别为71.45±3.1、12.64±2.5、10.05±1.9和31.20±2.4。培养上清中干扰素-γ,肿瘤坏死因子-α,白介素-4,白介素-10都有不同程度的提高。结论:基因免疫使Th1和Th2类细胞因子水平都有所升高,诱导产生了表位特异性的细胞免疫反应。     

海鞘醇类似物抗肿瘤活性的研究

目的探讨海鞘醇类似物002抗肿瘤活性。方法采用MTS法检测不同浓度的海鞘醇类似物对HepG2、A549和NIH3T3等细胞增殖的抑制作用;流式细胞、Annexin V-FITS/7-AAD等技术检测海鞘醇类似物对HepG2、A549和NIH3T3等细胞凋亡的影响。结果海鞘醇类似物对HepG2和A549的增殖有明显抑制作用,抑制率分别为73.67%和62.4%;海鞘醇类似物在浓度为2.0μg/ml时,引起HepG2和A549细胞的早期凋亡率分别为25.72%和25.46%。而对NIH3T3细胞影响不大。结论海鞘醇类似物对人肝癌和肺癌细胞的增殖有较强抑制作用,且能促进人肝癌和肺癌细胞的早期凋亡。     

HCV HVR1模拟肽诱导小鼠树突状细胞免疫应答及机制的初步研究

目的探讨HCV HVR1模拟肽(7肽)诱导小鼠树突状细胞免疫应答模式及其机制。方法用"Bu lk培养法"制备树突状细胞,经7肽免疫10天的小鼠,取脾细胞,分选CD8+T细胞与经过7肽负载并成熟树突状细胞共孵育24 h,收集上清,应用流式细胞技术方法检测上清细胞因子。结果此方法培养的细胞表面CD11 c的表达率超过80%,具有典型的DC形态;实验组中CD8+T上清中IFNγ-、TNF-α、IL-10及IL-6较对照组有所升高,均具有统计学意义。结论利用此法能在体外培养出大量的未成熟DC;7肽能诱导以CD8+T细胞为主的细胞免疫。     

S180瘤株对动物模型体内荷瘤的影响及致瘤机制

目的通过动物实验,观察S180瘤株对小鼠荷瘤形成的影响,探讨S180肉瘤细胞的致瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型,将昆明系小鼠36只,按体重随机分为3组,每组12只。空白组:每日灌胃给予蒸馏水,0.2 mL/10 g体重;模型组:皮下接种S180肉瘤细胞,制成小鼠实体瘤模型,其后每日口服灌胃1%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液;环磷酰胺组:皮下接种S180肉瘤细胞,制成小鼠实体瘤模型后,注射0.02 g/(kg·d)环磷酰胺注射液。观察各组肿瘤生长情况,计算平均重量;与模型组比较,环磷酰胺组计算肿瘤生长抑制率;采用蛋白免疫印迹法技术方法,检测抑癌基因P53、P21及凋亡抑制基因Bcl-2在S180肿瘤动物模型瘤体组织中的蛋白表达。结果模型组小鼠荷瘤成功,与空白组比较,模型组小鼠出现肿瘤,其瘤重为(1.513±0.790)g,环磷酰胺组瘤重为(0.248±0.253)g,两组比较差异有高度统计学意义(P<0.01),环磷酰胺抑瘤率为83.63%。在被检瘤体中,三种蛋白表达空白组与模型组、空白组与环磷酰胺组相比差异均有高度统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组比较,模型组P53、P21抗体的蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中,P21表达差异有高度统计学意义(P<0.01),而Bcl-2变化不大,差异无统计学意义(P=0.66)。结论 S180肉瘤细胞可能通过抑制P53与P21的表达而起到促进肿瘤形成的作用,该机制的研究可为筛选肿瘤治疗药物及肿瘤机制探讨等的肿瘤动物模型提供重要的实验依据。     

螺旋CT在输尿管结石诊断中的应用

目的：探讨螺旋CT对输尿管结石的诊断价值。方法：对75例输尿管结石患者的CT轴位图像及曲面重建图像进行分析。结果：检出结石79例，发生于三个生理狭窄处的概率分别为：20％、28％、52％。结石以上输尿管不同程度的扩张积水。曲面重建图像可清楚的显示结石大小、部位及输尿管扩张的程度。结论：螺旋CT轴位图像及曲面重建可对输尿管结石做出快速、准确的定位、定性诊断，是目前诊断输尿管结石的最好方法之一。     

网织红细胞动物模型的研制

1　材料和方法　①家兔 :体重约 1～ 1 5kg大耳白 ,由军科院提供。②染料 :自配灿烂甲酚蓝 (磺焦油蓝 )染料。③方法 :家兔直接心脏抽取血液约 4 0～ 70ml,饥饿饲养约 1周左右取血备用。2　结果和讨论　于家兔心脏一次性抽取大量血液 ,造成家兔急性失血 ,骨髓红细胞生成旺盛 ,约 5～ 10d后抽取血液 ,此时网织红细胞显著代偿性增加 ,并达到最高峰 ,经常规磺焦油蓝活体染色后制成血片待用。以上方法血液来源充足 ,其操作简便易行 ,经济实用 ,不受时间限制 ,学生在实验课中 ,可以通过反复多次计数和辨认 ,达到熟练掌握的目的 ,提高了教学质量和…     

基于数据挖掘的丙型肝炎患者氨基酸序列与TNF-α间的规律性研究

目的研究丙型肝炎患者的丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus,HCV）高度可变区1（hypervariable region1,HVR1）各位点氨基酸（amino acid,AA）的极性及带电情况与TNF—d表达量之间的规律性。方法根据样本聚类结果,以HCV的HVR1区域各位点氨基酸的极性及带电情况作为属性,对数据集进行规则挖掘。结果当aa5为极性不带电氨基酸时,TNF-α表达量下调;当aa5为非极性氨基酸,aa16为极性不带电氨基酸时,TNF—α上调。当aa5和aa16为非极性氨基酸,aa10为极性不带电氨基酸时,TNF—α上调。当aa5、aa16和aa10为非极性氨基酸时,aa19不带电,则TNF-α下调;aa19带电则TNF-α上调。结论丙型肝炎患者HCV的HVR1区域氨基酸的极性及带电情况与TNF—α的表达量之间具有一定的规律性。     

HCV高变区1串联模拟表位基因免疫研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)高变区1(HVR1)串联模拟表位基因免疫在BALB/c小鼠体内引起抗体产生的特点.方法针对中国人群HCV HVR1位中6个较保守的AA位点设计并合成多肽表位,从中筛选活性最好的肽1、5、6、7构建含4条多肽编码基因的表达载体.将HCV HVR1串联模拟表位表达载体对小鼠股四头肌直接免疫,采用ELISA法检测小鼠血清内抗体的产生,并将免疫血清与一系列基于本室对HVR1氨基酸序列的分析结果合成的多肽进行反应,分析免疫血清对这些多肽的交叉反应性.结果免疫血清同编码的各合成肽都有较好的反应性,其中对肽1反应最好.免疫血清同合成的4条HVR1全序列多肽及其他非编码HVR1多肽有较好的反应性.结论基因免疫能够在小鼠体内引起表位特异性抗体的产生.此串联表位设计引起的体液免疫反应对HCV HVR1合成肽有较好的交叉免疫反应.