胶体金免疫层析法检测血清癌胚抗原

建立一种快速、简易的检测血清中癌胚抗原(CEA)的胶体金免疫层析法(GICA)。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗CEA单克隆抗体4A3。将单克隆抗体3B5划线包被于硝酸纤维素膜上，制成免疫层析检测试纸条。血清中CEA与试纸条上胶体金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的包被抗体结合形成肉眼可见的红色线条。用GICA与ELISA试剂盒对比检测了637份血清标本，其灵敏度为96．69％，特异性为99．38％，两法符合率为98．74％。GICA检测血清中的CEA特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

简单、快速同时检测乙肝表面抗原和甲胎蛋白胶体金免疫层析方法的建立

检测乙肝表面抗原 (HBsAg)和甲胎蛋白 (AFP)是诊断乙型肝炎病毒感染和辅助诊断原发性肝癌的两个重要的实验室指标。我国某些地区的肝癌 90 %是从肝硬化发展而来 ,每年有 3%～ 7%的肝硬化病人发展为肝癌。AFP大于 4 0 0 μg L的患者多数伴有乙型肝炎 ,说明乙肝病毒与AFP升高关系较密切〔1〕。AFP对肝癌的早期辅助诊断价值已被公认。而检测AFP对判断慢性肝炎病人是否继发原发性肝癌有帮助。因此在临床上 ,对于许多被怀疑患乙型肝炎病毒感染或原发性肝癌的病人 ,常常需要同时测定其HBsAg和AFP。在我国 ,肝癌的人群普查均同时测定HBs…     

HCG滴金免疫测定法试剂的研制及应用

应用自制的两种抗人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）单克隆抗体、分别包被硝酸纤维膜及制备胶体金结合物,建立了检测ＨＣＧ的滴金免疫测定法。结果表明,本法简便、快速,灵敏度高（最小抗原检测量为５０ｍＩＵ／Ｌ）,特异性好,与高浓度的ＬＨ、ＦＳＨ、ＴＳＨ均无交叉反应,临床检验２１７例样品,与ＥＬＩＳＡ法对比测定的符合率为１００％。     

几种弓形虫IgM酶联免疫吸附试验的建立及评估

目的　建立和评估几种弓形虫ELISA -IgM的检测方法。 方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)的原理 ,建立四种检测方法 ,并进行比较。结果　检测 373例孕妇及正常献血员血清标本 ,方法Ⅰ、方法Ⅱ、方法Ⅲ、方法Ⅳ的阳性率分别为3 8%、3 2 %、2 9%、2 4 %。结论　利用抗人IgM、弓形虫抗原和抗体建立的捕获法具有快速、敏感、特异的特点 ,适合于育龄妇女的筛查和早期诊断。     

新型淋球菌快速检测方法的临床应用评估

以尿液为标本对１６５ 例临床疑为淋球菌感染者采用新型快速方法进行了检测,同时取尿道或宫颈分泌物进行细菌培养作为对比。８０ 例男性标本中,快速法４８ 例阳性,其中有７ 例标本ＮＧ 培养为阴性。与培养为标准进行比较,快速法灵敏度９５ ．３ ％ 。特异性８１ ．２ ％ ;女性单纯尿液检测其灵敏度和特异性低于男性,但可通过改进取材方法提高检出率。实验表明快速法取材方便,检测时间仅需５ 分钟,适用于筛查ＮＧ 感染者。     

抗癌胚抗原单克隆抗体的制备和初步应用

[目的]生产抗癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体(McAb),制备检测血清CEA含量的酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒。[方法]用亲和层析法纯化的CEA抗原免疫BALB/C小鼠,经细胞融合挑选出两株适用于CEAELISA试剂盒的McAbs进行重点鉴定。用ELISA法测定亲和力常数和免疫球蛋白亚类,用中和抑制法和免疫印迹电泳法鉴定特异性。[结果]两株McAbs均为鼠IgG1亚类,其亲和力常数分别为1.03×10-9M和2.25×10-9M,只有CEA阳性血清能抑制McAbs与包被CEA的反应,免疫印迹电泳显示两株McAbs只与200kDa的CEA形成一条带,所组成的试剂盒与放射免疫分析试剂盒比较,其灵敏度为96.60%,特异性为99.11%,总符合率为98.52%。[结论]两株McAbs具有较好的特异性和亲和力,用该两株McAbs组成的ELISA试剂盒可以应用于临床检测CEA。     

抗沙眼衣原体单克隆抗体的制备及初步应用

目的　制备抗沙眼衣原体 (CT)沙眼生物变种的特异性单克隆抗体 (mAb) ,并建立CT的胶体金免疫层析快速检测方法。方法　CT脂多糖 (LPS)免疫BALB/C小鼠 ,通过细胞融合 ,建立分泌抗CT抗体的杂交瘤细胞株 ,用ELISA法鉴定mAb的免疫球蛋白亚类和与衣原体性病淋巴肉芽肿生物变种 (CLGV)的交叉反应。用中和抑制法测定mAb与w1型淋球菌、w2 型淋球菌、人型支原体、解脲支原体的交叉反应 ;配对试验挑选出两株mAb ,建立检测CT的双抗体夹心法免疫层析试纸条 ,并与进口胶体金检测卡对照检测 176份女性宫颈和男性尿道拭子标本。结果　配对较好的 8株mAb中 6株为小鼠IgG1,1株为IgG2a,1株为IgM ,8株mAb与CLGV、w1型淋球菌、w2 型淋球菌、人型支原体、解脲支原体均无交叉反应。与进口胶体金检测卡相比 ,阴性符合率为 98.65 % ,阳性符合率为 89.2 9% ,总符合率为 97.16%。结论　本研究制备的mAb具有较高的特异性 ,建立的检测方法可应用于CT引起的泌尿生殖道感染的检测。