Halobacillus trueperi SL39 Ectoine诱导生成条件研究

研究了耐盐菌Halobacillus trueperi SL39在NaCl的诱导下，体内合成渗透压补偿溶质Ectoine，并优化Ectoine合成的诱导条件。采用高效液相色谱检测Ectoine合成量，结果表明，耐盐菌Halobacillus trueperi SL39合成Ectoine的最适诱导条件为30℃，初始pH7．0，NaCl浓度2．0mol／L，诱导48h，合成量高达304．8mg／L，胞外释放量为90．11％。     

阳离子脂质体介导的基因转移机制

背景:与病毒载体相比,许多天然与合成的阳离子类脂以脂质体的形式用于基因转移,具有无免疫原性、易生产、质粒免受核酸酶降解和无致瘤性等优点,并且作为病毒载体的有效替代物,阳离子脂质体能用于细胞的体内和体外转染.目的:介绍阳离子脂质体介导的基因转移机制研究进展.方法:由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI:1987/2010)和PubMed (1987/2010)数据库,检索词分别为"基因治疗、阳离子脂质体、基因转移、机制"和"gene therapy,cationic liposome,gene transfer,mechanism",语言分别设定为中文和英文.从阳离子脂质体基因转染和基因转移机制进行总结,综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制.结果与结论:共检索到108篇,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入20篇文章.综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制,包括阳离子脂质体/DNA复合物的形成、细胞吸收、内含体释放和复合物解体以及细胞核摄入等方面的研究内容.结果提示,对类脂构效关系和基因转移机制的研究,是提高阳离子脂质体转染效率和优化基因治疗的关键.     

多孔磷酸钙骨水泥与转染骨形态发生蛋白2基因的骨髓间充质干细胞复合修复股骨髁骨缺损

BACKGROUND: Bone morphogenetic protein (BMP) can improve the osteogenesis capacity of tissue-engineered bone. However, how to prolong BMP release is a key for constructing tissue-engineered bone. OBJECTIVE: To study the repair effect of porous calcium phosphate cement (CPC) with bone marrow mesenchymal stem cells transfected with BMP-2 gene on bone defects. METHODS: After modeling of bilateral femoral condyle bone defects, 12 model rabbits were given implantation of porous CPC with bone marrow mesenchymal stem cells transfected with BMP-2 on the left (experimental group) and given implantation of porous CPC with bone marrow mesenchymal stem cells on the right (control group). Bilateral femoral condyles were taken and analyzed histologically at 4 and 12 weeks after implantation. RESULTS AND CONCLUSION: Better osteogenesis including more newly formed bone tissues and faster scaffold absorption was observed in the experimental group compared with the control group at 4 and 12 weeks after implantation. The area of newly formed bone tissues at different time and rate of bone formation at 12 weeks were significantly higher in the experimental group than in the control group (P < 0.001, P < 0.05). These findings indicate that transfer of BMP-2 into bone marrow mesenchymal stem cells combined with porous CPC could increase repair of bone defects.     

阳离子脂质体介导的基因转移机制

背景：与病毒载体相比,许多天然与合成的阳离子类脂以脂质体的形式用于基因转移,具有无免疫原性、易生产、质粒免受核酸酶降解和无致瘤性等优点,并且作为病毒载体的有效替代物,阳离子脂质体能用于细胞的体内和体外转染。目的：介绍阳离子脂质体介导的基因转移机制研究进展。方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库（CNKI：1987/2010）和PubMed（1987/2010）数据库,检索词分别为＂基因治疗、阳离子脂质体、基因转移、机制＂和＂gene therapy,cationic liposome,gene transfer,mechanism＂,语言分别设定为中文和英文。从阳离子脂质体基因转染和基因转移机制进行总结,综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制。结果与结论：共检索到108篇,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入20篇文章。综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制,包括阳离子脂质体/DNA复合物的形成、细胞吸收、内含体释放和复合物解体以及细胞核摄入等方面的研究内容。结果提示,对类脂构效关系和基因转移机制的研究,是提高阳离子脂质体转染效率和优化基因治疗的关键。     

多囊卵巢综合征孕妇血清PCSK9、CRTC3水平及对不良妊娠的预测价值

目的 探究多囊卵巢综合征(PCOS)孕妇血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控的转录共激活因子3(CRTC3)水平及对不良妊娠的预测价值。方法 纳入2020年12月—2022年9月武汉市第三医院产科收治PCOS孕妇123例为研究组,同期选择医院孕检并生产的健康孕妇120例作为对照组。根据是否发生不良妊娠结局,将PCOS孕妇分为不良妊娠亚组32例与妊娠良好亚组91例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定2组研究对象血清PCSK9、CRTC3水平。Pearson法分析PCOS孕妇血清PCSK9、CRTC3水平的相关性。多因素Logistic回归分析PCOS患者发生不良妊娠结局的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PCSK9、CRTC3水平对PCOS孕妇发生不良妊娠结局的预测价值并计算和比较曲线下面积(AUC)。结果 与对照组比较,研究组PCOS患者PCSK9、CRTC3、睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均显著升高(t/P=8.611/<0.001、7....     

不同孔径多孔CPC材料修复兔大段骨缺损的实验研究

[目的]探讨孔径大小对多孔磷酸钙骨水泥(CPC)修复骨缺损能力的影响.[方法]用盐析法制备三种不同孔径(200 ～ 300 μm、300 ～ 450 μm、450 ～ 600 μm)但孔隙率相同(68.3±3.3)％的多孔CPC材料,将材料植入兔大段桡骨缺损模型,术后4、12周进行大体观察、X线检查、血清骨源性碱性磷酸酶(BALP)检测、组织学观察和生物力学检测.[结果]术后4、12周X线检查可见200～300 μm孔径材料骨缺损区愈合相对较好;4周时BALP检测200 ～ 300 μm组高于其他组,差异具有统计学意义(P＜0.05),12周BALP检测三组差异无统计学意义;12周组织形态计量学分析显示200 ～ 300μm材料组新生骨面积百分比最多,差异有统计学意义(P＜0.05);力学结果显示200 ～ 300 μm组材料的最大压缩载荷和弹性模量均好于其他两组,差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论]孔径的大小可以影响骨生物材料在体内的成骨能力,本研究中较小孔径材料成骨能力更好,且更易达到成骨性能和力学性能的统一.     

阳离子脂质体介导的基因转移机制

背景：与病毒载体相比,许多天然与合成的阳离子类脂以脂质体的形式用于基因转移,具有无免疫原性、易生产、质粒免受核酸酶降解和无致瘤性等优点,并且作为病毒载体的有效替代物,阳离子脂质体能用于细胞的体内和体外转染。 目的：介绍阳离子脂质体介导的基因转移机制研究进展。 方法：由第一作者用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI：1987/2010)和PubMed (1987/2010)数据库,检索词分别为“基因治疗、阳离子脂质体、基因转移、机制”和“gene therapy, cationic liposome, gene transfer, mechanism”,语言分别设定为中文和英文。从阳离子脂质体基因转染和基因转移机制进行总结,综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制。 结果与结论：共检索到108篇,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入20篇文章。综述了阳离子脂质体介导的基因转移机制,包括阳离子脂质体/DNA复合物的形成、细胞吸收、内含体释放和复合物解体以及细胞核摄入等方面的研究内容。结果提示,对类脂构效关系和基因转移机制的研究,是提高阳离子脂质体转染效率和优化基因治疗的关键。     

壳聚糖脂质体复合载体的核酸递送

目的构建一种由脂质体Lipofectamine2000、低分子质量壳聚糖、pDNA组成的三元新型复合载体用于核酸递送能力研究。方法复合物形态采用原子力显微镜轻敲模式下表征、载体与核酸结合能力采用凝胶延滞法表征,Hep-2细胞报告基因表达利用倒置荧光显微镜检测。细胞毒性研究采用3-甲基-2-噻唑硫酮(MTT)法。结果复合载体与pDNA结合能力强,可完全延滞pDNA。脂质体/壳聚糖/pDNA复合载体形态呈现出未完全压缩的球形,短棒状和不规则的聚集块。新型载体转染Hep-2细胞提高了绿色荧光蛋白报告基因的表达效率。与脂质体对照载体比较,基因转染效率提高了2～4倍,对照壳聚糖载体无明显转染效果。细胞毒性表明壳聚糖降低了脂质体的细胞毒性。结论基于脂质体的壳聚糖新型复合载体具有核酸递送潜力。     

脂质体介导RNAi的研究

本文选用阳离子脂质体Lipofectamine 2000为基因载体,使用沉默荧光素酶基因的小干扰RNA(siRNA)进行体外RNA干扰(RNAi),对阳离子脂质体转运siRNA的效率进行研究。首先以阳离子脂质体运载质粒DNA转染细胞,并以延滞实验对阳离子脂质体与siRNA的结合能力进行检测;然后通过基因载体将荧光素酶基因载入细胞,转运不同浓度的siRNA对其进行沉默,应用酶标仪对荧光素酶基因的表达进行分析,并用MTT法对转染后细胞存活率进行检测。结果表明:阳离子脂质体Lipofectamine 2000可以高效转运质粒DNA,并可与siRNA很好地结合。在较低的siRNA浓度下,对荧光素酶基因的沉默率达到较高的水平,转运siRNA转染细胞对细胞活性的影响很小,但细胞存活率随着siRNA浓度的增加而逐渐降低。通过优化实验条件,阳离子脂质体转运较低浓度的siRNA即可高效沉默目的基因。