Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的:在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上,检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA)的影响,探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.方法:用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞;采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测,用激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3.1数据库资料(http://www.targetsean.org)探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响,预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系.结果:Ad-14-3-3σ处理细胞以后,CNE-1与CNE-2相比较,有37个microRNA有明显差异,CNE-1中有17个上调,20个下调.其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、hsa-miR-203、hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-mjR-100.结论:Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA,miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式,缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异,而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关.     

14-3-3σ调控p27抑制Rat1-Akt细胞增殖

目的： 研究腺病毒介导14-3-3·σ（Ad-14-3-3·σ）对Akt过表达Rat1-Akt细胞增殖的影响，并探讨其作用是否通过调控p27而实现。 方法： 通过5-溴-2′脱氧尿嘧啶（BrdU）实验检测Ad-14-3-3·σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响，并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3·σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响。 结果： Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率（45%）低于PBS处理组（100%）或Ad-β-gal转染的对照组细胞（98%）。14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位。 结论： 转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Rat1-Akt增殖，14-3-3σ通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性，阻断Akt介导的p27胞浆错位，从而发挥其抑制Rat1-Akt细胞增殖。     

14-3-3σ调控p27抑制Ratl-Akt细胞增殖

目的:研究腺病毒介导14-3-3σ(Ad-14-3-3σ)对Akt过表达Ratl-Akt细胞增殖的影响,并探讨其作用是否通过调控p27而实现.方法:通过5-溴-2'脱氧尿嘧啶(BrdU)实验检测Ad-14-3-3σ对Rat1-Akt细胞增殖的影响,并通过激酶分析法和免疫荧光实验探讨Ad-14-3-3σ对p27磷酸化水平及其在细胞内定位的影响.结果:Ad-14-3-3σ转染的细胞BrdU阳性率(45%)低于PBS处理组(100%)或Ad-β-gal转染的对照组细胞(98%).14-3-3σ可降低磷酸化p27的水平和减少Akt介导的p27在胞浆中的定位.结论:转染14-3-3σ基因能抑制Akt过表达细胞株Ratl-Akt增殖,14-3-3通过降低Akt激酶磷酸化p27的活性,阻断Akt介导的p27胞浆错位,从而发挥其抑制Ratl-Akt细胞增殖.     

生物信息学在人类基因组计划中的应用

生物信息学融合了先进的生物科学和计算机技术,是一门综合运用数学、信息科学、计算机技术等对生物学、医学的信息进行科学的组织、整理和归纳的科学.生物信息学家可以通过生物信息学手段把从实际研究中得到的不同生物体的分子数据(诸如基因组)进行分析、归纳和标准化,建立多种形式的数据库来辅助基因网络的研究,并且利用计算机构建生物模型, 建立复杂分子的三维结构图[1],甚至建造虚拟细胞.     

Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒的鼻咽癌细胞微小RNA表达的影响

目的： 在明确Ad-14-3-3σ对不同辐射抗拒鼻咽癌（nasopharygycarcinoma, NPC）细胞CNE-1和CNE-2治疗作用的基础上，检测Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2细胞中差异表达的微小RNA(microRNA, miRNA)的影响，探索CNE-1和CNE-2细胞中miRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。方法: 用Ad-14-3-3σ转染CNE-1和CNE-2细胞；采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测，用激光扫描器收集杂交的图像，经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异，根据Targetscan3.1数据库资料（http://www.targetscan.org）探索Ad-14-3-3σ对CNE-1和CNE-2中的miRNA差异表达的影响，预测其差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。结果: Ad-14-3-3σ处理细胞以后，CNE-1与CNE-2相比较，有37个microRNA有明显差异，CNE-1中有17个上调，20个下调。其中倍数变化在3倍以上且2者检测量数量差异达到1 000以上的有6个:hsa-miR-152、hsa-miR-205、 hsa-miR-203、 hsa-miR-7、hsa-miR-636和hsa-miR-100。结论: Ad-14-3-3σ能够改变微小RNA(microRNA, miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达模式，缩小CNE-1和CNE-2之间miRNA的表达差异，而这些miRNA可能跟肿瘤的发生和放疗敏感性有关。     

相同遗传背景不同辐射抗拒鼻咽癌细胞miRNA差异表达的研究

目的:在验证相同遗传背景鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2R和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-2R和CNE-2中的表达差异与肿瘤辐射抗拒的关系。方法:通过观察X线照射对CNE-2R和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件进行分析及线性二次模型拟合存活曲线,比较CNE-2R和CNE-2细胞剂量存活曲线及其生物学参数;采用μParafloTM微流体芯片检测,用激光扫描仪(GenePix 4000B, Molecular Device)采集杂交图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan311数据库资料(http://www.targetscan.org),预测CNE-2R和CNE-2细胞miRNA差异表达与NPC不同辐射抗拒的关系。结果:发现在CNE-2R和CNE-2细胞中存在miRNA的差异表达,即与CNE-2细胞比,在检测到的719个miRNA中,CNE-2R细胞中有37个上调,29个下调,其中检测量的绝对值≥2 000 且两者相差≥2倍的miRNA共12个：hsa-miR-200b、hsa-miR-224、hsa-miR-26b、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-205、hsa-let-7e、hsa-let-7g、hsa-miR-19b、hsa-miR-24、hsa-miR-103、hsa-miR-106b和hsa-miR-93。分析结果表明显著差异表达的miRNA与辐射抗拒密切相关。结论:相同遗传背景不同辐射抗拒NPC细胞株CNE-2R和CNE-2细胞的miRNA表达存在差异;差异表达的miRNA与辐射抗拒相关。     

2000年诺贝尔生理学或医学奖获奖者简介

阿维德.卡森(Arvid Carlsson) 、保罗.格林盖德(Paul Greengard)和爱瑞克.康德尔(Eric Kandel)3位教授是神经突触化学传递理论的奠基人.他们由于在神经系统信号传递方面所做出的杰出贡献,被授予2000年的诺贝尔生理学或医学奖.现将他们的主要成就作一简单介绍.     

不同辐射抗拒鼻咽癌细胞微小RNA差异表达的研究

目的: 在验证鼻咽癌（nasopharygycarcinoma, NPC）细胞CNE-1和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上，探索微小RNA(miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达差异。方法: 通过观察X线照射对CNE-1和 CNE-2 细胞克隆形成数目的影响，利用SigmaPlot 软件进行分析及线性二次模型拟合存活曲线, 比较CNE-1和CNE-2 细胞剂量存活曲线及其生物学参数；采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测，用激光扫描器收集杂交的图像，经LOWESS 滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3.1数据库资料 (http:∥www.targetscan.org)，预测CNE-1和CNE-2细胞microRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。结果: 发现在CNE-1和CNE-2细胞中miRNA的差异表达，即与CNE-2细胞比，在检测的326个microRNA中，CNE-1细胞中有20个miRNA上调，13个miRNA下调，其中检测量的绝对值在2 000以上且两者相差在3倍以上的miRNA有hsa-miR-152、hsa-miR-7、hsa-miR-205和hsa-miR-572；分析结果提示明显差异表达的miRNA与放疗敏感性密切相关。结论: 不同辐射抗拒NPC细胞株CNE-1和CNE-2细胞的microRNA的表达有差异；差异表达的miRNA与放疗敏感有关。     

相同遗传背景结直肠腺瘤-癌组织序列CHOP表达与细胞增殖/凋亡比率的研究*

 目的：检测和探讨相同遗传背景结直肠腺瘤-癌组织序列中C/EBP同源蛋白（CHOP）表达差异及其与细胞增殖/凋亡比率（PAR）之间的关系。方法：收集23例同时具有3种病理组织学类型的结直肠肿瘤（伴低级别上皮内瘤变腺瘤、伴高级别上皮内瘤变腺瘤和腺癌）病人的手术切除标本及对应正常肠黏膜,采用免疫组织化学SABC法检测CHOP表达水平及细胞增殖指数（PI, 即Ki-67阳性细胞率）;采用TUNEL法检测该组织标本中的细胞凋亡指数（AI）。结果: （1）相同遗传背景条件下,CHOP在结直肠腺癌组织中的阳性细胞率显著高于伴高级别上皮内瘤变腺瘤、伴低级别上皮内瘤变腺瘤和正常肠黏膜（P<0.01）;伴高级别上皮内瘤变腺瘤中的阳性细胞率显著高于伴低级别上皮内瘤变腺瘤和正常肠黏膜（P<0.01）,伴低级别上皮内瘤变腺瘤中的阳性细胞率显著高于正常肠黏膜（P<0.01）;（2）相同遗传背景条件下,PAR在结直肠腺癌组织显著高于伴高级别上皮内瘤变腺瘤(P<0.01)、伴低级别上皮内瘤变腺瘤和正常肠黏膜(P<0.01);伴高级别上皮内瘤变腺瘤显著高于伴低级别上皮内瘤变腺瘤和正常肠黏膜（P<0.01）,伴低级别上皮内瘤变腺瘤显著高于正常肠黏膜（P<0.01）;（3）相同遗传背景条件下,CHOP蛋白表达水平和PAR在伴低级别上皮内瘤变腺瘤、伴高级别上皮内瘤变腺瘤和腺癌组织中呈正相关关系（P<0.01）。结论：本实验研究了相同遗传背景下结直肠腺瘤-癌组织序列中CHOP表达水平、PAR以及两者之间的关系;随着结直肠腺瘤癌变进展,CHOP表达水平及PAR逐渐升高,且两者呈正相关关系。CHOP和细胞增殖及凋亡异常可能共同参与结直肠腺瘤癌变过程。