碘对诱发易感和非易感小鼠自身免疫性甲状腺炎的实验研究

目的：研究典对实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）易和非易感小鼠诱发EAT的影响，进一步探讨自身免疫性甲状腺疾病（AITD）发病的机理。方法：采用EAT易感（TA－1）和非易感（BALB／c）小鼠经甲状腺球蛋白（Tg）免疫，诱发为EAT实验动物模型并给予不同水平的碘饮食，观察小鼠甲状腺组织的病理改变和炎细胞润程度，血清中Tg自身抗体的水平以及低磺和高碘Tg抗原性的不同。结果：（1）2种品系小鼠经Tg诱发，均出现不同水平的Tg自身抗性和甲状腺的炎症反应，血清中Tg自身抗体的出现早于甲状腺的病理改变。（2）TA－1小鼠的甲状腺炎症反应明显高于BALB／c小鼠，高碘组中的TA－1小鼠炎症较适碘组更明显，为弥漫性伴慢性炎症（＋＋＋）。（3）高碘Tg诱发的Tg抗体与高碘Tg抗原的反应明显高于与低碘Tg抗原的反应，低碘Tg诱发的Tg抗体反之，表明二者抗原性有所不同。结论：高碘摄入会使易感小鼠EAT的发病加重，其机理除了体内的遗传因素，可能与过度碘的Tg抗原性增强有关。     

雌激素对大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的影响

目的　研究雌激素在诱发实验性自身免疫性甲状腺炎 (EAT)形成中的影响。方法　 10周龄Wistar大鼠进行双侧卵巢切除术后采用同种属SD大鼠甲状腺球蛋白 (Tg)免疫诱发EAT。病理切片HE染色观察甲状腺炎症反应。采用放免方法测定血清中E2 、PRL水平。间接酶联免疫吸附实验 (ELISA )测定血清Tg抗体 (TgAb)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测甲状腺组织中γ 干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 10 (IL 10 )mRNA的表达水平。结果　大鼠切除双侧卵巢后 ,其血清中雌二醇 ( 17.60± 1.0 2 )pmol/L和PRL( 2 .45± 0 .15 ) μg/L水平明显低于未切除卵巢组〔分别为 ( 5 8.5 6± 6.99) pmol/L和 ( 3 .2 2± 0 .17) μg/L〕(均P <0 .0 1) ,实验性自身免疫性甲状腺炎的发病率和甲状腺组织中炎细胞浸润程度也均较未切除卵巢直接诱发EAT组明显减轻 ,甲状腺组织中IFN γmRNA的表达水平 ( 0 .87± 0 .0 3 )较未切除卵巢直接诱发EAT组 ( 0 .99± 0 .0 0 )明显下降 (P <0 .0 5 ) ,而IL 10mRNA的表达水平 ( 0 .98± 0 .0 1)则高于未切除卵巢直接诱发EAT组 ( 0 .83± 0 .0 5 )。诱发为EAT的两组大鼠血清TGAb平均水平 ( 1.3 9± 0 .0 3 )明显高于非诱发EAT对照组的平均水平 ( 0 .18± 0 .0 0 )(P <0 .0 1)。结论　雌激素水平低下可     

碘对小鼠骨髓树突状细胞前体表型及功能影响

目的 探讨碘对小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)前体表型及功能的影响.方法 选雌性C57BL/6J小鼠40只,按碘摄入量随机分为适碘组(NI)、低碘组(LI)、10倍碘过量组(10HI)、50倍碘过量组(50HI)4组,喂养8个月后检测小鼠DC表面分子表达和培养上清中白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)水平以及DC刺激T细胞的增殖能力.结果 LI组小鼠DC表面分子CD40+CD11c+、CD80+CD11c+、CD86+CD11c+、MHC-Ⅱ+CD11c+在CD11c+细胞中所占比例均低于NI组小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05);50HI组小鼠DC表面分子CD40+CD11c+、CD80+CD11c+、CD86+CD11c+、MHC-Ⅱ+CD11c+在CD11c+细胞中所占比例均高于NI组小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05);LI组小鼠DC培养上清中细胞因子IL-12浓度为(275.8±32.6)pg/mL,低于NI组小鼠的(548.7±51.3)pg/mL(P<0.01);50HI组小鼠DC培养上清中细胞因子IL-12浓度为(963.2±83.4)pg/mL,高于NI组小鼠(P<0.01);LI组的刺激指数(SI)为(5.23±1.96),低于NI组小鼠的(8.61±2.15)(P<0.05);50HI组小鼠的SI为(12.38±2.61),高于NI组小鼠(P<0.05).结论 摄入一定水平的碘可诱导小鼠DC前体的增殖和成熟,提高机体的免疫功能.     

自身免疫性甲状腺炎自身抗原的研究进展

自身免疫性甲状腺炎是器官特异性的自身免疫性疾病,甲状腺组织存在特有的自身抗原成分,可刺激机体生成自身抗体与甲状腺组织上的自身抗原结合,引起免疫应答反应,继而发生免疫性的组织损伤。目前已了解有甲状腺球蛋白（Ｔｇ）、甲状腺过氧化物酶（ＴＰＯ）、促甲状腺激素受体（ＴＳＨ－Ｒ）、甲状腺激素（Ｔ３、Ｔ４）、甲状腺细胞膜及甲状腺的胶质成分等多种甲状腺自身抗原。在这些自身抗原中,Ｔｇ和ＴＰＯ可免疫动物诱导为实验性自身免疫性甲状腺炎（ＥＡＴ）,一般考虑Ｔｇ和ＴＰＯ可能是参与自身免疫性甲状腺炎发生的主要自身抗原［…     

自身免疫性甲状腺炎自身抗原的实验研究进展

目前认为甲状腺球蛋白（Ｔｇ），甲状腺过氧化特酶（ＴＰＯ）和促甲状腺激素受体（ＴＳＨＲ）可能是参与自身免疫性甲状腺炎发生的主要自身抗原，就近年来对Ｔｇ、ＴＰＯ和ＴＳＨＲ等甲状腺自身，抗原表位及其抗原性等研究进展做一介绍。     

自身免疫性甲状腺疾病患者血清纤维化指标观察

目的 观察自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和透明质酸(HA)水平.探讨其临床意义.方法 按甲状腺功能将114例AITD患者分为3组:①Graves病甲状腺功能亢进(简称甲亢)组(38例),②桥本甲状腺炎甲状腺功能低下(简称甲低)组(35例),③桥本甲状腺炎亚临床甲状腺功能低下(简称哑甲低)组(41例),另设40例健康人作为对照组.用免疫化学发光法检测以上各组人群血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),超敏促甲状腺激素(sTSH)水平.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PCⅢ水平,用放射免疫分析法(RIA)检测血清HA水平.结果 甲亢组血清FT3,FT4水平[(18.35±6.19),(76.28±23.49)pmol/L]明显高于对照组[(4.75±0.31),(16.12±3.27)pmol/L],sTSH水平[(0.15±0.07)mU/L]明显低于对照组[(3.78±0.15)mU/L],差异均有统计学意义(P＜0.01),甲低组FT3,FT4水平[(3.36±0.26),(6.37±2.19)pmol/L]均低于对照组(P＜0.05),sTSH[(44.58±13.29)mU/L]明显高于对照组(P＜0.01),亚甲低组FT3,FT4水平[(4.86±0.45),(15.26±2.78)pmol/L]与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),sTSH[(14.26±4.73)mU/L]明显高丁对照组(P＜0.01).甲亢组血清PCⅢ水平[(4.63±1.22)μg/L]明显高于甲低组[(3.64±1.12)μg/L],亚甲低组[(3.54±1.17)μg/L],对照组[(3.56±1.07)μg/L],组问两两比较差异有统计学意义(P＜0.05),而甲低组,哑甲低组,对照组PCⅢ水平任意两组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),甲低组血清HA水平[(31.13±10.28)μg/L]高于甲亢组[(22.24±7.22)μg/L],亚甲低组[(22.43 4-7.99)μg/L]和对照组[(23.09±9.19)μg/L],组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),而甲低组,亚甲低组,对照组HA水平任意两组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在排除肝纤维化等病变的情况下,检测甲亢患者血清PCⅢ,对了解早期的心肌纤维化有重要意义,对病程较长的甲亢患者,血清HA,PCⅢ的榆测可作为早期发现肝损伤和纤维化的参考依据.     

肾上腺功能低下与自身免疫性甲状腺炎易感性的实验研究

目的研究肾上腺功能低下与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)易感性的关系及外环境因素中的碘对易感和非易感个体诱发AITD的影响,并探讨其发病机理.方法选用Wistar大鼠,雌性,8周龄.大鼠随机分为6组①切除大鼠1+2/3侧肾上腺(ADX),模拟肾上腺功能低下或不全,高碘(HI)饮食喂养,诱发实验性自身免疫性甲状腺炎(experiment autoimmune thyroiditis,EAT),为去肾上腺高碘饮食EAT诱发组(ADX-HI-EAT组);②去肾上腺(ADX),适碘(NI)饮食喂养,诱发EAT为ADX-NI-EAT组;③适碘(NI)饮食喂养,诱发EAT为NI EAT组;④去肾上腺(ADX),高碘饮食对照组(ADX-HI组);⑤去肾上腺(ADX)适碘饮食对照组(ADX-NI组);⑥适碘饮食正常对照组(NI组).适碘饮食是用低碘饲料(碘含量≤35 μg/kg)加适碘水(含KI为0.3mg/L)喂养,高碘饮食用低碘饲料加高碘水(含KI为0.3mg/L)喂养,高碘饮食用低碘饲料加高碘水(含KI为30g/L)喂养.EAT的诱发采用同种属不同品系的SD大鼠Tg加完全福氏佐剂(freunds complete adjuvant)免疫Wistar大鼠(Tg每次2mg,每2周1次,共3次)诱发实验性甲状腺炎(EAT)的形成,末次免疫的4周后,处死全部大鼠.各组均观察其大鼠的发病率和甲状腺组织炎症反应,检测Tg自身抗体和Th1/Th2型主要细胞因子干扰素γ和白细胞介素-4(IFN-γ和IL-4)mRNA表达水平,同时还检测免疫应答协同刺激分子CD86mRNA的表达.结果 EAT非易感的Wistar大鼠切除大部分肾上腺后,促腺上腺皮质激素(ACTH)刺激实验证实肾上腺皮质储备功能较正常对照组明显低下(P＜0.01).切除肾上腺高碘饮食诱发EAT(ADX-HI-EAT)组的甲状腺组织炎细胞浸润明显和炎症反应较重,14例中2例为甲状腺组织炎细胞浸润为"+++",3例为"++",5例为"+",无炎细胞浸润者为4例.次之是去肾上腺适碘饮食诱发自身免疫性实验性甲状腺炎组(ADX-NI-EAT),10例中1例为"+++",2例为"++",2例为"+",无炎细胞浸润者为5例.适碘饮食诱发EAT(NI-EAT)组,8例中7例无炎细胞浸润,仅1例为"±".切除肾上腺高碘饮食对照组(ADX-HI)、切除肾上腺适碘饮食对照组(ADX-NI)和正常对照组(NI)大鼠甲状腺,均未发现明显的炎细胞浸润.大鼠切除肾上腺给予高碘饮食其EAT的发病率和甲状腺炎症反应较未切除肾上腺适碘组明显增加.ADX-HI-EAT和ADX-NI EAT组大鼠甲状腺组织中IFN-γmRNA表达水平分别为0.85±0.057和0.78±0.067(细胞因子/β-actin)明显高于NI-EAT、ADX HI、ADX-NI和NI组(P＜0.01).结论肾上腺功能低下或不全是构成EAT易感性的重要因素,高碘饮食会明显地增加易感大鼠(肾上腺切除)的发病率和甲状腺炎症反应.体内CD4+Th细胞向Th1细胞偏移,Th1/Th2型细胞群的失衡在EAT的发病机理中具有重要作用.     

甲状腺过氧化物酶抗体球蛋白抗体微粒体抗体在甲状腺自身免疫性疾病中的改变

目的 观察甲状腺过氧化物酶抗体(TPO Ab)、甲状腺球蛋白抗体(TG Ab)和甲状腺微粒体抗体(TM Ab)在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)中的改变,探讨TPO Ab在临床诊断和治疗上的作用和意义.方法 收集AITD患者,根据甲状腺功能不同分为甲状腺功能亢进(简称甲亢)组(Graves病、GD,57例)、甲低组(桥本氏甲状腺炎、HT,48例)、亚甲低组(41例)和AITD复诊组(甲状腺功能恢复正常1～6个月,41例).另取一级亲属无GD或HT的健康人群53例为对照组.采用放射免疫分析法检测血清中甲状腺自身抗体(TPO Ab、TG Ab和TM Ab)及甲状腺激素和促甲状腺激素(FT3、FT4,sTSH)水平.结果 甲亢组、甲低组和亚甲低组中TPO Ab阳性率(87.70%、97.20%、100.00%)均明显高于同组内TG Ab阳性率(43.90%、60.42%、48.78%)和TM Ab阳性率(43.90%、79.10%、60.98%);3种甲状腺自身抗体的阳性率和阳性患者的抗体水平均高于相应的对照组.AITD复诊组的TPO Ab阳性患者的抗体水平[(683.04±606.55)kU/L]明显低于甲亢组、甲低组和亚甲低组[(1049.31±941.00)、(106 440.79±272.38)、(5133.01±4449.67)kU/L].结论 TPO Ab在AITD的诊断更具有代表意义,抗体水平为AITD治疗及预后评估提供了重要的依据.     

膳食碘在小鼠动脉粥样硬化发病中的保护作用

目的研究碘摄入量对高脂血症小鼠甲状腺功能及血脂代谢的影响,探讨膳食中碘的摄入量在小鼠动脉粥样硬化发病中的保护作用及机制。方法选用4周龄的雌性c57BL/6小鼠,体重为16g左右。根据碘摄入量不同将小鼠随机分为重度低碘组、轻度低碘组、适碘组、10倍碘过量组和50倍碘过量组,每组10只。各组动物均用高脂高胆固醇低碘(碘含量为20～40μg/kg)饲料喂养。重度低碘组饮用去离子水,其他四组饮用含有不同浓度碘化钾(碘含量分别为196.08、326.79、3856.21和19542.5μg/L)的去离子水。各组小鼠饲养32周时处死。采用放射免疫法测定外周血甲状腺激素(TT4和TT3)水平;酶法测定外周血清中血脂水平;采用HE染色观察主动脉病理学改变;实时定量PCR检测小鼠主动脉组织细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1和肝脏组织低密度脂蛋白受体的mRNA表达水平。结果 (1)重度低碘组和轻度低碘组小鼠血清中TT4和TT3水平较适碘组均显著降低(P0.05)。(2)重度低碘组小鼠血清中甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平均较适碘组小鼠明显上升(P0.01);轻度低碘组主要表现为低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于适碘组(P0.01);10倍碘过量组和50倍碘过量组小鼠血清中总胆固醇水平明显低于适碘组(P0.01)。(3)病理学观察适碘组小鼠主动脉内膜内皮下间隙明显增宽,可见脂质沉积;轻度低碘组和重度低碘组小鼠主动脉内膜内皮下间隙较适碘组进一步增宽,部分区域可见散在泡沫细胞,其周围有少量脂质,可见指纹形成;10倍碘过量组和50倍碘过量组中只见主动脉内膜内皮下间隙稍有增宽,染色浅淡。(4)重度低碘组主动脉组织细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1以及轻度低碘组的主动脉组织细胞间黏附分子1的mRNA表达水平均较适碘组显著升高(P0.01),两组中肝脏组织低密度脂蛋白受体的mRNA表达水平均较适碘组明显降低(P0.01);50倍碘过量组主动脉组织细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA表达水平明显低于适碘组(P0.05或P0.01)。10倍碘过量组和50倍碘过量组中肝脏组织低密度脂蛋白受体mRNA表达水平均较适碘组升高(P0.01)。结论膳食中的碘可通过影响小鼠甲状腺功能、血脂代谢及动脉组织黏附分子的表达,参与高脂高胆固醇喂养小鼠动脉粥样硬化的形成。低碘加重高脂血症小鼠动脉损伤,一定水平的碘可减轻高脂血症小鼠动脉损伤。     

碘硒对大鼠腹腔巨噬细胞抗原提呈作用的影响

目的 通过观察碘硒对大鼠腹腔巨噬细胞抗原提呈作用的影响,初步探讨两者对自身免疫性甲状腺疾病发病的影响及其免疫学机制.方法 选用雌性Lewis大鼠20只,根据随机抽样的原则,分为4组:低硒适碘组(LSeN1),低硒高碘组(LSeH1),适硒适碘组(NSeN1),适硒高碘组(NSeH1).各组用人工合成的低硒低碘饲料和饮用含不同浓度硒或碘的去离子水(用K103和Na,SeO3配置)喂养3个月.制备各组大鼠腹腔巨噬细胞及卵白蛋白(OVA)致敏的T细胞,将两者共同培养,进行抗原提呈实验,采用ELISA方法测定上清中IL-2水平;采用RT-PCR方法检测各组脾细胞共刺激分子CD86 mRNA的表达水平.结果 NSeH1组培养上清中IL-2水平为(43.22±3.27)pg/ml明显高于NSeN1组IL-2水平(25.74±2.45)pg/ml.LSeN1组IL-2水平为(15.79±2.13)pg/ml明显低于NSeN1组.NSeH1组大鼠脾细胞CD86mRNA表达水平(CD86/βp-actin:0.52±0.10)明显高于NSeN1组(CDB6/13.actin:0.35±0.04).结论 高碘使巨噬细胞的抗原提呈作用呈现高于正常状态,成为诱发甲状腺自身免疫发生的一个重要的因素.低硒可使大鼠腹腔巨噬细胞对OVA抗原识别和提呈作用减弱,维持免疫自稳机制失调,可能也是构成诱发自身免疫病的一个因素.