化瘀消瘤方含药血清对体外培养的人肺癌细胞周期的影响

目的：探讨化瘀消瘤方含药血清对肺癌细胞周期的作用。方法：制备高、中、低剂量含药血清、西药血清和对照血清，作用于人肺癌细胞。MTT法观察血清对细胞增殖的作用，流式细胞仪进行细胞周期时相分析。结果：高剂量含药血清组与对照血清组之间的吸光度差异有统计学意义(P<0.01)，中剂量血清组、高剂量血清组的S期细胞所占比例与对照血清组之间的差异有统计学意义(中剂量血清组P<0.05，高剂量血清组P<0.01)。结论:本实验提示化瘀消瘤方含药血清可能是通过干扰细胞DNA合成而抑制肺癌细胞的增殖，为该药的临床应用提供了科学的实验依据。     

MTT法分析含药血清对体外培养肺癌细胞增殖的影响

目的:M TT法观察莪术瓜蒌汤含药血清对人肺癌细胞增殖的影响。方法:家兔灌胃制备高、中、低剂量莪术瓜蒌汤血清分别作用于人肺癌细胞,采用M TT法观察莪术瓜蒌汤含药血清对细胞增殖的抑制作用。结果:高剂量血清组与对照血清组之间的吸光度差异有显著统计学意义(P<0.01),随着作用时间的延长,其吸光度逐渐降低,抑制率逐渐增高。结论:莪术瓜蒌汤含药血清具有一定的抗肺癌作用,并存在一定的量效关系,为莪术瓜蒌汤的临床应用提供了科学的实验依据。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化肺组织中iNOS表达的影响

目的：观察清肺化痰通络方对博莱霉素所致大鼠肺纤维化中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法：通过气管内灌注博莱霉素A5（BLMA5）复制大鼠肺纤维化动物模型，于灌服该方后3、7、14、28天，分别观察肺组织病理变化及iNOS的表达。结果：清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况，减轻病变的程度，并抑制iNOS的表达。结论：清肺化痰通络方可能通过抑制iNOS的异常表达。对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

川芎防治动脉粥样硬化有效部位的研究

目的 :认定川芎防治动脉粥样硬化 (ＡＳ)的有效部位。方法 :按正交设计表Ｌ16(2 15)内涵 ,研究川芎生物碱、酸性酚性成分、中性酯类物质、挥发油、酸性物质 5部位 (五因素二水平 )对ＡＳ的疗效。每种部位等分成 480份 ,按设计应该给 16只ＡＳ造模家兔中的 8只家兔每日每只给药 1份。结果 :观察指标显示川芎可逆转造模物质所致的ＡＳ病变 ,表现为 :①降低血清甘油三酯含量 :生物碱 (Ｐ <0 .0 5 )、酸性酚性成分与挥发油交互作用 (Ｐ <0 .0 1)、生物碱与酸性成分交互作用 (Ｐ <0 .0 1)可使动物血清甘油三酯明显回降 ;②降低血清总胆固醇 (ＴＣ…     

5-Aza-dC对恶性黑色素瘤细胞的抑制作用及机制研究

目的研究5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖、凋亡及体外迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法 2022年1月至6月, 通过CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞术检测5-Aza-dC对小鼠恶性黑色素瘤B16细胞体外增殖、迁移、侵袭及凋亡等恶性生物学行为的影响;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及缝隙连接蛋白Cx43的表达水平。采用Mann-WhitneyU检验、Welch检验和单因素方差分析。结果 CCK-8实验结果显示:与空白对照组及DMSO对照组相比, 5-Aza-dC给药组细胞存活率均明显降低(均P<0.01);同一药物浓度作用下不同给药时间细胞存活率对比显示, 细胞存活率随着作用时间的增加而降低(P<0.01)。细胞划痕实验结果显示:5-Aza-dC给药组细胞划痕愈合率均明显低于空白对照组[(74.67±11.91)%比(100.00±0.00)%, P<0.01]。Transwell侵袭实验结果显示:空白对照组侵袭细胞数量明显多于5-Aza-dC给药组[(444±65)...     

激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡

目的激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V／PI双染色法检测人肺癌细胞凋亡的形态。方法对不同剂量含药血清处理的体外培养人肺癌PGLH7细胞株进行Annexin V／PI双染,激光共聚焦显徽镜观察细胞凋亡的形态特征。结果Annexin V／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察,经含药血清作用的人肺癌细胞ee,凋亡早期细胞呈AnnexinV高染而PI低染,细胞膜呈绿色而细胞核不着色;凋亡中、晚期细胞则AnnexinV和PI均为高染,细胞膜呈绿色而细胞核呈红色;部分细胞的核呈碎片状或梅花状,为典型的细胞凋亡形态。结论FITC—AnnexinV／PI双染色法加激光共聚焦显微镜观察凋亡细胞是目前观察凋亡的理想方法,特别适用于凋亡细胞的早期检测。     

六味地黄丸增效小鼠黑色素瘤HSV-tk/GCV 自杀基因疗法的免疫机制

目的明确六味地黄丸是否增强单纯疱疹病毒核苷激酶/更昔洛韦（HSV-tk/GCV）自杀基因疗法对小鼠黑 色素瘤的免疫杀伤效果,并对其相关机制进行探索。方法采用Western Blot 实验、免疫荧光实验检测六味地 黄丸对缝隙连接蛋白43（Cx43）表达水平及膜定位的影响;通过荧光黄染料、钙黄绿素荧光传输实验检测六味 地黄丸对小鼠黑色素瘤细胞B16（B16 细胞）缝隙连接通讯（GJIC）功能的影响;PI/Hoechst 染色实验检测CD8+ T 细胞对B16 细胞的免疫杀伤效果;CD8+ T 细胞激活实验观察GJIC 在六味地黄丸增强对小鼠黑色素瘤免疫杀 伤中的作用。结果自杀基因疗法联合六味地黄丸治疗较单独应用自杀基因疗法能更显著地抑制肿瘤生长; Western Blot 及免疫荧光实验显示六味地黄丸组Cx43 表达明显上调,荧光传输实验显示六味地黄丸组B16 细 胞GJIC 功能显著增强;PI/Hoechst 染色实验显示,六味地黄丸组CD8+ T 细胞对B16 细胞的免疫杀伤效果更加 显著,阻断Cx43 后,对B16 细胞的免疫杀伤效果则被逆转,同时CD8+ T 细胞的激活也被减弱。结论六味 地黄丸可通过上调B16 细胞中Cx43 的表达,改善GJIC 功能,促进肿瘤抗原的交叉提呈,更强地激活CD8+ T 细 胞以增强其对肿瘤细胞的免疫杀伤效果。     

028 川芎防治动脉粥样硬化机制的实验研究

目的: 探讨川芎对动脉粥样硬化(AS)的防治作用. 方法: 采用50 g基本饲料添加1 g胆固醇(Cho)和6 g甘油三酯为致AS的造模膳食, 确保家兔一次顿服AS造模膳食. 每早与造模同步进食含30倍人等效用药剂量川芎药物的高脂高Cho膳食至90天. 结果: 观察指标显示川芎可逆转造模膳食所致的AS病变, 表现为: ①一般观察指标: 治疗组动物后肢间歇性跛行和皮肤真菌感染发生率均比造模组低. ②血脂检测: 与造模组比较, 治疗组动物血清甘油三酯明显回降、总Cho回降、高密度脂蛋白Cho回升、高密度脂蛋白Cho/总Cho之比值回升. ③主动脉AS的大体形态: 治疗组主动脉病变较造模组明显好转, 尤其是主动脉弓、胸主动脉、腹主动脉、主动脉全长的动脉内膜粥样斑块面积的百分比均明显回降. ④有关器官的组织学病变: 与造模组比较, 冠状动脉病变和心肌萎缩、肺动脉病变、肝脏变性坏死均明显减轻, 大脑、肾上腺、脾脏和睾丸的有关病变均明显好转. ⑤主动脉内膜一氧化氮合酶的活性明显回升, 且分布和阳性状态界于正常组的原生型(局限密集)和造模组的诱生型(广泛弥散)之间. ⑥动脉壁的电镜观察: 与造模组比较, 治疗组主动脉内膜内表面粗糙突起减轻、附着物减少、滋养小孔较多见; AS斑块中的泡沫细胞荷脂少, 而吞噬溶酶体增多, 细胞损伤减轻, 胶原合成减慢; 内弹力板溶解消失不明显; 中膜的VSMCs未与内膜AS斑块中的泡沫细胞相连续. 结论: 用30倍人等效剂量的川芎能通过多环节有效防治大白兔AS病变和病症.     

HPLC-QTOF-MS分析六味地黄丸不同部位的化学成分

目的采用高效液相色谱—四级杆—飞行时间串联质谱(HPLC-QTOF-MS)法对六味地黄丸不同极性溶剂提取部位中的化学成分进行鉴定,并比较不同极性提取部位之间的成分差异。方法色谱分离采用WatersXBridge BEH C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)和0.1%甲酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.6 m L·min~(-1);质谱采用电喷雾离子源(ESI),在正负离子模式下扫描采集数据,根据准分子离子及二级碎片离子,并结合对照品及文献报道的质谱数据对六味地黄丸不同极性溶剂提取部位中的化学成分进行鉴定。结果从六味地黄丸的水、50%乙醇、75%乙醇、乙醇、石油醚和混合溶剂提取部位中分别鉴定出41、41、41、40、7和39个化合物。结论本研究首次对六味地黄丸的不同极性提取部位中的化学成分进行了鉴定和对比分析,丰富了六味地黄丸化学成分的结构信息,可为六味地黄丸的药效物质研究提供了科学参考。