胰岛素样生长因子结合蛋白4在非小细胞肺癌中的表达及作用

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白4（IGFBP-4）在非小细胞肺癌中的表达及作用。方法选取丽水市中心医院2008年1月至2020年1月行手术治疗的20例非小细胞肺癌患者的肺癌组织以及正常肺组织,检测上述标本中IGFBP-4的表达情况。将非小细胞肺癌A549细胞分为Control组和不同浓度IGFBP-4（5、50、500ng/ml）处理组。采用CCK-8法绘制细胞生长曲线,平板克隆实验计算细胞集落数量,观察IGFBP-4对细胞增殖的影响,Transwell实验检测IGFBP-4对细胞迁移和侵袭能力的影响,Westernblot法检测IGFBP-4处理后细胞内Fibronectin和c-fos蛋白表达水平。结果IGFBP-4在肺癌组织中的表达明显下调。经IGFBP-4处理的A549细胞的增殖活性、迁移和侵袭能力均明显低于Control组（均P＜0.05）,Fibronectin和c-fos蛋白表达水平也明显下调（均P＜0.05）。结论IGFBP-4在非小细胞肺癌组织中的表达明显下调,可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭,并降低Fibronectin和c-fos蛋白的表达水平,表现出较强的抗肿瘤作用。     

睾丸动脉与肾上腺下动脉共干1例

作者上局部解剖学解剖一具成年男性尸体标本时,见其左侧睾丸动脉与肾上腺下动脉共干起始(如图1),现报道如下: 左侧睾丸动脉与肾上腺下动脉于距肾动脉起端平面下方1.5cm处共干起始于腹主动脉左外侧壁,起点外径约0.3cm.     

IGFBP-4对A549细胞免疫原性细胞死亡的作用及其机制

目的：探讨IGFBP-4对A549细胞免疫原性细胞死亡（ICD）的作用及其分子机制。方法：体外培养A549细胞,将细胞分为对照组、IGFBP-4组、IGFBP-4+NAC组和IGFBP4+si-p38组。经培养48 h后,用MTT法检测细胞存活率,流式细胞技术检测细胞内ROS、钙网蛋白（CRT）含量,ELISA法检测培养基中高迁移率族蛋白1（HMGB1）含量和细胞内SOD、MDA含量,Western blot法检测p-p38和p38表达。结果：与对照组相比,IGFBP-4组细胞内ROS、CRT、HMGB1、MDA含量、p-p38和p38表达升高,细胞存活率、SOD2含量下降（P＜0.05）;与IGFBP-4组相比,IGFBP-4+NAC组和IGFBP-4+si-p38细胞内ROS、CRT、HMGB1和MDA含量下降,细胞存活率、SOD2含量增高（P＜0.05）。结论：IGFBP-4通过激活p38 MAPK通路,诱发细胞内氧化应激促使A549细胞发生免疫原性细胞死亡。     

雷公藤内酯醇对肺癌荷瘤小鼠髓系抑制性细胞的影响及机制研究

目的探讨雷公藤内酯醇对肺癌髓系抑制性细胞（myeloidderivedsuppressorcells,MDSC）的影响及其分子机制。方法将6~8周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、雷公藤内酯醇组、内质网应激抑制剂（4-PBA）组和4-PBA+雷公藤能内酯醇组4组,每组8只。取5×106个/mlA549细胞接种于小鼠腋下皮下,建立肺癌移植瘤模型;雷公藤内酯醇组每日腹腔注射0.2ml（浓度为1滋g/ml）雷公藤内酯醇+0.4ml0.9%氯化钠注射液,4-PBA组每日腹腔注射0.4ml（浓度为100滋g/ml）4-PBA+0.2ml0.9%氯化钠注射液,4-PBA+雷公藤内酯醇组每日注射0.2ml雷公藤内酯醇和0.4ml4-PBA,对照组给予腹腔注射等量的0.9%氯化钠注射液。每周监测小鼠的肿瘤体积变化,第21天处死小鼠剥离皮下肿瘤,并测量肿瘤的重量;分离提取脾脏组织细胞,采用流式细胞术分析各组MDSC细胞数量;用流式细胞术分选MDSC,膜联蛋白V/碘化丙啶双染法分析MDSC细胞凋亡,RT-qPCR法分析MDSC中重组人精氨酸酶1（ARG1）、一氧化氮合酶（iNOS）;Westernblot法分析MDSC中Bcl-2、Bax、CHOP、GRP78和PERK的表达水平。结果与对照组相比,雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低,MDSC比例、ARG1、iNOSmRNA表达均明显下降,MDSC细胞凋亡率、CHOP、GRP78和PERK表达均明显增加（均P＜0.05）;与雷公藤内酯醇组相比,4-PBA+雷公藤内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均增加,MDSC比例、ARG1、iNOSmRNA均明显增加,细胞凋亡率和CHOP、GRP78和PERK表达均明显降低（均P＜0.05）;与4-PBA组相比,4-PBA+雷公藤能内酯醇组肿瘤体积、肿瘤质量均明显降低（均P＜0.05）。结论雷公藤内酯醇对肺癌A549细胞移植瘤具有抑制作用,其机制与雷公藤内酯醇诱发内质网应激抑制MDSC有关。     

STAT1在非小细胞肺癌中的表达及对IL-2抗肿瘤作用的影响

目的探讨信号转导和转录激活因子1（STAT1）在非小细胞肺癌中的表达及对IL-2抗肿瘤作用的影响。方法回顾性选取2018年1月至2020年1月丽水市中心医院20例非小细胞肺癌患者外科手术切除的肺癌组织标本及距离肿瘤组织5cm以上正常肺组织标本,采用Westernblot法检测两种标本中STAT1蛋白表达水平。利用慢病毒载体Lenti-增强绿色荧光蛋白（EGFP）或Lenti-STAT1转染非小细胞肺癌SPC-A-1细胞,将细胞分为空白组、Lenti-EGFP对照组和Lenti-STAT1组。采用平板克隆实验观察细胞克隆形成率。不同浓度（0、20、100、500U/mL）IL-2处理细胞后,采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖活性,Transwell法检测0、100U/mLIL-2处理后细胞迁移和侵袭能力,流式细胞仪分析0、100U/mLIL-2处理后细胞凋亡百分比。观察IL-2对3组细胞抗肿瘤作用的影响。采用Westernblot法检测3组细胞磷酸化STAT1（p-STAT1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达水平。结果肺癌组织中STAT1蛋白表达水平低于正常组织（P＜0.001）。Lenti-STAT1组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均低于Lenti-EGFP对照组,细胞凋亡百分比高于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。用20、100、500U/mLIL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞增殖均低于Lenti-EGFP对照组（均P＜0.05）。用100U/mLIL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞迁移和侵袭能力均低于Lenti-EGFP对照组,Lenti-STAT1组细胞凋亡百分比高于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。此外,IL-2未处理的Lenti-STAT1组细胞p-STAT1蛋白表达水平高于Lenti-EGFP对照组,ICAM-1蛋白表达水平低于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。用100U/mLIL-2处理后,Lenti-STAT1组细胞p-STAT1蛋白表达水平高于Lenti-EGFP对照组,PCNA蛋白表达水平低于Lenti-EGFP对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论STAT1在非小细胞肺癌组织中表达明显下调,可抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,增强IL-2在肺癌细胞中的抗肿瘤效应。因此,STAT1与IL-2的联合治疗可能是未来肺癌治疗的一种可行方法。