亚砷酸钠对AML12肝细胞氧化应激、凋亡损伤及Hippo信号通路的影响

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的关注焦点.目的:探究亚砷酸钠(NaAsO2)对AML12肝细胞氧化应激、凋亡的作用及Hippo信号通路中关键分子表达的影响.方法:AML12肝细胞分别暴露于0,10,15,20,25,30μmol/L亚砷酸钠24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,CCK...     

亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及MST1、MST2蛋白表达的影响

目的 探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对小鼠肝细胞AML12氧化应激、凋亡及哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、MST2蛋白表达的影响.方法 取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,分为对照组(不含NaAsO2)及实验组(10、15、20、25及30μmol/L NaAsO2处理24 h),采用荧光探针染色法和化学比色...     

亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12损伤的作用机制

目的 探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制.方法 取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO2浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO2处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和油红O染色法检测各组AML12细胞内丙二醛(MDA)和脂质含量水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测各组小鼠AML12细胞内法尼醇X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)mRNA和FXR、SHP、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达.结果 与对照组相比,10～30μmol/L NaAsO2组小鼠AML细胞内MDA含量升高、但FXR和SHP mRNA及FXR蛋白相对表达量下降(P<0.05),15～30μmol/L NaAsO2组小鼠AML细胞内脂滴含量增加(P<0.05),20～30μmol/L NaAsO2组小鼠AML细胞内SHP蛋白相对表达量降低(P<0.05),25～30μmol/L NaAsO2组小鼠AML细胞内BAX蛋白相对表达量增高(P<0.05).结论 NaAsO2可致小鼠肝细胞AML12损伤,其机制可能与FXR-SHP信号通路的失调有关.     

亚砷酸钠对人脐静脉内皮细胞损伤及鞘氨醇激酶1/1-磷酸鞘氨醇信号轴的影响

背景：血管内皮细胞是砷毒作用的关键靶点,砷致内皮细胞损伤的分子机制有待进一步研究。目的：研究亚砷酸钠对人脐静脉内皮细胞的损伤及鞘氨醇激酶1/1-磷酸鞘氨醇(SPHK1/S1P)信号轴的影响。方法：分离培养并鉴定人脐静脉内皮细胞,将人脐静脉内皮细胞暴露于含0,5,10,15,20,25μmol/L亚砷酸钠的培养液24 h,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态;荧光探针DCFH-DA染色检测细胞内活性氧含量;Annexin V-FITC/PI双标记结合流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡;ELISA检测细胞内1-磷酸鞘氨醇含量;实时荧光定量PCR、Westernblot分别检测血管细胞黏附分子1、鞘氨醇激酶1、1-磷酸鞘氨醇受体1的m RNA和蛋白表达。结果与结论：(1)与对照组(0μmol/L亚砷酸钠)相比,随着亚砷酸钠浓度的增加：细胞存活率逐渐降低,且呈剂量-效应关系;细胞融合率逐渐降低,细胞间隙逐渐增宽,脱落漂浮的细胞逐渐增多;细胞内活性氧含量逐渐升高;细胞凋亡率逐渐升高;细胞内1-磷酸鞘氨醇含量逐渐升高;血管细胞黏附分子1、鞘氨醇激酶1 m RNA和蛋白的相对表达量逐...