亚硒酸钠对胃上皮肿瘤SGC-7901细胞抑制作用的研究

应用细胞培养技术、电子显微镜技术、流式细胞仪技术及DNA末端原位标记染色法（TUNEL技术）,观察亚硒酸钠溶液对胃上皮肿瘤SGC-7901细胞的抑制作用。结果随着亚硒酸钠溶液浓度增高、作用时间延长对SGC-7901细胞的抑制率升高;可见较典型的细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”;TUNEL染色法细胞凋亡指数为8．4％～33．4％。证明亚硒酸钠溶液能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡;抑制作用与亚硒酸钠溶液的浓度及作用时间呈正相关。     

PCR-核酸试纸条快速鉴定皮氏罗尔斯顿菌

目的 基于PCR-核酸试纸条技术,建立快速检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌的方法。方法 利用煮沸法提取皮氏罗尔斯顿菌基因组DNA,以皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA为靶基因使用NCBI primer-BLAST 5.0设计一对特异性引物,经克隆转入大肠杆菌感受态细胞DH5α,鉴定PCR产物;分别在引物的5’端标记FITC与Biotin;组装核酸试纸条,建立PCR-核酸试纸条的方法;优化反应体系中胶体金标记的链霉亲和素与抗体浓度的最佳工作量;并对试纸条进行反应原理验证及灵敏度、特异性、稳定性评价;对某生物科技有限公司制药用水检测出的7株皮氏罗尔斯顿菌进行实验并利用MEGA构建进化树,对污染溯源进行分析。结果 煮沸法提取基因组浓度较好,纯度1.8~2.0;PCR产物经克隆转化、测序比对,与GenBank已登记的皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA相似度为100%;利用胶体金放大原理,每100 μL胶体金溶液中,加入3.5 μL链霉亲和素进行标记,硝酸纤维素膜上检测线为2.0 mg/mL抗FITC抗体,质控线为1.2 mg/mL生物素化BSA,与阳性扩增产物结合产生红色条带;按照优化条件进行试纸条组装,每100 μL样品展开液中加入8 μL PCR产物,反应5 min后观察结果;核酸试纸条特异性结果与琼脂糖凝胶电泳结果一致,仅有皮氏罗尔斯顿菌为阳性结果,不动杆菌、气单胞菌、假单胞菌、非脱羧勒克氏菌均为阴性结果;核酸试纸条灵敏度评价,将DNA浓度降至10-5 ng/μL时,试纸条检测线仍有条带,较琼脂糖凝胶电泳结果灵敏度高1000倍;核酸试纸条稳定性评价,将试纸条在3、6、9、12月进行检测,稳定性较好。结论 建立PCR-核酸试纸条技术检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌,具有简单快速、特异性强、灵敏度高、成本较低等优点,适用于制药企业对制药用水的日常检测。     

原发性高血压SCNN1G基因多态性特征分析

目的:本实验通过分析SCNN1G基因rs5729的基因型及等位基因分布特点,探究此基因单核苷酸多态性与原发性高血压(EH)的关系。方法:采用高分辨率熔解曲线法(high resolution melting,HRM)对rs5729位点进行基因多态性分型检测。样本来自2018-06-2019-07吉林市中心医院高血压患者115例(病例组)和非高血压人群88例(对照组)。同时,在上述样本中随机选取81例采用测序法进行验证。结果:病例组的基因型频率是TT 67.82%、AT 25.22%、AA 6.96%,T、A等位基因频率分别为80.43%和19.57%;对照组中rs5729位点TT、AT、AA基因型频率分别为89.77%、9.10%、1.13%;T、A等位基因频率分别为94.32%和5.68%;病例组和对照组的基因型与等位基因频率在2组间分布差异有统计学意义(P0.05)。结论:利用HRM法对SCNN1G rs5729位点进行基因分型,发现其在高血压人群中分布存在差异。     

多重PCR检测唾液标本中的幽门螺杆菌16S rRNA及cagA基因

目的 检测唾液标本幽门螺杆菌（Hp）的16S rRNA基因及cagA基因,了解消化道疾病患者口腔中Hp存在情况及致病情况。方法 利用生物学信息技术,设计Hp 16S rRNA、cagA基因特异性引物,建立检测Hp 16S rRNA、cagA基因的多重PCR方法;重组克隆质粒构建标准阳性对照品;收集156例消化道疾病患者的唾液标本,提取唾液标本中细菌DNA,应用建立的多重PCR方法,检测Hp 16S rRNA基因及cagA基因,并对结果进行分析。结果 建立的检测Hp 16S rRNA基因及cagA基因的多重PCR方法特异性强,灵敏性较高,最低检测线为103 copies· μL-1;重组质粒pGMT-16s和pGMT-cagA,可作为鉴定Hp的标准阳性对照品;检测Hp感染的消化道疾病患者的唾液标本,口腔携带Hp 16S rRNA基因的阳性率为87.2%,cagA基因阳性率为23.1%。结论 Hp感染的消化道疾病患者口腔唾液标本中存在Hp,口腔中存在Hp可能是诱发消化道Hp感染及治疗后复发的一个重要原因。     

VHS特异性siRNA对单纯疱疹病毒-1复制的影响

目的:探讨在RNAi技术条件下,干扰VHS合成对HSV-1复制的影响及对宿主细胞Vero的保护作用。方法:根据siRNA设计原则,用T7RNA聚合酶体外合成3种针对VHS(UL41)mRNA的siRNA,用lipofectamine 2000将siRNA转染到Vero细胞中后感染HSV-1,MTT法检测了细胞12h到72h的细胞活力,并测定了各时间点的病毒滴度值,绘制了子病毒一步生长曲线。结果:子代病毒一步生长曲线和MTT活力测底结果表明,转染的3对实验组siRNA都出现了病毒滴度明显降低,细胞病变相对空白组延迟的现象。结论:体外合成VHS基因特异性siRNA,能够有效的抑制病毒的复制,同时保护宿主细胞,这为siRNA治疗HSV-1的感染提供的初步的理论依据。     

木糖氧化无色杆菌致肺部感染合并败血症1例报告

木糖氧化无色杆菌致肺部感染合并败血症１例报告邱丽影张晓平（中国人民解放军第２０６医院检验科１３４００１）赵云冬（吉林卫生学校１３２００１）木糖氧化无色杆菌（ＡｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒＸｙｌｏｃｕ－ｄａｎｓ）为革兰氏阴性非发酵菌，属于产碱杆菌属的一个亚...     

一种基于胸阻抗法的心功能无创检测分析仪

目的为了经济、快捷、全面地实现心功能的无创检测,基于胸阻抗法成功研发了一种心功能无创检测分析仪,可方便地实现胸阻抗信号、心电信号、心音信号的同步检测分析,从而实现对患者心功能的无创综合评价。该方法无毒无创,操作简单,完全可以实现家用化普及。方法本文首先描述了系统的硬件模块构成,说明了胸阻抗信号的采集过程。其次,使用FPGA芯片与DDS芯片构成系统的控制与信号发生核心,指出了恒流源的精度等性能指标。再次,指出了胸阻抗信号处理的要点,运用互感原理实现干扰信号的隔离。最后,介绍了仪器软件功能,并展示了仪器软件实测结果。结果通过临床试验,对胸阻抗法与超声多普勒法检测的数据结果进行t检验,结果表明二者具有一致性。结论由于采用了先进的特征点判别方法,该设备具有较高的临床检测精度和较好的临床适用性,可满足临床心功能无创检测和评估的要求。     

亚硒酸钠溶液诱导胃上皮肿瘤SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的：探讨亚硒酸钠能否诱导胃上皮肿瘤SGC 7901细胞凋亡，以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法：亚硒酸钠溶液不同浓度、不同作用时间分别处理SGC 7901细胞，应用电子显微镜观察亚硒酸钠溶液作用后细胞形态变化，应用DNA末端原位标记染色法 (TUNEL)及流式细胞仪技术分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果：亚硒酸钠作用于SGC 7901细胞后，可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩、染色质凝集、呈新月型紧贴于核膜周边，核碎裂，染色质片段化，凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。TUNEL染色法细胞凋亡指数在8.4％～33.4％。结论：亚硒酸钠能够诱导SGC 7901细胞凋亡，亚硒酸钠诱导SGC 7901细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关。