岩藻黄素在振荡剪切应力致EPCs功能改变及衰老中的影响作用

目的探讨岩藻黄素(Fucoxanthin, FUCO)对振荡剪切应力作用下内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能及细胞衰老的影响作用。方法采用Flexcell STR-4000平行板流动系统模拟体内扰动流剪切应力(振荡剪切应力,Oscillatory shear stress,OSS,±4 dynes/cm2,1 Hz)并加载于EPCs;利用结晶紫染色法观察OSS作用后EPCs的形态学改变;应用Boyden小室、自发性细胞贴壁及Matrigel基质胶分别检测细胞迁移、黏附和体外血管形成能力的变化;采用Western blot检测促沉默信息调节因子1(Silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)蛋白和β-半乳糖苷酶法检测细胞衰老程度的改变;通过Dihydroethidium(DHE)荧光探针法检测细胞内超氧化物阴离子。结果与静态培养组相比,OSS导致EPCs形态学发生明显改变,表现为细胞长宽比降低,细胞之间间距增加;而FUCO对OSS导致的EPCs形态学改变无显...     

miR-21/PTEN/Akt参与白藜芦醇促EPC的体外成血管能力

目的 探讨miR-21及其下游PTEN/Akt信号通路在白藜芦醇促进大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPC)体外成血管能力中的作用.方法 采用密度梯度离心法分离大鼠四肢骨髓的单个核细胞,培养于含10％胎牛血清的EGM-2MV完全培养基中诱导分化成EPC,实验用3～5代的EPC.白藜芦醇(20 μmol/L)干预12 h后,采用...     

p53在层流剪切应力下对EPCs分化及功能的影响

目的:研究p53蛋白在层流剪切应力(LSS;12 dyn/cm2)作用下对内皮祖细胞(EPCs)分化及功能的影响,为心血管疾病的防治找到新的靶点.方法:采用密度梯度离心法获得大鼠骨髓单个核细胞,用EGM-2培养基诱导获得EPCs;通过Western blot方法检测p-p53及p53蛋白水平的变化;采用RT-qPCR及...