接种密度对人脐静脉间充质干细胞原代培养的影响

目的:探讨不同接种密度对人脐静脉间充质干细胞(hUV-MSCs)原代培养的影响,从而确定原代培养hUV-MSCs的适宜条件。方法:分离人脐静脉内皮及内皮下层细胞,按不同接种密度分组进行原代培养,记录原代培养时间,然后进行传代和成骨诱导培养,并检测细胞钙结节的表达情况。结果:hUV-MSCs原代分离培养消化30min,种植细胞密度为5×105~1×106/cm2的方法较合理。经化学药物(如地塞米松、β-甘油磷酸、维生素C)成骨诱导后,可形成钙结节。结论:合理hUV-MSCs原代培养方法,可以快速获得最大量的自体种子细胞,从而为组织工程化骨的体外构建创造条件。     

固定防腐液的复合配方研究

用观察、测量和组织学方法,通过四种复合配方对新鲜组织和陈旧标本固定防腐作用的实验研究。本文指出,苯—硼—醛复合液对组织的固定防腐效果优良,几乎接近于10%福尔马林的固定防腐效果。另外,对该复合液的优、缺点进行了讨论。     

注射甘油并浸渍肺的标本的制作

应用在教学中肺的标本都是浸泡在福尔马林(10 %甲醛 )固定液内。肺泡内充满福尔马林液体 ,实质坚硬失去弹性 ,不能给学生展示肺泡的扩张、回缩状态 ,且福尔马林刺激气味太浓 ,影响对标本的观察。试用甘油注射并浸渍后的肺能保持一定的弹性 ,充气时可使肺扩张 ,反之肺可自动回缩 ,所以 ,用此方法制作的肺标本可显示肺泡的扩张与回缩过程 ,并减少了甲醛的刺激气味 ,可更好的应用于解剖、临床Ｘ光的教学当中。弹性肺标本的制作 ,主要是利用甘油具有防腐、防干、保色的作用 ,具有亲水性和不易挥发等特点。当标本防腐固定后 ,经甘油浸渍可取代组…     

人颅部四对副交感神经节标本的制作

睫状神经节、下颌下神经节、翼腭神经节和耳神经节是位于颅部的四对副交感神经节 ,它们在神经解剖教学及科研中具有重要的作用。颅部副交感神经的节前纤维在这些神经节内换神经元 ,然后发出副交感节后纤维到达所支配的器官。这四对副交感神经节具有体小、扁、软、纤维细等特点 ,制作标本时很容易撕掉。在实验中通过反复操作 ,不断摸索、总结出一些经验和体会。此标本制作的基本步骤为先剥离出翼腭神经节 ;依此向眶内将睫状神经节显示出来 ;然后把下颌下神经节和耳神经节显露出来。取一侧面颅在其内侧面上先将上、中鼻甲去掉 ,再除去下鼻甲后…     

人体眶内结构标本的制作技术

人体眶内结构标本是解剖标本制作中较为复杂的标本之一。眶内结构比较复杂 ,肌肉数量多而小 ,神经分支细小 ,又被脂肪所包埋 ,标本制作时很容易损伤其分支。在教学中为了给学生展示完整的眶内结构 ,我们经过不断实践 ,总结经验 ,摸索出制作眶内结构标本的方法 ,更好地配合了系统解剖学教学及科研工作。其具体方法是将取过大脑的面颅在眼眶下缘 1cm处做一水平切面 ,去掉切面以下部分。一侧眼眶暴露浅层结构 ,一侧眼眶暴露深层结构。用锤击碎一侧眼眶上壁 ,仔细除去骨片 ,充分暴露眶内的部分。用眼科镊仔细将覆于表面的脂肪去掉 ,露出上睑提肌…     

螺内酯抑制大鼠角膜碱烧伤新生血管形成的作用

目的:观察螺内酯(spironolactone,SL)对大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管(corneal neovascularization,CRNV)形成的抑制作用。方法:健康SD大鼠42只随机分为3组,6只6眼为正常组,其余36只36眼建立碱烧伤诱导的大鼠CRNV模型后随机分为实验组和对照组,每组18只。实验组给予SL(100mg/kg)灌胃,对照组给予等量生理盐水灌胃,1次/d。术后第4,7,14d在裂隙灯显微镜下观察CRNV的面积。结果:对照组在碱烧伤后4d,大鼠角巩膜缘处有新生血管芽成刷状生长,生长速度迅速,至14d新生血管交织成网状,几乎布满整个角膜。实验组大鼠CRNV管径细、分布生长速度缓慢。在碱烧伤后4,7和14d实验组CRNV面积均明显小于对照组(P<0.01)。     

鼓索的制作方法

鼓索是面神经的重要分支 ,在临床上具有重要意义。它的特殊内脏感觉纤维随舌神经分布舌前 2 / 3粘膜 ,感受味觉 ;还含有副交感节前纤维 ,在下颌下神经节换神经元后 ,自节发出副交感节后纤维分布于舌下腺 ,下颌下腺。管理两腺分泌 (图 1)。面神经管内损伤时 ,如病毒感染 ,神经鞘     

hBMP-2基因转染的MSC与BGC的体外生物相容性研究

目的：研究人骨形态发生蛋白-2(human bone morphogenetic protein．2，hBMP-2)基因转染的兔骨髓基质细胞(bone marrows tromalcells，MSC)与生物活性陶瓷(Bioactive glass ceramics，BGC)体外培养条件下的生物相容性。方法：应用脂质体介导法将携带hBMP-2基因的重组载体PcDNA3-hBMP2导人体外培养的MSC中，G418筛选获得阳性克隆，继续扩增培养。细胞分为实验组(转染的细胞与BGC复合)，对照组(单纯转染的细胞)，在不同时间用倒置相差显微镜观察。MTT法进行细胞增殖测定，并进行细胞蛋白含量和碱性磷酸酶的定量检测。结果：原位杂交证实基因转染成功，形态特征及生物学行为证实携带hBMP-2基因的MSC无致瘤性，转染的MSC体外培养时复合或不复合BGC均生长良好，BGC利于细胞的贴附、生长与增殖，并对细胞的功能无不良影响。结论：基因转染的MSC可以作为一种新型的种子细胞，BGC是较理想的骨组织工程支架材料，基因转染的MSC复合BGC用于骨缺损的修复，具有广阔的临床应用前景。     

石蜡切片不用粘附剂的展片方法

石蜡切片是形态学常用科研手段,以往的石蜡切片展片都必须在载物片上涂上一层薄薄的粘附剂,以防在染片过程中切片脱落.但随之也带来一些切片处理方面的麻烦,如:切片染色后不易擦净,染色不均匀,透明不好,易污染等等.针对以上种种不足,我们经过多次对各种不同材料的实验,摸索出以下方法认为比较理想,效果较好.