兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及诱导分化研究

目的:分离培养家兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs),观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:无菌条件下切取家兔腹股沟处脂肪组织,0.25%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养原代细胞,取第3代ASCs做实验,用HE染色观察细胞形态,MTT比色法测定细胞生长曲线;用流式细胞仪检测其细胞表面标志物;用油红O染色和茜素红染色鉴定成脂和成骨诱导分化。结果:从家兔脂肪组织中分离获得的ASCs形态为长梭形,成纤维细胞样,生长活力旺盛,具有较强的增殖能力;流式细胞仪分析CD29呈阳性表达,CD31呈阴性表达;成脂诱导的细胞油红O染色阳性,成骨诱导的细胞茜素红染色阳性。结论:本实验分离培养的细胞为ASCs,具有成脂和成骨分化潜能。     

钛表面锌元素注入沉积改性及对变形链球菌附着性能的影响

目的:探讨钛表面锌元素注入沉积改性后,材料表面的化学组成及其对变形链球菌黏附和形态的影响。方法:应用全方位离子注入与沉积技术,对纯钛试件表面进行锌元素注入沉积,通过X射线光电子能谱分析,研究其表面化学组成及各元素百分比;将变形链球菌接种于锌元素注入沉积前、后不同注入沉积时间组的钛样品表面,扫描电镜观察细菌在其表面黏附数量和菌体形态的变化。采用SPSS13.0软件包中的单因素方差分析对数据进行统计学分析。结果:XPS全谱图显示,锌元素注入沉积改性后,样品由钛、氧、锌和碳元素组成。随着锌元素注入沉积时间的延长,材料表面锌元素含量增高;变形链球菌相应减少,各实验组(Zn-Ti)与商业纯钛组(cp-Ti)间均有显著差异(P<0.01);各实验组间差异显著(P<0.05),菌体未见明显变化。结论:全方位锌离子注入沉积技术可使纯钛表面形成含有锌离子的改性层,并增加了抗变形链球菌的黏附功能。     

PTEN抑癌基因对人黏液表皮样癌细胞系增殖和细胞周期的影响

目的：探讨外源性PTEN抑癌基因对唾液腺黏液表皮样癌细胞系增殖抑制的机制。方法：将含野生型PTEN抑癌基因cDNA重组反转录病毒表达质粒导入高转移性唾液腺黏液表皮样癌细胞系M3SP2,转染空载体细胞为对照。MTT比色法测定细胞增殖,流式细胞术测定细胞周期,免疫组化染色检测PCNA、EGFR、CDK4、P16INK4a和P57Kip2蛋白表达。采用SPSS11．0软件包进行统计学分析。结果：与对照细胞比较,PIEN基因转染癌细胞M3SP2-PTEN对表皮生长因子（EGF）介导的细胞增殖具有显著的抑制作用,癌细胞阻滞在G0／G1期,PCNA、EGFR、CDK4以及C—myc蛋白表达减弱,而P16INK4a和P57Kip2蛋白表达增强（P〈0．05）。结论：外源性PTEN基因具有抑制唾液腺黏液表样癌皮细胞系EGF介导的增殖作用,其作用机制与细胞周期进程受阻以及细胞周期调控分子有关。     

益胃合剂联合奥美拉唑治疗肝胃不和型急性胃炎临床疗效观察

目的 探讨益胃合剂联合奥美拉唑用于肝胃不和型急性胃炎的治疗效果.方法 选取2014年5月至2016年5月在本院接受治疗的肝胃不和型急性胃炎患者92例,随机分为西药组和联合组,每组46例;两组均予以口服奥美拉唑治疗,联合组加服益胃合剂,比较两组的治疗效果.结果 联合组治疗总有效率显著高于西药组(95.65％比78.26％,P＜0.05);联合组不良反应发生率明显低于西药组(4.65％比21.74％,P＜0.05).结论 益胃合剂联合奥美拉唑可有效提高肝胃不和型急性胃炎的治疗效果,减少不良反应发生,是一种安全、有效的治疗方案.     

冻干处理犬同种异体下颌骨：满足重建的强度、外形及支持能力

背景：同种异体颞下颌关节具有良好的外形结构、生物学特性,成为解决髁突缺损的有效方法之一,但是免疫排斥和成骨速度缓慢是同种异体骨移植存在的主要问题。 目的：对犬下颌骨进行冻干处理,使其满足同种异体骨支架重建下颌骨缺损的需要。 方法：获取12只比格犬下颌骨,去除骨膜、软组织、软骨等,用裂钻将颊侧皮质骨制造出直径为1 mm的孔隙,孔隙间距为1.0-2.0 cm。清洗干净后,先放入-4 ℃的冷库中,12 h后逐渐降至-80 ℃保存,1周后将冷冻骨放入干燥机内,使骨组织内剩余水分降低到5%以下,然后进行无菌包装,辐射灭菌后,置于无菌真空器中常温保存。冻干处理后进行生物力学检测。 结果与结论：压缩实验和弯曲实验的载荷-位移曲线均显示冻干骨的最大位移较小,曲线陡直,塑性区不明显,压力一旦超过弹性区迅速出现骨断裂。冻干骨压缩实验的最大载荷为(5 163.10±730.16) N,最大位移为(0.78±0.19) mm,刚度为(11 069.17±1 758.12) N/mm;弯曲实验的最大载荷为(486.67±134.12) N,最大位移为(0.67±0.15) mm,刚度为(1 151.67±256.46) N/mm。表明经水化处理后冷冻干燥犬下颌骨强度可以保持良好的外形及较好的支持能力,能够满足下颌骨修复重建的力学要求。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

外源性PTEN基因诱导黏液表皮样癌细胞系凋亡的研究

目的：探讨转染外源性PTEN抑癌基因对黏液表皮样癌细胞系M3SP2的诱导凋亡作用。方法：用含野生型PTEN抑癌基因逆转录病毒载体转染高转移性涎腺黏液表皮样癌细胞系M3SP2,转染空载体亲本细胞为对照细胞。体外细胞凋亡采用苏木精-伊红染色、电镜、TUNEL染色和流式细胞仪检测,裸鼠移植瘤细胞凋亡应用苏木精-伊红染色形态学判定。Bc l-2、P53和H-ras蛋白表达用免疫组化染色检测。结果：试验细胞M3SP2-PTEN与对照细胞M3SP2-pBp比较,出现较多的典型的凋亡细胞特征。试验细胞和对照细胞凋亡率分别为7.5%-13.6%和1.2%-2.3%;裸鼠移植瘤M3SP2-PTEN组和M3SP2-pBp组的凋亡指数分别为17.4%和3.5%。免疫组化染色显示M3SP2-PTEN细胞与对照细胞比较,P53蛋白表达增强,Bc l-2和H-ras蛋白表达减弱。结论：外源性PTEN抑癌基因能显著诱导高转移性涎腺黏液表皮样癌细胞凋亡,并且与P53、Bc l-2和H-ras蛋白表达有一定关系。     

乙型肝炎肝硬化肝性脑病胱抑素C与ABO血型相关性研究

目的：探讨乙型肝炎肝硬化肝性脑病（肝性脑病组）血清胱抑素C（CysC）与ABO血型相关性。方法2008年1月至2014年10月采用ABO/RhD血型定型检测试剂卡对228例乙型肝炎肝硬化合并肝性脑病患者进行ABO血型鉴定,采用PCR扩增仪测定患者HBV DNA载量,免疫比浊法测定两组血清CysC水平,采用Child-Pugh分级评价患者肝功能,并与220例健康对照组进行对比。结果肝性脑病组A型血比例为35.09%,高于对照组的23.63%,差异有统计学意义（P＜0.05）。肝性脑病B型、O型、AB型比例分别为21.05%、22.81%、17.54%,而对照组分别为28.18%、27.27%、20.91%,差异无统计学意义（P＞0.05）。肝性脑病组患者AB血型患者Child-Pugh分级,C级比例为52.50%,高于A型、B型、O型（分别为25.00%、20.83%、23.08%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。肝性脑病组患者中A血型患者HBV DNA载量为（1856.43±221.52）IU/ml,高于B型、O型、AB型[分别为（389.22±78.56）IU/ml、（412.58±70.25）IU/ml、（404.26±68.55）IU/ml],而A型、AB型患者血清CysC水平分别为（5.263±0.752）mg/L、（5.201±0.812）mg/L,高于B型及O型[分别为（0.782±0.028）mg/L、（5.201±0.812）mg/L]。结论 A型血乙型肝炎肝硬化患者更容易并发肝性脑病,AB血型患者肝硬化病情较其他血型严重,血清CysC水平升高可能是这两种血型病情较重的原因,因此临床应加强对A型、AB型人群乙型肝炎防治。