内皮祖细胞的研究进展

出生后骨髓中存在着一群祖细胞能够迁移到外周循环中,并且可以分化为成熟的内皮细胞,这一群细胞被定义为内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）.在胚胎发育的过程中,EPCs参与了最初的血管形成（vasculogenesis）.     

RT-PCR检测慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞集落bcr/abl mRNA的表达

采用ＲＴＰＣＲ 技术对ＣＭＬ 患者骨髓细胞１４ ｄ 的细胞集落群和部分１４ ｄ 或２８ ｄ 的单个细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ ｍ ＲＮＡ 表达进行分析。结果显示：所检测的骨髓细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ 基因的表达均呈阳性,即为ＣＭＬ 集落,与细胞遗传学分析结果一致。该方法为研究ＣＭＬ 造血前体细胞基因表达及其诊断、治疗监测提供了灵敏、有效的分析手段;并可作为研究ＣＭＬ 发病、治疗及筛选抗ＣＭＬ 药物较为理想的方法。     

rAAV2载体介导GFP基因转染树突状细胞

目的:在诱导人骨髓CD34 细胞分化成树突状细胞(dendritic cells,DCs)的基础上,探讨2型重组腺相关病毒(Type 2 recombinant adeno-associated virus,rAAV2)载体介导绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因转染DCs的条件.方法:采用免疫磁珠法分离纯化人骨髓来源的CD34 细胞.在含有IL-4和GM-CSF的培养体系中体外诱导CD34 细胞生成DCs,于第5天加入TNF-α诱导DCs成熟,在不同时间用rAAV2载体介导GFP基因转染未成熟和成熟的DCs.通过电子显微镜和流式细胞仪鉴定树突状细胞,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达.结果:人骨髓CD34 细胞经诱导分化后,在光镜及透射电镜下均可观察到DCs的形态特征,流式细胞仪检测到DCs表型;荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞培养第3天、第5天和加入TNF-α后的rAAV2-GFP转染率分别为0.45%,13.54%和0.25%.结论:本实验中所采用的培养体系可成功将人骨髓CD34 细胞诱导分化成DCs,rAAV2/GFP转染DCs效率随细胞诱导分化时间的延长而增高,且转染未成熟DCs的效率高于转染成熟DCs.     

中草药及其有效成分促粒系造血的研究进展

白细胞减少症发病率呈上升趋势，目前尚乏满意疗法，而部分中草药对此症有较好疗效。现将对迄今为止证实有确切疗效的升白细胞中草药及其有效成分在促进骨髓粒系造血方面的药理及临床研究进展作一介绍。     

血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响

目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %～ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6可促进MSC的增殖     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的促进作用

本研究以内皮细胞培养液（Endo-M）培养小鼠骨髓内皮细胞,探讨粒-巨噬系集落刺激因子（rmGM-CSF）对骨髓内皮细胞增殖的影响。用Endo-M培养小鼠骨髓内皮细胞,通过Wright-Giemsa染色计数内皮细胞集落、应用免疫荧光法观察内皮细胞表型;加入不同浓度的GM-CSF,通过集落形成率、MTT法和流式细胞术检测内皮细胞生长周期,观察GM-CSF对内皮细胞体外扩增的影响。结果表明：Endo-M诱导的骨髓细胞可以生成内皮细胞集落,vWF检测呈阳性;集落形成率检测及MTT法测定均证实GM-CSF对内皮细胞的增殖具有明显的促进作用;生长周期检测结果显示,GM-CSF处理组的细胞进入S期的比率为9.3%,而对照组为2.1%,说明GM-CSF可以通过促使内皮细胞进入S期而加快细胞的分裂,促进细胞增殖;比较第1代和第4次传代后细胞的生长曲线,两者无明显差别,说明多次传代后的细胞仍保持传代早期的增殖潜能。结论：GM-CSF对内皮细胞的增殖具有促进作用,经多次扩增传代后内皮细胞的增殖潜能无明显改变。     

用胎肝抑瘤物体外净化白血病细胞行自体骨髓移植

用体外液体及半固体培养方法，观察了不同剂量人胎肝低分子天然抑瘤物对下沉造血细胞和髓系白血病生长的影响。筛选出的低剂量抑瘤物能明显抑制白血病细胞生长，崦对正常粒单系造血祖细胞的生长无明显影响。选用低剂量低分子抑瘤物体外净化２例急性粒系白血病患者的骨髓，随扣作自体骨髓移植均获造血重建。     

苦参抗白血病作用及其机制

采用CFU GM和白血病CFU L集落培养、NBT/MTT还原试验和DNA的片段化分析法 ,观察了苦参对正常人骨髓、脐带血粒 巨噬系造血祖细胞 (CFU GM)和人急性髓系白血病HL 6 0细胞增殖、分化、凋亡的影响。结果表明 :5 ,10 ,15 ,2 0 μg·μl-1苦参均能明显抑制HL 6 0细胞增殖并诱导其凋亡 ,呈浓度 效应关系 ;其中 15 μg·μl-1苦参诱导HL 6 0细胞分化作用明显 ,且 5～ 15 μg·μl-1苦参对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用。提示苦参在一定浓度范围内有选择性抗白血病效应。此结果为进一步研究和开发苦参并应用于肿瘤临床提供了实验依据。     

组胺受体激动剂对粒单核白血病细胞（WEHI－3）增殖的影响

用体外琼脂培养方法，检测经不同浓庆组胺Ｈ１受体激动剂，Ｈ２受体激动剂及其拮抗剂孵育的粒单核白血病细胞集落数。结果显示：组胺Ｈ１受体激动剂对白血病细胞集落数无明显影响；组胺Ｈ２受体激动剂ｉｍｐｒｏｍｉｄｉｎｅ１Ｏ￣５～１０－８ｍｏ１／Ｌ逍度范围内可明显增加集落数，１０－６ｍｏ１／Ｌ时集落数最高；Ｈ２受体拮抗剂甲氰咪胍可阻断这一效应。提示粒单核白血病细胞也存在在组胺Ｈ２受体，激动组胺Ｈ２全体可促进粒单核白血病细胞的进一步增殖。