抑制泛素特异性蛋白酶7改善血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大

目的 探究泛素特异性蛋白酶7(USP7)抑制剂FT671在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的H9c2细胞肥大中的作用和潜在机制。方法 将H9c2细胞随机分为四组：对照组、FT671组、AngⅡ组、FT671+AngⅡ组。利用α-actinin细胞免疫荧光染色检测心肌细胞表面积;Western blot检测心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)以及NADPH氧化酶4(Nox4)的蛋白表达水平;RT-PCR检测ANP、BNP、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、IL-6、MCP-1、TNF-α的mRNA表达;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;细胞计数试剂8(CCK8)实验检测各组细胞活力;活性氧(ROS)染色检测细胞内氧化损伤水平。结果 与对照组相比,AngⅡ组USP7蛋白表达明显增加,而使用FT671后,USP7表达明显被抑制。与AngⅡ组相比,FT671+AngⅡ组心肌细胞面积减小;...     

EHT1864对低氧诱导内皮细胞的影响和机制研究

目的 探讨Rac抑制剂EHT 1864对低氧诱导的内皮细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 在低氧和正常氧的情况加入EHT 1864孵育HUVECs（人脐静脉内皮细胞）24 h,CCK-8（细胞增殖-毒性检测试剂盒）法检测细胞活性,DCFH-DA（二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯）荧光探针检测活性氧簇（ROS）水平,TUNEL（原位缺口末端标记法）染色观察细胞凋亡水平,免疫印迹法检测氧化应激、凋亡及相关通路蛋白的表达。结果 培养处理24 h后,低氧刺激组细胞促氧化因子Gp91、p47 phox蛋白表达及凋亡水平高于正常氧浓度组,而抗氧化因子SOD2蛋白表达低于正常氧浓度组,差异均有统计学意义（P<0.05）;而EHT 1864处理后能抑制低氧诱导的炎症和凋亡因子表达,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 EHT1864能够通过AMPKα-NOXs信号通路改善低氧诱导的内皮细胞氧化应激及凋亡。     

谷氨酰胺代谢在心血管疾病中的研究进展

<正>心血管疾病(CVD)是影响心脏或血管健康的疾病。据统计,2030年全球65岁以上人口CVD的患病率将持续增加,成为全球非感染性疾病死亡的首要原因^[1]。目前,针对CVD的治疗主要以药物和手术为主,外科手术操作难度大和术后并发症多,探索药物治疗靶点有重要意义。谷氨酰胺作为人体含量最丰富的非必需氨基酸,在细胞衰老和凋亡中起着重要作用,同时调控代谢、免疫保护、氧化应激和炎症水平等病理生理变化,对CVD的防治作用日益成为心血管领域研究的热点。     

热休克蛋白47对链脲佐菌素诱导的糖尿病心肌病的影响及机制探讨

目的 探讨热休克蛋白47(HSP47)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病心肌病的影响及具体机制。方法 采用8～10周龄C57BL/6雄性小鼠,随机分为对照组、HSP47过表达对照组、糖尿病组、HSP47过表达糖尿病组,每组12只。通过STZ腹腔注射的方法建立1型糖尿病心肌病小鼠模型,造模成功8周后应用小鼠尾静脉注射的方式过表达HSP47基因,6周后每组取出小鼠心脏6只用于病理和分子生物学分析。应用苏木精-伊红(HE)染色和天狼星红(PSR)染色分别检测心肌细胞横截面积和心肌组织纤维化程度;应用CD31和Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光染色检测纤维化程度;采用免疫印迹法测定纤维化相关蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,糖尿病组小鼠心肌HSP47表达水平上调(2.014±0.264比1.004±0.064,P<0.001)。糖尿病组小鼠心肌细胞横截面积较对照组增加[(235.3±20.7)μm2比(172.8±13.6)μm2,P<0.001],HSP47过表达糖尿病组的心肌细胞横截面积进一步增加[(302.2±41.0)μm2比(235.3±20.7)μm2,P=0.009]。同时,小鼠...     

线粒体质量控制在心力衰竭中的研究进展

<正>心力衰竭存在高病死率、高致死率、高再入院率的特征，寻求针对心力衰竭的更有效治疗策略迫在眉睫^[1]。最近研究显示，线粒体在心力衰竭病理生理中扮演着重要的角色。线粒体质量控制是维护线粒体正常生理功能的基础，线粒体生成及其降解保持动态平衡是维持细胞内线粒体功能的重要因素^[2]。线粒体质量控制机制是多层次的，表现为蛋白质、细胞器和细胞水平上的变化，其中线粒体质量控制方式包括5种类型：线粒体蛋白降解、线粒体动力学、线粒体自噬、     

穿心莲内酯对苯肾上腺素诱导的H9C2细胞肥大和氧化应激的作用及机制

摘 要 目的：探讨穿心莲内酯对苯肾上腺素诱导的H9C2心肌细胞肥大和氧化应激的作用及机制。方法: 用苯肾上腺素和穿心莲内酯共同孵育H9C2心肌细胞24 h后采用细胞计数检测H9C2心肌细胞活性,采用α-Actin免疫荧光染色观察H9c2细胞表面积,RT-PCR检测H9c2细胞中心房利钠肽（ANP）、B型尿钠肽（BNP）和β 肌球蛋白重链（α-MHC）mRNA的表达水平,免疫印迹法（Western blot）检测H9c2细胞中氧化应激相关蛋白的表达情况。此外,用不同浓度穿心莲内酯和苯肾上腺素共同孵育H9C2心肌细胞24 h后,采用DCFH DA荧光探针检测活性氧簇（ROS）水平,实时定量PCR（RT-PCR）检测各组H9c2细胞中的GP91、NOX4、P67phox、SOD2、NQO1和Gpx的mRNA表达水平。 结果: 穿心莲内酯可以显著缓解苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,抑制肥大标志物ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达水平。此外,穿心莲内酯以剂量依赖的方式抑制促氧化因子GP91、NOX4和P67phox的mRNA表达水平,促进抗氧化因子SOD2、NQO1和Gpx的mRNA表达水平。以上作用与苯肾上腺素组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。同时,免疫印迹分析证实了穿心莲内酯主要通过活化细胞内Nrf2/HO-1信号通路拮抗苯肾上腺素诱导的氧化应激。 结论: 穿心莲内酯可缓解苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,并通过激活Nrf2/HO-1信号通路改善苯肾上腺素诱导的H9C2细胞氧化应激。     

支链氨基酸与心血管疾病的研究进展

支链氨基酸是哺乳动物体内的重要营养物质，支链氨基酸代谢稳态对心功能的维持至关重要，同时参与多种疾病的发生发展过程。近年来也有越来越多的研究表明，支链氨基酸的代谢异常和心血管疾病及多种代谢性疾病有着紧密的联系。现对支链氨基酸代谢过程进行概述，就其在心力衰竭、急性心肌梗死、心肌缺血再灌注损伤、心律失常、糖尿病心肌病、高血压等心血管疾病中的研究进展进行综述，并对未来研究方向予以展望。     

GSTO1抑制TGFβ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和活化

目的：研究谷胱甘肽S-转移酶ω1(GSTO1)在转化生长因子β(TGFβ)诱导心脏成纤维细胞增殖与活化中的作用。方法：分离乳大鼠心脏成纤维细胞并进行体外培养。采用含绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒质粒构建对照(Ad-GFP)或GSTO1过表达(Ad-GSTO1)质粒并转染心脏成纤维细胞，再用大鼠TGFβ(rTGFβ)刺激细胞24 h，实验分为4组：Ad-GFP+PBS、Ad-GFP+rTGFβ、Ad-GSTO1+PBS和Ad-GSTO1+rTGFβ。运用qPCR和免疫荧光染色确定转染的有效性；Western blot检测GSTO1蛋白表达；划痕实验和EdU掺入实验评估细胞迁移和增殖；CCK-8实验评估细胞活力；Western blot和细胞免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)和纤连蛋白(FN)的表达水平，并检测心脏成纤维细胞内P38 MAPK和Smad3信号通路相关蛋白水平。结果：与Ad-GFP+rTGFβ组相比，GSTO1过表达抑制TGFβ诱导的心脏成纤维细胞增殖(P<0.05)，降低TGFβ刺激后α-SMA、Col...