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人源化抗人肺癌单域抗体基因的构建、表达及活性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的: 构建人源化的抗人肺癌单域抗体hu3D3VH基因, 在大肠杆菌中表达, 对其蛋白活性进行分析.方法: 采用CDR移植技术对mAb3D3的重链可变区进行人源化, 通过重叠PCR获得hu3D3VH的基因.构建pET22(b+)/hu3D3VH表达载体, 并转化大肠杆菌BL21(DE3), 在IPTG诱导下表达.表达产物通过Ni亲和层析柱纯化.采用间接ELISA和竞争抑制ELISA法进行活性分析.结果: 通过重叠PCR获得序列正确的目的基因.目的蛋白以包涵体的形式表达, 表达量占菌体总蛋白的30%以上.纯化后, 目的蛋白的纯度达95%以上.hu3D3VH具有与亲本抗体相同的抗原反应性, 并能抑制mAb3D3与L342细胞的结合.结论: 获得的人源化单域抗体hu3D3VH, 保留了与mAb3D3相同的反应性和特异性, 为进一步临床应用奠定了基础. 相似文献
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本文报告糖尿病伴癫痫患者5例,男性2例,女性3例;年龄46-81岁,平均67岁;病程3天~3个月不等。所有患者均符合1997年ADA关于糖尿病的诊断标准,5例患者均有典型的癫痫发作的临床表现,符合癫痫的临床诊断,既往均无癫瘸发作史及家族史。仅1例有糖尿病病史,1例有烦渴、多尿等症状,其余3例均无糖尿病史及家族史。1例于发病前10天曾于膝关节内注射甲基强的松龙20mg,余无特殊服药史。1例有高血压史余血压正常。空腹血糖8.2~19.1mmol/L,血K3.5~4.7mmol/L,Na138~145mmol/L,Cl105~110mmol/L,Bun、Cr在正常范围。血浆渗透压不高。 相似文献
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