溶血磷脂酸、人附睾蛋白4检测对卵巢癌的早期诊断价值

Objective To explore the specific value of lysophosphatidic acid (LPA) and human epididymis protein 4 ( HE4 ) on the early diagnosis of ovarian cancer. Methods Among the 121female patients serum samples colleted from the local hospital, 31 cases are early ovarian cancer group, 40cases are the nonmalignant ovarian disease group, 50 cases are the healthy check-up female. By means of phosphorus and ELISA,We can analyse the content of LPA and HE4 in serum .Results The value of LPA and HE4 In early-stage ovarian cancer group are( 12.24 ± 6.16) μ mol/L and(102.8 ± 167.3)pmol/L,respectively, much higher than the nonmalignant ovarian disease' s(2.32 ± 1.03) μ mol/L、(34.3 ± 12.1)pmol/L and the health check-up' s(2.04 ± 0.68)μ mol/L、(28.6 ± 8.3)pmol/L, Significant difference (P＜ 0.01). As the early experimental diagnoses for ovarian cancer, the conbination test of LPA and HE4 is better than the any single test of them. The conbination test' s sensitivity is 96.8%, its specificity is 87.8%,its accuracy is 90.1%. Conclusion Detect the LPA and HE4 in the early diagnosis of ovarian cancer has important value for clinical applications, It' s superior than the single use for early diagnosis in ovarian cancer.     

三种血清标志物联合检测在早期肝细胞肝癌中的诊断价值

目的 探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)、α-L岩藻糖苷酶(AFU)和甲胎蛋白(AFP)联合检测对早期肝细胞癌(HCC)的诊断价值.方法 收集2016年3月至2017年3月该院肝病患者222例,根据疾病类型分为早期HCC组(74例)、晚期HCC组(27例)、肝硬化组(74例)、慢性乙型肝炎组(47例),另选取同期体检健康者49例作为健康对照组.分别测定各组血清AFP、AFU和GP73水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价3项指标单独和联合检测对早期HCC的诊断价值.结果 早期HCC组GP73、AFU和AFP水平均明显高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组和健康对照组(P＜0.05).在肝癌筛查时,AFP单独诊断的ROC曲线下面积(AUC)为0.910(95％CI:0.864～0.936),两项指标联合时GP73和AFP联合诊断的AUC最大[0.925(95％CI:0.889～0.950)],灵敏度最高(95.0％).在鉴别诊断早期HCC与肝硬化时,单独诊断以GP73的AUC最大[0.842(95％CI:0.746～0.879)],特异度最高(86.5％);两项指标联合时GP73和AFU联合诊断的AUC最大[0.901(95％CI:0.788～0.907)].结论 GP73与AFP联合检测可以提高HCC筛查的诊断效能,GP73和AFU联合诊断能够提高早期HCC诊断效能,对于早期HCC和肝硬化的鉴别诊断具有重要意义.     

FSTL1在急性冠脉综合征患者血清中的表达水平及临床意义

目的观察卵泡抑素样蛋白-1(FSTL1)在不同类型的急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清中的水平变化及其临床诊断价值。方法收集临床确诊的ACS患者(ACS组)98例,分为ST段抬高型心肌梗死组(STEMI组)34例、非ST段抬高型心肌梗死组(NSTEMI组)28例、不稳定心绞痛组(UA组)36例,同时选取冠状动脉造影结果阴性的患者20例作为对照组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定4组血清中FSTL1的水平,分析FSTL1与其他指标的相关性及诊断价值。结果 ACS各组血清FSTL1水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ACS组血清FSTL1水平与心肌肌钙蛋白(cTNT)、Gensini评分和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平成正相关,相关系数(r)分别为0.210、0.236、0.219。FSTL1诊断ACS的ROC曲线下面积(AUC)可达0.910(95%CI:0.832~0.988),但次于cTNT。FSTL1最佳界值为5.65μg/L,特异度84.2%,灵敏度77.5%。FSTL1联合cTNT和HDL对诊断ACS的效能最高,AUC=0.945(95%CI:0.909~0.981)。结论 ACS患者血清的FSTL1水平与炎性反应及冠状动脉狭窄程度存在一定的相关性,对于判断患者冠状动脉狭窄的严重程度及预后具有一定的临床价值。     

无标签NT-proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备

摘要：目的：通过原核表达,获得不带标签的NT-proBNP重组蛋白,并用其免疫新西兰大白兔,制备兔抗NT-proBNP抗体。 方法：从重组菌pET-32a(+)-NT-proBNP提取重组质粒,通过PCR扩增出目的DNA片段,插入pCold TF载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化,制备不带标签的纯蛋白质,并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体,western blot鉴定其特异性。 结果：成功获得高纯度的不带标签的NT-proBNP蛋白,该蛋白质能被商品化的试剂盒识别。用该蛋白质免疫新西兰大白兔成功制备出高效价高特异的抗体。 结论：成功制备高纯度的无标签NT-proBNP蛋白及其多克隆抗体,为NT-proBNP在临床上的广泛应用奠定了基础。     

溶血磷脂酸、人附睾蛋白4检测对卵巢癌的早期诊断价值

目的 探讨溶血磷脂酸（LPA）、人附睾蛋白4（HE4）检测对卵巢癌早期诊断的价值.方法 测定121例女性血清样品,其中早期卵巢癌组31例,非恶性卵巢疾病组40例,健康体检女性50例,用定磷法、ELISA法分别检测血清LPA、HE4含量.结果 LPA、HE4含量在早期卵巢癌组分别为（12.24±6.16）μ mol/L、（102.8±167.3）pmol/L,均明显高于非恶性卵巢疾病组（2.32±1.03）μmol/L、（34.3±12.1）pmol/L和健康体检组（2.04±0.68）μ mol/L、（28.6±8.3）pmol/L,两组比较有极显著性差异（P＜0.01）.作为早期卵巢癌的实验诊断,LPA、HE4联合检测优于单项检测,其敏感性为96.8%、特异性为87.8%,准确度为90.1%.结论 LPA、HE4检测在卵巢癌的早期诊断具有重要的临床应用价值,二者联合检测更有利于卵巢癌的早期诊断.     

不同肾小球滤过率估算方程在术前肾癌患者中的临床应用研究

目的 评价7种不同估算肾小球滤过率(eGFR)方程在术前肾癌患者肾功能监测方面的应用价值.方法 选取2012年1月至2015年9月该院泌尿外科肾细胞癌术前住院患者386例,以99mTc2-DTPA肾动态显像测定肾小球滤过率(GFR)作为参考标准(rGFR),与7种eGFR做比较.用Spearman相关性分析和Bland-Altman一致性分析评价“金标准”GFR (rGFR)与eGFR的相关性;计算系列诊断性能指标及受试者工作特征曲线(ROC)评价各估算方程在不同影响因素下的诊断能力.结果 7种eGFR与rGFR的结果具有相关性(P均＜0.001).从诊断性能来看,eGFR1和eGFR2较好;而通过各估算方程ROC曲线发现,eGFR5、eGFR2和eGFR1的ROC曲线下面积相对较高.结论 7种eGFR方程在术前肾癌患者肾功能评价方面存在一定差异.CKD-EPI公式诊断价值最大,其次为瑞金公式,但是对于大于70岁的患者不适月.     

截短ALT1蛋白的获得及其多克隆抗体的制备

 目的 原核表达、纯化截短ALT1蛋白,制备ALT1多克隆抗体。方法 利用pCold TF载体原核表达系统,IPTG诱导,表达经生物信息学分析含有两个编码ALT1抗原表位的ALT1 N端1~115个氨基酸序列的基因片段,依次经镍(Ni)离子亲和柱纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、二次镍离子亲和柱纯化和分子筛柱层析得到不带标签的截短ALT1纯蛋白,用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果 经测序证实,成功构建了截短pCold TF-ALT1表达载体。获得纯度达90%的不带标签的截短ALT1重组蛋白,制备了效价达4.0×106的ALT1多克隆抗体,经western blot鉴定,能特异性地识别ALT1抗原和肝细胞裂解液。结论 成功获得高质量的截短ALT1无标签蛋白及其特异的多克隆抗体,为ALT1的免疫学检测试剂的研发提供了依据。     

无融合标签人胱抑素C重组蛋白的制备

目的构建人胱抑素C(CysC)基因的原核表达质粒pCold TF-CysC,表达并制备去标签蛋白的CysC。方法用人CysC的全长编码基因插入原核表达载体pCold TF并测序鉴定。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、镍柱纯化后获得带有His标签的重组蛋白TF-CysC。利用GST-HRV 3C蛋白酶去除该融合蛋白的TF标签,再经分子筛一步法同时去除TF标签、3C蛋白酶获得CysC,SDS-PAGE鉴定其纯度。用该CysC免疫新西兰大白兔,制备抗血清,并用间接ELISA及Western blot鉴定。结果测序结果与Genbank中人CysC序列一致,实现了CysC可溶性高表达。纯化的无标签CysC纯度大于95%,分子质量约为13.3 ku,与预期相符。免疫家兔后,获得的抗血清效价达到1∶4×106以上,能特异性识别市售CysC蛋白。该蛋白稳定性良好,在4℃保存一个月未见明显下降。结论成功应用原核表达系统,获得了可用作免疫诊断试剂标准品的CysC,为进一步建立CysC的免疫检测方法奠定了基础。