Gd(一)台湾-客家型部分基因克隆化分离和鉴定

从两例萄糖一6一磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(-)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcORⅠ完全酶解的3～5 kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成两个基因组基因文库。用~(32)P中标记的G6 PDcDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酸酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13 mP19噬菌体,完成Gd(-)Taiwan-Hakka型部价基因克隆化分离与鉴定,为DNA序列分析寻找突变部位打下基础。     

AK-10血透机故障维修

ＡＫ－１０血透机故障维修宜兴市人民医院设备科许卫明故障现象：ＡＫ—１０四层血透机开机十分钟后，透析液浓度报警灯慢闪。经对机器消毒清洗及冲洗Ａ、Ｂ吸管后，故障现像仍然存在，故决定重新调节各参数。将ＢＣＭＡ管放入消毒位置，将ＵＤＭＢ管放入正确的Ａ液中，打...     

先天愚型患者红细胞膜3磷酸甘油醛脱氢酶活性

本文对我室经细胞遗传学G带技术证明为先天愚型(21三体型)的7例患者,进行了红细胞膜G3PD活性测定。结果表明:病人组红细胞G3PD活性显著高于正常对照组(P<0.01)。加入ATP孵育后的G3PD释放率也显著高于对照组(P<0.01)。G3PD酶蛋白电泳定量与对照组无差异(P>0.05)。证实先天愚型红细胞膜确有异常。     

葡萄糖6磷酸脱氢酶变异型基因研究——I.Gd(一)Taiwan-Hakka型部份基因克隆化分离和鉴定

本文从2例葡萄糖6磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(一)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcoRI完全酶解的3～5kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成二个基因组基因丈库。用~(32)P标记的G6PD cDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酶酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13mp19噬菌体。在国内首次完成Gd(一)Taiwan—Hakka型部份基因克隆化分离与鉴定,为DNA序列分析寻找突变部位打下基础。     

应用聚合酶单链构象多态技术检测葡萄糖6磷酸脱氢酶基因突变

为了探索一种快速，灵敏及准确的检测红细胞葡萄糖６－磷酸脱氢酶基因点突变方法，我们采用单链构象多态技术，对２０例Ｇ６ＰＤ变异型基因外显子２进行分析。发现有４例患者双链ＤＮＡ中有一条链出现泳动变位，明显慢 于正常人及其他患者，用ＰＣＲ直接测表明在ｃＤＮＡ第９５位核苷酸发生碱基置换。结果说明ＳＳＣＰ技术检测点突变具有广泛的应用前景，比现行的突变检测方的行。作者还对ＰＣＲ－ＳＳＣＰ的优点和所突变的特点进行     

PCR/异源双链形成分析法在β地中海贫血产前诊断中的应用

采用聚合酶链反应(PCR)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),检测PCR产物异源双链形成情况,诊断和产前诊断B珠蛋白生成障碍性贫血(β地中海贫血)CD41-42(-CTTT)突变。此方法简便快速,可区分有无突变,并能鉴别纯合子与杂合子。应用本方法进行了4例产前诊断。对此方法的优点和局限性及应用前景进行了讨论。     

葡萄糖·6·磷酸脱氢酶缺乏症的基因研究

葡萄糖6磷酸脱氢酶(简称G6PD)是催化磷酸戊糖旁路代谢第一步反应的关键(?)。G6PD缺乏症是一种与药物性溶血,新生儿黄疸,慢性非球形细胞溶血性贫血有关的遗??传性酶缺陷病。至今,全世界已有300多种G6PD变异型通过生化指标得到鉴定。近年来,已测定出GP(?)的整个氨基酸序列,并用不同的方法相继克隆出G6P(?)基因,通过序列分析,阐明了G6P(?)的基因结构,对一些常见的G6P(?)变异型基因编码序列的分析,初步探讨了变异型与基因突变之间的关系,证明基因编码序列中单个或多个碱基置换,是变异型产生的原因,也是G6PD缺乏症基因突变的主要方式。作为一个典型的“看家基因”(housekeepinggene),G6PD基因的研究为探讨遗传性酶病的基因改变提供了一个很好的范例。     

PCR／异源双链形成分析法在β地中海贫血产前诊断中的应用

采用聚合酶链反应(PCR)结合聚丙烯酰胺凝腔电泳(PAGE)，检测PCR产物异源双链形成情况，诊断和产前诊斯β珠蛋白生成障碍性贫血(β地中海：贫血)CD41-42(-CTTT)突变。此方法简便快速，可区分有无突变，并能鉴别纯合子与杂合子。应用本方法进行了4例产前诊断。对此方法的优点和局限性及应用前景进行了讨论。