腹腔注射卵清白蛋白致大鼠内脏高敏感的研究

目的：建立鸡卵清白蛋白致内脏高敏感大鼠模型，研究该模型内脏高敏感与肥大细胞的关联。方法：腹腔注射鸡卵清白蛋白使大鼠内脏致敏，分别在给药3d及2周后用特殊染色法观察结肠肥大细胞的形态学改变。用腹部撤离反射（abdominal withdrawal reflex,AWR）评估致敏大鼠对直肠扩张刺激的内脏感觉改变。结果：甲苯胺蓝染色法显示，致敏大鼠肠黏膜及肠系膜肥大细胞数量明显增加（P＜0．01）。阿尔辛蓝－藏红染色法显示，对照组及致敏大鼠3ml及5ml气囊组AWR评分显著高于对照组（P＜0．01）。结论：腹腔注射鸡卵清白蛋白致内脏高敏感的作用确切，内脏致敏作用很可能和肥大细胞的增生和脱颗粒状态相关。     

内脏高敏感大鼠腹腔肥大细胞活性的改变及5-羟色胺对其的作用

目的：证实内脏高敏感大鼠腹腔中肥大细胞活性增加，探讨5－羟色胺（5－HT）影响肥大细胞脱颗粒的作用。方法：用腹腔注射鸡卵清白蛋白制备内脏高敏感大鼠，并随机分为A组和B组；空白对照鼠（腹腔注射生理盐水）随机分为C组和D组。提取内脏高敏感大鼠和对照组大鼠的腹腔肥大细胞，用抗原和抗血清孵育刺激肥大细胞脱颗粒，计数肥大细胞脱颗粒率，并用荧光法检测其组胺释放率。比较经不含5－HT孵育液组（A组和D组）和富含5－HT孵育液组（B组和C组）孵育的肥大细胞脱颗粒率和组胺释放率。结果：内脏致敏组大鼠（A组和B组）的组胺释放率明显高于D组大鼠（P＜0．01），A组和B组的脱颗粒率也显著高于D组（P＜0．01）；且A组的组胺释放率显著高于B组（P＜0．05），C组和D组间组胺释放率未见明显差异。结论：内脏致敏大鼠的肥大细胞活性增强，5－HT对致敏肥大细胞的脱颗粒功能有影响。     

肠易激综合征患者分泌5-羟色胺的肠嗜铬细胞形态及功能的改变

目的　研究肠易激综合征 (IBS)患者的肠嗜铬 (EC)细胞及其合成和储存 5 羟色胺 (5 HT)的功能变化。方法　按罗马Ⅱ标准诊断的 5 0例IBS患者 ,依其分型标准区分为腹泻型及便秘型。取IBS患者肠镜活检标本行Envision法免疫组化染色。部分活检标本电镜下观察EC细胞形态及功能。免疫组化染色及电镜观察均设正常对照组。结果　腹泻型、便秘型IBS与对照组比较 ,分泌 5 HT的EC细胞数量明显增多 ,分别为 15 .90± 5 .0 9,14 .73± 2 .73和 7.2 7± 2 .5 0 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。免疫组化染色显示IBS组EC细胞内合成的 5 HT增加 ,电镜显示肠道EC细胞功能活跃。结论　IBS患者肠黏膜EC细胞功能活跃 ,提示其大量合成并分泌的 5 HT可能在IBS的发病中起重要作用。     

内脏高敏感大鼠肠道和脊髓5-羟色胺能神经元及神经纤维分布

目的　研究内脏高敏感大鼠肠道及脊髓内的 5 羟色胺 (5 HT)能神经元及神经纤维的分布 ,肥大细胞脱颗粒对 5 HT能神经元及神经纤维的影响。方法　内脏高敏感大鼠分为两组 (A组和B组 ) ,B组为事先给予促肥大细胞脱颗粒释放剂com pound 4 8 80的内脏高敏感大鼠。对内脏高敏感大鼠和正常对照组 (C组 )结肠和脊髓进行 5 HT免疫组化IHN Envision染色法并作定量分析。结果　A组和C组比较肠道 5 HT免疫阳性神经纤维在黏膜下层阳性指数 (PI)明显增加 (P <0 0 1,0 6 34± 0 2 75vs 0 2 4 5± 0 131) ,肌间神经丛内和脊髓后角 5 H…     

稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞株的建立

目的：构建hsa-microRNA-224(miR-224)过表达慢病毒载体,建立稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞株。方法：设计miR-224 前体过表达基因片段,应用qRT-PCR 法扩增目的基因片段,通过基因重组技术将目的基因片段插入GV369 慢病毒载体中,进行PCR鉴定及DNA测序比对分析。用GV369-miR-224 慢病毒感染胰腺黏液性囊腺癌MCC1 细胞,建立稳定过表达miR-224 的MCC1 细胞株。荧光显微镜下观察GV369-NC及GV369-miR-224 慢病毒表达载体的转染效果,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCC1、GV369-miR-224-MCC1 和GV369-NC-MCC1 组细胞中miR-224 的表达水平。结果：成功构建GV369-miR-224 慢病毒表达载体质粒。GV369-miR-224-MCC1、GV369-NC-MCC1 细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光。miR-224 表达水平在GV369-miR-224-MCC1 细胞中显著高于阴性对照GV369-NC-MCC1 细胞和空白对照MCC1 细胞(23.45±1.94 vs 2.11±0.38,1.46±0.11,均P<0.01),而两组对照组之间miR-224 表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：成功构建稳定过表达miR-224 的胰腺黏液性囊腺癌MCC1细胞株,为探讨miR-224在胰腺黏液性囊腺癌中的功能及发病机制提供新的细胞模型。     

胰岛素瘤62例诊治体会

目的：总结胰岛素瘤的诊治经验，评估胰岛素瘤的多种定位诊断技术。方法：回顾性分析两院1970年-2001年来收治的62例胰岛素瘤的临床资料。结果：CT、MRI、术前B超、SAOG及IOUS诊断胰岛素瘤的敏感性分别为46.4%、70.0%、75.6%、75.9和100%；手术治疗60例，其中实施肿瘤剜除术41例，胰体尾切除术14例，胰十二指肠切除术3例，楔形切除术1例，姑息手术1例，总手术切除率98.3%；全组无手术死亡，肿瘤切除术后病人随访无低血糖发作；术后并发症包括胰瘘5例、胰腺假性囊肿2例。结论：术前B超和SAOG、术中详尽扪诊联合IOUS可基本上取得胰岛素瘤较为满意的定位诊断；根据胰岛素瘤的大小、部位、数目及性质采取适宜的手术方式是获得良好疗效的关键。     

2.138 肠易激综合征患者血浆5-HT、5-HIAA浓度改变

目的肠易激综合征(IBS)是一种胃肠功能性疾病.本研究旨在探讨不同亚型 IBS患者的血浆五羟色胺及其代谢产物的浓度有何改变,研究五羟色胺在发病中可能的作用 .方法选择1999年8月至2000年11月在我院消化科门诊及住院IBS病人31例, 对照组选择在我院体检的健康志愿者9人(女5例,男4例).IBS病人分为腹泻型及便秘型,入组诊断标准及分型参照"罗马Ⅱ标准".其中腹泻型18例(女11例,男7例).便秘型IBS为13 例(女6例,男7例).各研究对象均空腹取静脉血3mL,采用高效液相-电化学检测仪系统测定5-HT、5-HIAA含量.结果结果显示,两型IBS患者的血浆5-HT浓度均有升高,和对照组比较有显著性差异,但两者无显著性差异.和对照组比较,腹泻及便秘型患者代谢产物的浓度均明显升高,且组内的差异较大.表两型IBS患者及正常对照组5-HT、5-HIAA浓度比较 结论 腹泻型及便秘型患者的血浆5-HT均增加,但腹泻型患者的血浆5-HT 水平增加更多,血浆5-HT在IBS患者内脏疼痛感知、痛阈调节中有重要作用,而对排便频率、粪便硬度可能影响不大.     

内脏高敏感大鼠肠道和脊髓5-羟色胺能神经元及神经纤维分布

目的 :研究内脏高敏感大鼠肠道及脊髓内的 5 -羟色胺 (5 - HT)能神经元及神经纤维的分布 ,肥大细胞脱颗粒对 5 - HT能神经元及神经纤维的影响。 方法 :鸡卵清白蛋白制备的内脏高敏感大鼠分为两组 (A组和 B组 ) ,B组为事先给予促肥大细胞脱颗粒释放剂 C4 8/ 80的内脏高敏感大鼠 ,A组为未予该药物的内脏高敏感大鼠。对内脏高敏感大鼠和正常对照组 (C组 )结肠和脊髓进行 5 - HT免疫组化 IHN- Envision染色并作定量分析。 结果 :A组和 C组比较 ,肠道 5 - HT免疫阳性神经纤维在黏膜下层阳性指数 (PI)明显增加 [(0 .6 34± 0 .2 75 ) vs(0 .2 4 5± 0 .131) ,P<0 .0 1],肌间神经丛内和脊髓后角 5 - HT免疫阳性神经纤维 /神经元 PI显著增高 [(0 .0 0 9± 0 .0 0 4 ) vs(0 .0 0 7± 0 .0 0 4 ) ,(1.0 36± 0 .6 4 3) vs(0 .94 9± 0 .4 6 2 ) ,P<0 .0 5 ]。B组的结肠黏膜下层、肌间神经丛和脊髓后角的 5 - HT免疫阳性神经纤维 /神经元 PI分别为 0 .95 8± 0 .32 8,0 .0 12± 0 .0 0 5和1.732± 0 .75 4 ,比 A组明显增高 (P<0 .0 5 )。结论 :结肠和脊髓后角 5 - HT能神经纤维 /神经元功能异常可能是内脏高敏感的形成机制之一 ,肥大细胞至少部分通过 5 - HT能神经元作用于内脏感觉传导通路。     

肠易激综合征患者活动期和缓解期血浆5-HT、5-HIAA的变化

目的：探讨肠易激综合征（IBS）活动期及缓解期的血浆5－羟色胺（5－HT）及其代谢产物5－羟吲哚乙酸（5－HIAA）水平的差异。方法：参照罗巴Ⅱ诊断标准，选取腹泻型IBS（D－IBS）患者14例及便秘型IBS（C－IBS）患者11例，正常对照组12例。用高效液相色谱电化学法测定IBS患者缓解期和活动期及健康对照组的血浆5－HT、5－HIAA水平。结果：活动期D－IBS及C－IBS患者血浆5－HT、5－HIAA水平均升高，和正常对照组比较升高达2－5倍，差异均有显著性（P＜0．01）。除活动期D－IBS血浆5－HT水平显著高于C－IBS（P＜0．05）外，两型IBS患者之间活动期血浆5－HIAA和缓解期血浆5－HT、5－HIAA水平均无显著差异。两型IBS患者缓解期的血浆5－HT、5－HIAA水平均比活动期明显降低（P＜0．01），但仍显著高于正常对照组（P＜0．01或P＜0．05）。结论：5－HT、5－HIAA和IBS发病相关，推测5－HT改变是IBS的病理生理改变之一。