用PCR技术对淋巴结核进行病原学检查的初步研究

By using polymerase chain reaction (PCR) technique in amplifying a reparative DNA sequence specific for Mycobacterium tuberculosis, the pathogenic bacterium in paraffin-embedded tissue was identified. A 123-base-pair fragment, specific PCR product, was obtained from all 12 cases of tuberculous lymphadenitis and 4 out of 10 cases in which tuberculosis was suspected. In the 4 suspected cases, 3 cases showed good results when treated by anti-tuberculosis therapy. The remaining case was lost from follow-up. Comparing acid-fast stain and PCR results, we confirm that PCR method is more powerful and more sensitive than acid-fast stain in the etiological diagnosis of tuberculous lymphadenitis.     

真菌性鼻窦炎23例

真菌性鼻窦炎以往发病率较低 ,近年由于诊治技术的不断提高 ,其病例报告逐渐增多。据报道 ,上颌窦真菌病已占上颌窦感染性疾病的 1 5 .8% 〔1〕。为观察围手术期治疗真菌性鼻窦炎的疗效 ,本文总结 1 997年 5月～ 2 0 0 2年 5月采用内镜鼻窦手术结合药物综合治疗非侵袭性真菌性鼻窦炎患者 2 3例 ,现报告如下。1　资料与方法1 .1 　 临床资料本组患者 2 3例 ,男 1 1例 ,女 1 2例 ;年龄 36～5 8岁 ,平均 46.6岁。病程 5个月～ 4年。主要症状 :鼻涕带血或回吸性涕血 8例 ,鼻出血 3例 ,鼻塞、流脓涕 4例 ,从鼻腔或从咽部排出褐色块状物伴有臭味 4…     

nm23-H1基因对人肺癌细胞中细胞外信号调节激酶活性的影响

目的探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响.方法应用特异性识别总ERK1/2(p44/42 MAP kinase)和双磷酸化ERK1/2(phospho-p44/42 MAP kinase)的抗体及蛋白印迹法(Western blot),检测L9981(缺失nm23-H1基因的原代肺癌细胞株)、L9981-nm23-H1(转染了nm23-H1基因的L9981细胞株)、L9981-PLXSN(转染了空载体的L9981细胞株)中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2的水平.磷酸化ERK1/2活性应用非放射性免疫沉淀和Western blot法以及p44/42 MAP kinase分析试剂盒予以检测.结果 L9981-nm23-H1细胞株中磷酸化ERK1/2的水平,以及ERK1/2活性均显著低于L9981细胞株和L9981-PLXSN细胞株(P<0.01),L9981和L9981-PLXSN细胞株间磷酸化ERK1/2水平和ERK1/2活性比较均无显著性差异(P＞0.05).三个细胞株间总ERK1/2水平比较均无显著性差异(P>0.05).结论 nm23-H1基因可明显靶向地抑制人高转移肺癌细胞株L9981中ERK1/2的转录表达和ERK1/2的活性.推测nm23-H1基因的作用机制可能与其抑制了MAPK/ERK信号传导通路有关.     

nm23-H1基因逆转肺癌转移表型及其分子机制的实验研究

肺癌的侵袭和转移是多基因、多因子共同作用的结果 ,并且是一到两个关键基因在时间上和空间上相互配合、协同促进了细胞的癌变、侵袭和转移[1] 。转移抑制基因 (ｍｅｔａｓｔａｓｉｓｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅｓ)结构和功能的异常 ,导致对肿瘤转移表型的调控异常 ,最终导致肿瘤转移。ｎｍ2 3 Ｈ1基因已被证明为肿瘤转移抑制基因 ,并与癌细胞的转移能力密切相关。我们的早期研究表明 ,ｎｍ2 3 Ｈ1基因的低表达和杂合性缺失与肺癌的高转移性和预后不良有密切关系 ,而且ｎｍ2 3 Ｈ1基因缺失的肺癌常伴有一些肿瘤侵袭相关分子的表达异常[2～…     

TRAIL蛋白原核表达载体的构建及表达研究

目的 利用蛋白自剪切功能原核表达系统构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）胞膜外段融合蛋白表达载体,并进行表达条件优化和初步纯化。方法 设计基因拼接引物,合成TRAIL基因胞膜外段双链cDNA序列,将其连接于克隆载体pMD18-T中;将酶切、纯化的TRAIL基因与经相同处理的载体pTWIN1相连接,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选阳性重组子。将鉴定（酶切及序列分析）阳性的重组子质粒转人大肠埃希菌ER2566表达菌中,采用蛋白质SDS—PAGE电泳方法分析不同浓度诱导剂异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）、不同诱导温度、不同诱导时间下目的蛋白表达情况。结果 成功获得了包含TRAIL基因胞膜外段的双链cDNA序列,酶切及序列分析证实成功构建了TRAIL胞膜外段蛋白自剪切功能原核表达载体。采用0．3mmol／LIPTG、15℃诱导过夜（14～16h）,目的蛋白获得较高表达量,且大部分为可溶性蛋白。结论 采用大肠埃希氏菌ER2566,TRAIL胞膜外段融合蛋白获得高表达,经简单后续处理即可获得不含任何额外氨基酸的可溶性目的蛋白。     

视网膜母细胞瘤易感基因在人肺癌中的缺失和突变研究

目的研究视网膜母细胞瘤易感基因(Rb基因)在人肺癌中的缺失和突变情况。方法采用PCR和限制性内切酶分析技术,对20例人肺癌组织DNA样品和3例正常人肺组织DNA样品Rb基因外显子14~16、22~23区域进行分析。结果2例样品存在外显子14~16区域的缺失。结论Rb基因在人肺癌,特别是小细胞肺癌中存在缺失,此为肺癌发病机制的研究积累了资料。     

转录因子CTCF与表观遗传及疾病的关系

CTCF是普遍存在于真核生物中的多功能转录因子,通过其11锌指结构可与多种基因和蛋白质结合而广泛参与基因的表达调控,表现出各种生物学功能.CTCF参与染色质重塑和基因印迹等表观遗传调控并且起关键作用.CTCF参与的调控若发生异常将引起生长发育或神经功能异常等疾病.作者就近年来CTCF与表观遗传、疾病之间的关系作一介绍.     

显微支撑喉镜下射频治疗早期声门癌及癌前病变

目的探讨应用显微支撑喉镜下射频治疗早期声门癌及喉癌前病变的疗效。方法采用Storz支撑喉镜及器械和Ze iss显微镜,对11例早期声门癌及10例喉癌前病变患者行显微支撑喉镜下射频治疗。结果术后随访6个月至5年,11例早期喉癌患者术后均无复发,其中1例患者术后4个月见前连合区粘连,局部有新生物突出,再次手术病理报告为鳞状上皮乳头状瘤样增生;1例喉黏膜白斑患者术后8个月复发而再次手术。21例患者术后发音质量均较清晰。结论显微支撑喉镜下射频治疗早期声门癌及癌前病变疗效确切,并可最大限度保留喉部结构及发音功能,值得临床中提倡应用。     

甲状舌管囊肿(瘘管)术后复发原因分析

甲状舌管囊肿和瘘管是常见疾病，如果处理不当容易导致术后复发.选择我院1991～2002年86例甲状舌管囊肿和31例甲状舌管瘘管术后复发的共23例病人进行总结，现将其临床资料分析报道如下。     

改良乙状窦后进路舌咽神经切断术治疗舌咽神经痛

目的 :探讨提高手术治疗舌咽神经痛疗效的手术进路。方法 :对 8例本病患者取改良乙状窦后进路 ,进入桥小脑角 ,暴露颈静脉孔 ,在手术显微镜下对颈静脉内孔周围探查 ,并切断舌咽神经 ;如并发三叉神经痛者同时行三叉神经感觉根部分切断。结果 :8例术后舌咽神经痛 (其中 2例并发三叉神经痛 )症状均完全消失 ,无并发症发生。随访 2～ 7年无复发。结论 :舌咽神经痛经改良乙状窦后进路行颈静脉内孔探查 ,并切断舌咽神经根 ,可以获得解除疼痛、永不复发的满意效果