阿司匹林通过抑制大鼠破骨细胞 RANK 表达抑制骨质吸收

目的：研究不同浓度阿司匹林对体外培养大鼠破骨细胞（Osteoclast, OC）RANK（receptor activator of nuclear factor-κB,核因子κB受体活化因子）表达的影响。方法采用RANKL和M-CSF诱导大鼠骨髓单核巨噬细胞破骨分化模型,给予不同浓度的阿司匹林（0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、1.5 mmol/L）和雌激素（雌二醇10-6 mmol/L）处理,而后进行抗酒石酸酸性磷酸酶（ The tartrate-resistant acid phosphatase ,TRAP）染色观察细胞形态特征,扫描电镜观察骨磨片破骨细胞骨吸收陷窝,RT-PCR技术检测破骨细胞表面RANK基因的表达,ELISA法检测RANK蛋白的表达。结果阿司匹林和雌激素都可以使大鼠破骨细胞成熟分化程度和骨吸收活性降低,抑制破骨细胞RANK基因和蛋白的表达,且阿司匹林的抑制作用具有剂量依赖性。结论阿司匹林对大鼠破骨细胞RANK的表达有抑制作用且呈剂量依赖性,从而抑制破骨细胞的成熟分化及骨吸收功能。     

雄激素在乳腺发育和乳腺癌发生发展中作用的研究进展

一系列的临床前期和临床期研究表明,雄激素与雄激素受体的异常与正常乳腺细胞及乳腺癌细胞的增殖均密切相关。在乳腺上皮细胞增殖的各个周期和乳汁中均可检测到雄激素。雄激素经由其受体介导所涉及的机制在正常乳腺细胞的增殖和乳腺癌细胞的侵袭演进中也起着极其重要的作用。本文就雄激素及其受体的基因、蛋白结构和其在乳腺发育,乳腺癌形成中可能的机制加以综述,为乳腺发育和乳腺癌研究提供一定的理论依据。     

“砍死酶”-3——死与生的转折点

细胞的凋亡是一个级联酶促反应过程,最终的执行者是胱冬肽酶-3（Caspase 3,本文首译＂砍死酶＂）。过去20多年,人们一般认为肿瘤细胞具有＂抗凋亡＂的特性。但令人不解的是,砍死酶-3在肿瘤中常呈过表达态。晚近我国的一组研究人员发现,砍死酶-3对肿瘤的生长至关重要。在把砍死酶-3的表达敲低以后,刺激肿瘤生长的因素也失去了作用。这组学者把砍死酶-3的这种既促凋亡又促增殖的作用称为砍死酶-3的双重作用。实际上,这种所谓的双重作用普遍存在,如抗凋亡蛋白Bcl-2抑制细胞的增殖;细胞死亡受体CD95刺激肿瘤的增殖;Jnk激酶既诱导凋亡又促进肿瘤的增殖,如此等等,不一而足。这些偶然的现象之合实际上是生与死之间转换的必然——没有死就不必生,死亡增多必然促进繁殖。     

雄激素在乳腺发育和乳腺癌发生发展中作用的研究进展

一系列的临床前期和临床期研究表明,雄激素与雄激素受体的异常与正常乳腺细胞及乳腺癌细胞的增殖均密切相关。在乳腺上皮细胞增殖的各个周期和乳汁中均可检测到雄激素。雄激素经由其受体介导所涉及的机制在正常乳腺细胞的增殖和乳腺癌细胞的侵袭演进中也起着极其重要的作用。本文就雄激素及其受体的基因、蛋白结构和其在乳腺发育,乳腺癌形成中可能的机制加以综述,为乳腺发育和乳腺癌研究提供一定的理论依据。     

临床病理学进修医生全面培养模式的探讨

目的探讨临床病理科进修医师的全面培养模式。方法结合科室实际情况,每年接收10～15名进修医生。根据进修医生的特点,分别通过岗前培训、参加疑难病例讨论、文献阅读、科研素养培养和阶段性考核等方式进行个性化和规范化培养。结果在进修结束时,绝大多数进修医生都能达到预期培养目标。掌握标准化的病理诊断工作流程,诊断能力获得较大提高;提高了自学能力、英文学习能力;掌握了常见病、疑难病的诊断方法、诊断思路及临床研究方法等。结论通过系统化的培养,进修医生的临床病理诊断能力得到了全面提高,为基层医院提供了大量的高水平病理医师。     

乳腺原位癌基因表达与分子肿瘤学理论的两个悖论

肿瘤的发生被认为是基因突变的累积导致细胞增殖失控和逃避凋亡的结果.这些常见的突变基因包括癌基因的扩增和过表达,抑癌基因的表达减弱和丢失等.科学研究和临床工作中,我们常发现与现有科学理论相矛盾的现象或结果,我们称之为悖论(paradox).悖论是科学理论的大忌,如无法解释,常提示理论体系中存在某种错误,乃至理论体系的彻底错误.我们且看乳腺分子肿瘤学中的两个例子.     

小剂量阿司匹林对去势大鼠骨髓基质干细胞成骨分化的影响

[目的]检测不同浓度低剂量阿司匹林对去势后(OVX)大鼠骨髓基质干细胞成骨分化的影响.[方法]建立SD大鼠去势模型,全骨髓贴壁法培养骨髓基质干细胞(BMSCs),传代4次后进行成骨诱导,建立对照组和不同浓度阿司匹林组(0.25、0.5、1、2及5mmol/L).于不同的培养时间点,倒置显微镜观察并进行MTT检测细胞增殖生长情况;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测培养细胞上清ALP活性;于诱导7d和21d时分别行细胞碱性磷酸酶染色和茜素红钙化结节染色.[结果]阿司匹林无明显促进BMSCs增殖作用,而大剂量阿司匹林(5 mmol/L)具有抑制BMSCs增殖作用.实验组(0.25、0.5、1、2 mmol/L阿司匹林组)细胞培养上清中ALP浓度较对照组显著增强(P＜0.05);碱性磷酸酶染色(1、2 mmol/L组)阳性表达增强;茜素红染色显示,实验组(0.5、1、2mmol/L组)钙结节数量、钙化面积均高于对照组(P＜0.05).[结论]阿司匹林不能直接促进去势大鼠BMSC增殖活性,但小剂量阿司匹林可显著提高体外培养BMSC成骨活性,增强钙盐沉积,促进钙结节形成.     

BALB/c小鼠肝癌模型建立及其形态学特征分析

目的:建立BALB/c小鼠肝癌动物模型,并研究其超微结构的特点,为开展肝细胞癌相关实验研究奠定基础。方法:66只正常雄性成年BALB/c小鼠完全随机分为5组,即实验A、B、C、D组和对照组,实验组每组14只,对照组10只。采用二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl4)/乙醇的联合诱导方式喂养实验组小鼠;于给药后第60、90、120和150天,分别取实验A、B、C和D组小鼠肝脏组织;于给药后第150天取对照组小鼠肝脏组织。观察小鼠肝脏病变的发生情况及其超微结构的改变,并利用RT-PCR检测病变肝脏组织不同时期小鼠甲胎蛋白(mAFP)的变化情况。结果:对小鼠肝脏组织行病理学检查发现,对照组肝脏未见异常,给药后第60天实验A组小鼠肝脏炎症发生率为64.28%(9/12),第90天实验B组小鼠肝脏轻度纤维化发生率为64.28%(9/12),第120天实验C组小鼠肝硬化发生率为71.43%(10/12),第150天实验D组小鼠肝脏肿瘤性病变发生率为64.28%(9/12);以上时间点各实验组小鼠肝脏病变发生率均明显高于对照组,P<0.05。mAFP阳性表达在给药60d后出现;第150天时透射电镜下观察到的形态特征符合肝癌。结论:利用化学致癌剂和肿瘤促进剂,成功建立了甲胎蛋白分泌型BALB/c小鼠肝癌动物模型,该方法诱导时间相对较短,病变过程和超微结构的改变均与人类肝癌发病特点类同,是研究肝癌发生发展的理想实验动物模型。     

雄激素对雌性小鼠乳腺发育的影响

目的:观察雄激素(睾酮)对雌性小鼠乳腺生长、发育的影响,为研究雄激素与乳腺疾病的关系奠定基础.方法:对小鼠进行睾酮皮下注射和来曲唑灌胃给药,一段时间后,应用整装切片法和HE染色法,观察小鼠乳腺组织的发育情况.结果:高剂量雄激素主要使雌性小鼠正常乳腺组织的导管二、三级分支、末端终蕾数量减少;低剂量雄激素一定程度上可以促进乳腺的发育.结论:高剂量雄激素可能经过AR及其它信号通路或作用间质细胞产生某种信号分子抑制乳腺的生长.     

阿司匹林对大鼠破骨细胞分化成熟和骨吸收活性的影响

目的 研究不同浓度阿司匹林对体外培养大鼠破骨细胞(Osteoclast,OC)分化成熟及骨吸收活性的影响.方法 建立由核激活因子受体配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)共同作用的大鼠破骨细胞骨髓诱导体系,将雌激素(10-6 mmol/L)和不同浓度的阿司匹林(0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、1.5 mmol/L)分别作用于破骨细胞.诱导培养后分别对破骨细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶(The tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色,观察细胞形态,并计数破骨样细胞数量;将各组破骨细胞接种于骨磨片上,建立破骨细胞-骨磨片活性分析模型,于不同时间点对骨磨片进行光镜和扫描电镜观察,分析计算骨吸收陷窝面积.结果 与正常对照组相比,雌激素组破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着阿司匹林浓度的增加,阿司匹林组TRAP阳性多核破骨细胞数量、骨吸收陷窝面积逐渐减少直至消失,差异有统计学意义(P＜0.05).与雌激素组相比,低浓度阿司匹林组(0.25mmol/L)没有明显差异;但中、高浓度阿司匹林实验组(0.5mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L)破骨细胞数量和骨吸收陷窝面积减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 阿司匹林对破骨细胞的分化成熟及骨吸收功能有抑制作用,且呈剂量依赖性,从而具有抗骨质疏松的作用.