miRNA-7 对食管癌细胞 TE-1 化疗耐药的影响

目的 探讨微小 RNA-7（miRNA-7）过表达对食管癌细胞 TE-1 顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法 用 Lipofectmin 2000 法向食管癌细胞株 TE-1 转染组瞬时转染 miRNA-7 mimic , 向转染对照组瞬时转染 mimic Negative Control, 通过 RT-PCR 检测以上 2 组及空白对照组的 miRNA-7 以及表皮生长因子受体（EGFR）mRNA 表达情况。Western blot 法分别检测转染组与转染对照组总 EGFR 及细胞浆、 细胞核内的 EGFR 蛋白表达。CCK-8 检测转染组与转染对照组 TE-1 的顺铂半数抑制浓度 （IC50）。免疫荧光共聚焦显微镜观察转染组与转染对照组 EGFR 的表达。结果 转染组较转染对照组及空白对照组的 miRNA-7 表达显著增高, EGFR mRNA 表达下降（均 P＜ 0.001); 转染组较转染对照组总 EGFR 降低, 核内 EGFR 增高（均 P＜0.01）, 胞浆 EGFR 表达降低（P＜0.05）; CCK-8 结果显示, TE-1 中 miRNA-7 过表达后顺铂（48 h） IC50较转染对照组增高（P＜0.01）; 免疫荧光示转染组较转染对照组核内 EGFR 增高且胞膜与胞浆 EGFR 表达减少。结论 食管癌细胞 TE-1 中 miRNA-7 过表达可通过 EGFR 核转位增多使顺铂产生耐药性。     

核心蛋白聚糖抑制结直肠腺癌细胞系HCT116的体外侵袭

目的探讨常氧和低氧条件下核心蛋白聚糖(DCN)对结直肠腺癌细胞系HCT116体外侵袭的作用及机制。方法 Transwell法检测HCT116细胞体外侵袭能力;Real-time PCR法检测细胞CD133和TIMP-2 mRNA的表达;Western blot检测细胞HIF-1α、CD133和TIMP-2蛋白的表达。结果 1)常氧和低氧环境下,DCN浓度为0、1和3mg/L时HCT116细胞的侵袭数量分别为(241±46)、(168±46)和(51±17)个/视野(P0.01)及(207±61)、(213±64)、(156±54)和(44±17)个/视野(P0.01)。2)在常氧条件下,DCN(3 mg/L)显著上调HCT116细胞TIMP-2mRNA和蛋白的表达(P0.01),而对CD133 mRNA和蛋白的表达无明显作用。3)低氧条件下DCN(3 mg/L)显著下调HCT116细胞HIF-1α/CD133/TIMP-2蛋白的表达(P0.01),而对CD133 mRNA的表达无明显影响。结论DCN抑制结直肠腺癌细胞HCT116体外侵袭能力,在常氧和低氧条件下可能通过不同机制发挥作用。     

卒中后抑郁模型大鼠与miR-137抑制下的Grin2A表达

背景：卒中后抑郁是脑血管病后最常见的心理行为障碍并发症,其发病机制目前尚未明确。目前研究表明,microRNA与神经发生和突触形成有关,可能在精神疾病中扮演至关重要的作用。 目的：分析卒中后抑郁大鼠模型脑内和外周血中的miR-137的表达以及其对模型行为学的影响。 方法：将36只大鼠分为6组,每组各6只。对照组不做任何处理,卒中后抑郁组大鼠经大脑中动脉阻塞后慢性温和刺激建立卒中后抑郁模型,agomir-137组、agomir-NC组、agomir-137+Grin2A组和agomir-137+vector组大鼠在建立卒中后抑郁模型的基础上分别给予脑室内注射agomir-137、agomir-NC、agomir-137和Grin2A过表达质粒以及agomir-137和空白质粒。 结果与结论：实时定量PCR检测显示卒中后抑郁模型大鼠脑内和外周血中miR-137表达水平均明显低于对照组正常大鼠。行为学结果显示,在脑缺血第3周,agomir-137组大鼠垂直得分以及水平得分均显著高于agomir- NC组大鼠以及卒中后抑郁组大鼠。糖水消耗实验结果显示,在脑缺血后第2周末起,agomir-137组大鼠糖水消耗百分比即显著高于agomir-NC组大鼠以及卒中后抑郁组大鼠。进一步研究发现,miR-137可以与Grin2A的3’UTR端结合,抑制Grin2A mRNA的翻译从而下调其蛋白的表达。并且在卒中后抑郁大鼠模型的脑内过表达Grin2A基因后,miR-137抗卒中后抑郁的作用被显著减弱。提示miR-137可通过与Grin2A mRNA结合抑制其蛋白表达,从而发挥抗卒中后抑郁的作用,为卒中后抑郁提供新的临床治疗靶点。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

替吉奥联合塞来昔布治疗晚期胃癌疗效观察

目的评价替吉奥联合塞来昔布治疗晚期胃癌的疗效、不良反应,以及其对血管内皮生长因子(VEGF)和免疫功能的影响。方法 93例晚期胃癌患者随机分为2组,观察组48例接受替吉奥联合塞来昔布治疗,对照组45例接受单药替吉奥治疗。比较2组患者疗效、不良反应、VEGF水平及免疫功能。结果观察组和对照组患者治疗有效率分别为29.2%和26.7%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者疾病控制率(81.3%)显著高于对照组(68.9%)(P<0.05)。观察组患者临床受益率(83.3%)显著高于对照组(55.6%)(P<0.05)。2组患者常见不良反应为骨髓抑制、恶心和呕吐、腹泻、乏力、色素沉着、皮疹等,多为Ⅰ~Ⅱ级,不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者化学治疗后VEGF水平治疗前和对照组治疗后(P<0.05)。2组患者化学治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均较化学治疗前显著升高(P<0.05),且化学治疗后观察组患者显著高于对照组(P<0.05)。结论替吉奥联合塞来昔布治疗晚期胃癌安全、有效,并可改善患者机体免疫功能,且患者耐受性良好。