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对黑龙江省75个行政村的16455户农村家庭厕所和150个公共厕所及粪便处理现状调查统计结果表明,农村户厕普及率为97.4%,户厕硬件合格率为20.3%;卫生厕所普及率为11.8%;卫生达标户厕普及率为11.1%。农户粪便无害化处理率为8.1%。公共厕所硬件合格率为48.7%;卫生合格公厕合格率为29.3%;卫生达标公厕合格率为27.3%。同时分析了农村厕所发展现状,提出了农村当前改厕工作存在的问题和今后发展对策建议,为各级政府部门制订农村改厕粪管对策措施提供科学依据。 相似文献
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目的构建针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探究该载体表达的shRNA对HSV-2的抑制作用。方法重组表达载体通过脂质体转染法转染HEK293细胞,并接种HSV-2,48h后,实时荧光定量RT-PCR检测mRNA转录情况,Western blot检测ICP4蛋白的表达情况,终点滴定法测定病毒的滴度。结果与对照组相比,干扰组对mRNA抑制率为71%,使蛋白表达减少71.81%,并且病毒滴度也明显降低(P<0.05)。结论构建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重组质粒表达载体能在体外细胞水平上干扰HSV-2 ICP4的基因表达,抑制HSV-2在细胞中复制。 相似文献
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背景:解旋酶-引发酶复合体是Ⅱ型单纯疱疹病毒进行复制的必需基因,UL5基因为Ⅱ型单纯疱疹病毒解旋酶-引发酶复合体的组成单位之一。
目的:应用RNA干扰技术分析特异性小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因的干扰作用。
方法:以Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因为靶目标,设计、合成5对特异性小干扰RNA。通过LipofeCtamine 2000脂质体将特异性小干扰RNA转染HEK293细胞。48 h后行荧光定量RT-PCR检测UL5基因转录水平,终点滴定法测定干扰后病毒滴度,观察其干扰效果。
结果与结论:小干扰RNA成功转染入细胞内。荧光定量RT-PCR结果显示,siRNA 722、siRNA 2 394、siRNA 2 513和siRNA 2 627均可不同程度降低靶mRNA表达,病毒滴度检测结果显示siRNA 722、siRNA 2 394、siRNA 2 513和siRNA 2 627均可不同程度降低上清液中病毒感染滴度,阴性对照组和siRNA 374对病毒感染滴度无影响。针对UL5基因的有效小干扰RNA可以特异性降低Ⅱ型单纯疱疹病毒的复制水平。 相似文献
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目的 研究泛素连接酶Parkin在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾组织中的表达规律及与肾小管间质损伤的关系.方法 纳入2015-2016年我院收治的40例经肾活检确诊为2型DN患者,并取10例肾肿瘤切除后远端正常肾组织为对照组.采用免疫组化检测不同DN间质损伤评分肾组织的Parkin表达水平,并与临床指标、肾组织病理损伤进行相关性分析.免疫荧光共染检测肾小管Parkin的表达分别与肾间质损伤因子IL-6、TGF-β的表达及间质纤维化标志Col-Ⅳ的表达的关系.结果 Parkin主要在肾小管上皮细胞细胞质中表达,并随着DN肾小管间质损伤评分的加重而逐渐减少.Parkin表达与肾脏结构损伤(肾小球硬化、肾小管萎缩与间质纤维化、肾间质炎症)评分呈显著负相关(P<0.01),与肾脏功能损伤指标[尿蛋白定量、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿素氮、血清胱抑素C、血肌酐]呈负相关关系(P<0.01),与肾小球滤过率呈正相关关系(P<0.05).肾组织Parkin阳性肾小管细胞并不表达促炎因子IL-6、促纤维化因子TGF-β及Col-Ⅳ.结论 Parkin表达降低与DN肾间质损伤密切相关. 相似文献
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目的探讨人脑原代微血管周细胞(HBVPs)和人肾脏原代微血管周细胞(HRVPs)差异表达基因及其对脑微血管周细胞迁移和增殖功能的影响。方法利用RNA-seq检测对HBVPs和HRVPs进行转录组测序,qPCR及Western blot检测HAND2 mRNA及蛋白水平,构建HAND2基因的sh-RNA下调脑微血管周细胞HAND2表达,分别利用CCK-8检测HBVPs增殖活性和Transwell小室迁移实验检测迁移能力。结果 RNA-seq检测结果显示胚胎期HBVPs相对HRVPs有1 906个高表达基因,进一步的聚类分析发现这些基因可显著地聚类为4类功能富集的亚群;与血管发育密切相关的第Ⅱ群中HAND2在HBVPs中显著高表达(lg2~(FoldChange)=11.93,P0.05)。此外,qPCR和/或Western blot检测发现在小鼠胚胎第10.5天HAND2表达量较高,在第14.5天时最高,出生后几乎不表达(P0.05),并且HAND2主要表达在HBVPs(P0.05)。当sh-RNA下调HBVPs的HAND2表达后,发现其在24 h时迁移能力增强(P0.05),48 h和72 h时增殖活性显著增加(P0.05)。结论 HAND2对胚胎脑微血管发育和成熟期周细胞的增殖和迁移能力具有重要的调控作用。 相似文献
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背景:解旋酶-引发酶复合体是Ⅱ型单纯疱疹病毒进行复制的必需基因,UL5基因为Ⅱ型单纯疱疹病毒解旋酶-引发酶复合体的组成单位之一。目的:应用RNA干扰技术分析特异性小干扰RNA对Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因的干扰作用。方法:以Ⅱ型单纯疱疹病毒UL5基因为靶目标,设计、合成5对特异性小干扰RNA。通过LipofeCtamine 2000脂质体将特异性小干扰RNA转染HEK293细胞。48h后行荧光定量RT-PCR检测UL5基因转录水平,终点滴定法测定干扰后病毒滴度,观察其干扰效果。结果与结论:小干扰RNA成功转染入细胞内。荧光定量RT-PCR结果显示,siRNA722、siRNA2394、siRNA2513和siRNA2627均可不同程度降低靶mRNA表达,病毒滴度检测结果显示siRNA722、siRNA2394、siRNA2513和siRNA2627均可不同程度降低上清液中病毒感染滴度,阴性对照组和siRNA374对病毒感染滴度无影响。针对UL5基因的有效小干扰RNA可以特异性降低Ⅱ型单纯疱疹病毒的复制水平。 相似文献
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