不同培养基中耐药株及标准株白念珠菌生物膜法尼醇分泌的比较研究

目的 比较不同培养基中白念珠菌耐药株及标准株生物膜法尼醇分泌量的差异,了解生物膜各时相法尼醇分泌变化趋势,探讨耐药株法尼醇产生的特点。方法 用氟康唑诱导形成白念珠菌耐药株。将白念珠菌标准株及耐药株分别接种到RPMI 1640、酵母浸出粉蛋白胨葡萄糖（YPD）、无氨基酵母氮源（YNB） + 0.5%葡萄糖（Glu）和RPMI 1640 + 10%胎牛血清（FCS）4种培养基中培养,构建白念珠菌生物膜。倒置显微镜下观察培养24 h时白念珠菌生物膜形态,气相色谱-质谱联用（GC/MS）法检测培养1.5、3、6、12、24、36、48 h法尼醇分泌量。结果 在相同培养基中,耐药株及标准株生物膜形态没有明显差异,但不同培养基中生物膜形态各不相同。三因素重复测量方差分析显示,白念珠菌生物膜法尼醇的分泌有随时间变化的趋势（F = 70.628,P < 0.001）,耐药株和标准株生物膜形成过程中,法尼醇分泌量在RPMI 1640、YPD及YNB + 0.5% Glu培养基中均先逐渐增加,在生物膜形成后期至成熟期达到高峰值,随后降低。两种菌株在各培养基中法尼醇浓度达到高峰时间不同。两种菌株分泌法尼醇浓度在RPMI 1640 + 10% FCS培养基中均在12 ~ 48 h呈现缓慢上升趋势。培养基不同会影响法尼醇的分泌（F = 176.665,P < 0.001）,标准株及耐药株生物膜法尼醇分泌量在YNB + 0.5% Glu培养基中较高。此外,在RPMI 1640培养基（36 h：1.157 ± 0.064比0.250 ± 0.075,P < 0.05）及YPD培养基（6 h：0.262 ± 0.036比0.055 ± 0.062;12 h：0.730 ± 0.030比0.482 ± 0.024;均P < 0.05）中耐药株生物膜法尼醇分泌量显著高于标准株,但在YNB + 0.5% Glu培养基中（36 h）标准株法尼醇分泌量显著高于耐药株（2.950 ± 0.677比0.523 ± 0.266,P = 0.020）。结论 培养基不同可影响白念珠菌生物膜法尼醇的分泌,且耐药株与标准株之间法尼醇分泌有一定差异。     

白色念珠菌人工诱导耐药模型的建立及鉴定方法的研究

目的：利用氟康唑人工诱导构建白色念珠菌耐药模型。方法：采用梯度浓度递增法体外氟康唑诱导白色念珠菌耐药株,采用KONT真菌显色MIC药敏系统以及药敏纸片扩散法两种方法对构建形成的耐药菌株进行检测。结果：氟康唑人工诱导白色念珠菌耐药株构建形成,经微量稀释法鉴定最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）≥64μg/ml。KONT真菌显色MIC药敏系统及药敏纸片扩散法判定结果符合率达95%,P〉0.05,无统计学差异。结论：采用梯度浓度递增法体外诱导白色念珠菌耐药模型可行,且KONT真菌显色MIC药敏系统与药敏纸片扩散法对耐药株的鉴定结果一致性较好。     

白色念珠菌人工诱导耐药模型的建立及鉴定方法的研究

目的:利用氟康唑人工诱导构建白色念珠菌耐药模型.方法:采用梯度浓度递增法体外氟康唑诱导白色念珠菌耐药株,采用KONT真菌显色MIC药敏系统以及药敏纸片扩散法两种方法对构建形成的耐药菌株进行检测.结果:氟康唑人工诱导白色念珠菌耐药株构建形成,经微量稀释法鉴定最低抑菌浓度(minimal inhibitory concen...     

BGL2和XOG1与白念珠菌生物被膜耐药性的研究

目的:研究白念珠菌生物被膜耐药性与BGL2和XOG1基因表达之间的关联。方法:利用浓度梯度递增法诱导构建白念珠菌氟康唑耐药株,采用KONT真菌显色MIC药敏系统鉴定耐药株模型。构建耐药株和对照株生物被膜,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测白念珠菌耐药株和对照株生物被膜细胞中葡聚糖相关基因BGL2和XOG1,并比较耐药株和对照株中BGL2和XOG1表达的差异。结果:KONT真菌显色MIC药敏系统证实耐药株最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)≥128μg/ml。与对照株相比,耐药株XOG1的表达明显降低(P<0.05),BGL2的表达则没有明显差异。结论:葡聚糖相关基因XOG1与白念珠菌生物被膜耐药性相关。     

Farnesol对变形链球菌脱矿作用的体外研究

目的 研究Farnesol（法尼醇）对变形链球菌脱矿作用的影响。方法 BHI培养变形链球菌,将常规预备好的牙釉质切片放置于菌悬液中。实验组分别加入Farnesol浓度为0、50、100、200 μmol/L,对照组中加入无菌去离子水。采用原子吸收分光光度法检测不同时间点（24、48及72 h）菌悬液中钙离子的浓度。结果 随着Farnesol浓度的递增,菌悬液中钙离子浓度逐渐降低,当Farnesol浓度为200 μmol/L时菌悬液中钙离子的浓度与其余3组相比有显著性差异,实验组与对照组相比也有显著性差异（P<0.05）。结论 Farnesol可抑制变形链球菌对牙釉质的脱矿作用。     

内源性Farnesol对变异链球菌脱矿作用的研究

[摘要] 目的 观察内源性Farnesol处理变异链球菌后牙釉质脱矿的变化。方法 放置牙釉质切片于培养皿中,实验分5组,前3组加入变异链球菌菌悬液的同时分别添加去离子水、白色念珠菌24h上清、白色念珠菌菌悬液,第四组加入白色念珠菌菌悬液（实验组）,去离子水组为空白对照组。采用原子吸收分光光度法检测不同时间点（24、48、72h）菌悬液中钙离子的浓度。 结果 加入白色念珠菌24 h上清组钙离子的浓度在24、48、72h分别测得（80.26±1.63）、（81.14±1.24）、（78.31±0.76）μg/ml,明显低于其它变异链球菌组,实验组与对照组相比也有显著性差(P<0.05)。变异链球菌作用牙釉质的脱矿过程受到白色念珠菌分泌的Farnesol的调控,其脱矿作用受到明显的抑制。结论 内源性Farnesol可抑制变异链球菌对牙釉质的脱矿作用。     

不同培养基对白念珠菌生物被膜产生法尼醇的影响

目的:检测不同培养基对白念珠菌生物被膜产生法尼醇的影响。方法:白念珠菌标准株SC5314分别接种到含有RP-MI1640、YPD、RPMI1640+10%胎牛血清(fetal calf serum,FCS)培养基的培养皿中,形成白念珠菌生物被膜。在接种1.5～48h内,使用气相色谱-质谱联用法检测法尼醇产生的情况。结果:在RPMI1640、YPD培养基中,法尼醇分泌量随生物被膜的成熟而逐渐增加,在生物被膜形成后期至成熟期达到高峰;在RPMI1640+10%FCS培养基中,法尼醇的产生在48h内呈增长趋势。12h时,YPD培养基中法尼醇的分泌量高于其它两组(P<0.05);48h时,RPMI1640+10%FCS培养基中法尼醇分泌量最高(P<0.05)。结论:白念珠菌生物被膜法尼醇分泌量与培养基种类存在相关性。