一个纤维蛋白原γ链g．7590G〉T杂合突变导致遗传性低纤维蛋白原血症家系的分析CSCD

目的对一个遗传性低纤维蛋白原血症家系进行基因突变分析,并探讨其发病的分子机制。方法采集先证者及其家系成员（3代共9人）的外周血样,用自动化血凝仪分析凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）和凝血酶时间（thrombin time,TT）;用凝血酶凝固法（Clauss法）与免疫比浊法分别测定血浆纤维蛋白原的活性（fibrinogen activity,Fg∶C）和抗原水平（fibrinogen antigen,Fg∶Ag）;用PCR扩增纤维蛋白原FGA、FGB和FGG基因的所有外显子及其侧翼序列,对PCR产物进行纯化后直接测序;用Swiss软件对突变蛋白进行预测。结果先证者APTT、PT和TT均延长,Fg∶C（0.69 g/L）和Fg∶Ag（0.72 g/L）明显降低;其母亲、外祖母Fg∶C分别为0.99 g/L和0.83g/L,Fg∶Ag为1.02 g/L和0.87 g/L,均有不同程度的降低。其他家系成员的凝血指标均在正常范围。先证者FGG基因第8外显子存在7590位置的G〉T杂合突变,导致纤维蛋白原D结构域的313位丝氨酸突变为异亮氨酸（Ser313Ile）;其母亲和外祖母亦为Ser313Ile杂合子,其他家系成员则为野生型。模型分析显示Ser313突变为Ile后,同Asn319、Asp320之间的氢键消失,可能影响钙离子的正常结合。此外,该突变导致中性非极性的Ser变成了非极性、疏水性的Ile,使侧链变长,可能影响纤维蛋白原的折叠、构象及稳定性,导致血浆纤维蛋白原水平降低。结论纤维蛋白原γ链Ser313Ile的杂合突变是引起该家系遗传性低纤维蛋白原血症的原因。     

大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型及毒力因子相关性研究

目的分析温州医科大学附属第一医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum BetaLactamase,ESBLs)大肠埃希菌耐药情况,研究大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的不同基因型与所含的毒力因子的关系。方法普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测不同标本来源大肠埃希菌的毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra、iutA、aer、fimH、hly、cnf1、kpsMTII、fyuA;纸片扩散确证法检测超广谱β-内酰胺酶,PCR方法检测ESBLs不同基因型的分布情况。结果产ESBLs大肠埃希菌株中,毒力因子iutA、fyuA的检出率较高,均50%;毒力因子fimH、aer的检出率为20%~40%,而毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra和kpsMTII的检出率均较低20%;经χ2检验产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的毒力因子分布率差异均无统计学意义(P0.5)。92株产ESBLs大肠埃希菌中,毒力因子papC在CTX-M-9群中的阳性率高于TEM群和CTX-M-1群,差异有统计学意义(P0.05);毒力因子aer在CTX-M-1群中的阳性率高于TEM群和CTX-M-9群,差异有统计学意义(P0.05)。结论各种毒力因子检出率与细菌是否产ESBLs无相关性。但ESBLs阳性菌株中不同的基因型与某些毒力因子的存在与否存在一定关系,毒力因子与产CTX-M酶大肠埃希菌耐药情况可能有关。     

一个遗传性凝血因子Ⅹ缺陷症家系的临床特征与基因突变分析

目的 探讨一个遗传性凝血因子Ⅹ（FⅩ）缺陷症家系的临床特征与基因突变关系。方法 调查家系，采用Sanger测序法分析先证者F10基因8个外显子及其侧翼序列，并对家系成员相同突变位点进行检测。通过凝血酶生成试验评估家系成员FⅩ的促凝活性。ClustalX-2.1-win和在线生物信息学软件（PolyPhen-2、SIFT和Mutation Taster）分别用于分析突变位点氨基酸的保守性和致病性；Swiss-PdbViewer软件用于蛋白质空间结构和突变氨基酸相互作用分析。结果 先证者FⅩ活性（FⅩ:C）和FⅩ抗原（FⅩ:Ag）分别降低至7%和14%（参考范围分别为：90%～114%和90%～110%）；先证者平素无自发性出血现象，外伤后也无明显出血异常。基因测序发现先证者F10基因第4号外显子存在c.361T>C(p.Cys121Arg)杂合错义突变及第8号外显子存在c.979C>T(p.Arg327Trp)杂合错义突变；其母亲和女儿为p.Arg327Trp的杂合子，二姐和儿子为p.Cys121Arg的杂合子。先证者凝血酶生成潜力比值和峰高比值下降，而其延迟时间和达峰时间延...     

温州地区女性人乳头瘤病毒的感染情况及亚型分布特征分析

目的:了解本地区女性HPV的感染情况及型别分布,以助于HPV疫苗的研制和应用。方法:采用快速分子导流杂交分型技术对4314例女性HPV的感染情况及型别分布进行分析。结果:HPV感染阳性率为41.68%(1798/4314)。10组年龄组中筛查人群以31岁～50岁的妇女为主,占72.02%(3107/4314);HPV阳性率以21岁～25岁(56.86%)及≥60岁(64.39%)的年龄组较高。各年龄组均以单重感染为主,其次为双重感染。在单重感染下,高危亚型均以HPV16、52、58为主,其次为HPV18、33;低危亚型以HPV6、11为主;常见亚型以HPV53、cp8304(81)为主。结论:温州地区女性HPV感染以单重感染为主,高危亚型优势型别为HPV16、52、58,低危亚型优势型别为HPV6、11,常见亚型优势型别为HPV53、cp8304(81)。     

原发性肝癌患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ和血管内皮生长因子的检测及意义

目的：探讨原发性肝癌（PHC）患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及意义。方法：分别采用放射免疫分析法及ELISA法检测63例PHC患者（PHC组）、56例肝硬化患者（肝硬化组1和60例正常对照者（对照组）血清IGF-Ⅱ和VEGF含量，并对PHC患者治疗前后的血清IGF-Ⅱ和VEGF含量进行相关性分析。结果：PHC组患者血清IGF-Ⅱ和VEGF的含量显著高于肝硬化组和对照组（P〈0．05）；肝硬化组血清1GF-Ⅱ和VEGF的含量显著高于对照组（P〈0．05）。经介入治疗后6个月随访，12例复发者血清IGF-Ⅱ和VEGF含量显著高于51侧未复发者（P〈0．05）。治疗前后IGF-Ⅱ与VEGF均呈显著正相关（r=0．43，0．39，P〈0．05）。结论：IGF-Ⅱ与VEGF可作为肿瘤标记物，两者联合检测有助于提高对PHC的检出率，动态检测二者的水平可为临床肝癌的综合治疗及预后判定提供依据。[著者文摘]     

miR-1246在肝癌血清中的表达及对肝癌HepG2细胞生物学功能的影响

  目的  探讨miR-1246在肝癌患者血清中的表达及其对HepG2细胞生物学功能的影响。  方法  应用荧光定量PCR检测miR-1246在正常对照者和肝癌患者血清中的表达;将miR-1246 mimics和NC mimics分别转染至HepG2细胞,采用Transwell小室法、划痕实验和细胞克隆形成实验检测miR-1246对HepG2细胞生物学功能的影响,荧光定量PCR检测NFE2L3、Vimentin、GAS1基因的表达改变。  结果  miR-1246在正常对照者和肝癌患者血清中的表达量分别为1.079(0.740,1.534)、0.132(0.068,0.324),差异有统计学意义(P < 0.001);miR-1246 mimics转染HepG2细胞后,HepG2细胞穿过基质胶的细胞数为128.000±9.900, 较NC mimics组(251.500±24.749)明显减少(P=0.023),划痕48 h后HepG2细胞相对迁移率为(24.833±3.351)%,较NC mimics组(31.859±7.194)%明显减慢(P=0.046),Vimentin、GAS1、NFE2L3基因相对表达量分别为0.318±0.213、0.479±0.157、0.755±0.044,较NC mimics组(1.000±0.000)表达均明显下调(P=0.046、0.043、0.030)。  结论  肝癌患者血清中miR-1246表达下调;miR-1246可能通过下调Vimentin、GAS1、NFE2L3基因抑制HepG2细胞的侵袭、迁移能力。      

Logistic回归和ROC曲线分析多种肿瘤标志物在鉴别良恶性胸水中的应用价值

目的:应用Logistic回归和ROC曲线探讨癌胚抗原(CEA)、鳞癌抗原(SCC)、神经特异性烯醇化酶(NSE)和细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)在鉴别良恶性胸水中的应用价值。方法:应用化学发光微粒子免疫测定法和电化学发光免疫测定法对24例肺癌患者、32例良性肺部疾病患者的胸水标本进行4种肿瘤标志物测定,通过ROC曲线分析CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC及各种Logistic回归结果的ROC曲线下面积(AUC)值。结果:肺癌患者-良性肺部疾病患者胸水中,除SCC外其余3种肿瘤标志物差异均有显著性(P<0.05)。CEA的AUC要高于CYFRA21-1,而CYFRA21-1的AUC要高于NSE,NSE的AUC要高于SCC,而CEA、CYFRA21-1、NSE三者联合诊断的AUC要高于其中任意单一检查的AUC。结论:检测CEA、CYFRA21-1和NSE3种肿瘤标志物对诊断和鉴别诊断良、恶性肺部疾病有重要临床价值。作为一种统计手段,ROC分析中结合Logistic回归模型简单有效,适用于多指标联合诊断试验的分析评价。     

2310例女性泌尿生殖道支原体属的检出及药敏结果分析

目的了解女性泌尿生殖道不同浓度、不同类型支原体属感染情况及对抗菌药物的敏感性,为临床医师合理用药提供参考。方法采用支原体鉴定、药敏复合试剂条对2010年1-6月临床送检的2310份女性泌尿生殖道标本进行检测,统计分析支原体属检出情况及药敏结果。结果 2310份女性生殖道标本中,检出不同浓度、不同类型的支原体属共1575份,以解脲脲支原体(Uu)<104ccu/spec最多见,占47.0%,其次为Uu≥104ccu/spec,占30.5%;药物敏感试验中,8组不同浓度、类型的支原体感染药物敏感性不同。结论不同浓度、不同类型的支原体感染药物敏感性存在不同,应引起临床医师的注意,合理而有效地用药,减少药物耐药性的出现。     

脂肪肝患者血小板相关参数和血清脂质的变化分析

目的探讨脂肪肝患者血小板相关参数和血清脂质含量的变化。方法根据B超诊断结果,将242例高脂血症患者分为脂肪肝组(n=74)、脂肪肝倾向组(n=59)和肝无异常发现组(n=109)三组,及随机选择血脂水平正常者83例作为健康对照组。利用日本Olympus AU2700型全自动生化分析仪检测血三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)含量;利用Beckman Coulter Gen S全自动血液分析仪测定血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)及平均血小板体积分布宽度(PDW)。结果脂肪肝倾向组PLT明显高于脂肪肝组、肝无异常发现组及健康对照组,而MPV明显缩小(P<0.05),肝无异常组PDW明显高于健康对照组(P<0.05);脂肪肝、脂肪肝倾向及肝无异常发现三组TG、TC明显高于健康对照组,而HDL-C含量显著下降,且脂肪肝组HDL-C含量明显低于肝无异常发现组(P<0.05)。结论脂肪肝倾向可导致PLT相关参数变化,了解高脂血症患者PLT相关参数的变化,有助于临床判断脂肪肝的发展。     

高尿酸血症患者血小板及红细胞相关参数的变化分析

目的:探讨高尿酸血症(HUA)患者血小板及红细胞相关参数的变化.方法:选择175例HUA患者(男101例,女74例),按性别分组统计及根据尿酸(UA)水平分为轻、中、重度3组,另选健康体检者87例(男46例,女41例)作为正常对照组.检测血小板数量(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、红细胞数量(RBC)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞平均体积(MCV)及红细胞体积分布宽度(RDW),与正常对照组进行统计分析.结果:男女HUA组PLT明显高于各自正常对照组(P<0.05),而MPV明显降低(P<0.05),男性PDW明显低于正常对照组(P<0.05),女性PDW与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);同时随着血UA水平的增加PLT逐渐增多(P<0.05),而MPV逐渐降低(P<0.05).红细胞相关参数(RBC、Hb、MCV、RDW)与正常对照组比较差异均无显著性(P>0.05).结论:HUA可导致PLT增多,是机体血液处于血栓前状态的一大诱因.