鲢鱼小清蛋白的分离纯化及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗鲢鱼主要过敏原小清蛋白的单克隆抗体,并对其基本特性进行鉴定。方法:采用硫酸铵盐析、离子交换柱层析和凝胶过滤柱层析等方法纯化鲢鱼小清蛋白;以纯化的小清蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体;通过ELISA法确定抗体亚型;通过腹水诱生法大量制备单克隆抗体;以Protein G Sepharose亲和层析柱纯化制备的单克隆抗体;运用Western blot鉴定单克隆抗体的特异性;以ELISA法分析单克隆抗体的结合位点。结果:从100 g鲢鱼肌肉中可获得约30 mg高纯度小清蛋白;SDS-PAGE结果表明,得到的抗小清蛋白单克隆抗体(A4-C1)纯度较高,亚类为IgG1;Western blot结果显示,A4-C1只与鱼肉粗提物中的小清蛋白产生反应,特异性良好;ELISA分析表明,制备的抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体与商品化抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)的结合位点可能具有很大部分的重叠,或者存在较大的空间位阻效应。结论:研究中制备的杂交瘤细胞株能稳定分泌高特异性的抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体,可用于后续淡水鱼类小清蛋白检测方法的建立。     

双镜联合治疗肝外道结石的护理体会

近年来,随着微创技术的广泛开展,腹腔镜胆囊切除术（LC）已成为胆囊结石治疗的金标准,治疗性内镜逆行胰胆管造影（ERCP）也逐渐成为胆总管结石的常规治疗手段。在胆囊结石患者中,     

窦道伤口护理新见解

窦道是伤口处理难题,其处理方法也不胜枚举,全文介绍目前窦道护理的常用处理方法,并结合临床护理经验,提出见解,为临床窦道处理提供参考。     

浅谈静脉穿刺

静脉穿刺常选择四肢末梢充盈、弹性较好的血管,但是病人的胖瘦、体育锻炼情况、病情的轻重、脏器功能是否衰竭、有无脱水等身体状况都可对患者静脉条件造成影响,另外寒冷的天气室内气温也较低,可使病人末梢血管收缩、变硬而不利于穿刺。本文主要提供一些小经验,提高静脉穿刺成功率。     

Wnt信号通路与肿瘤侵袭转移的关系

近年来的研究发现，Wnt-β-catellin信号通路与肿瘤侵袭转移的相关事件如癌细胞的迁移粘附、细胞外基质的降解及肿瘤的血管生成密切相关。Wnt信号还能激活Wnt—Ca2^ 、Wnt—JNK等非正规通路，与人类肿瘤的侵袭转移也有一定关系。另外，Wnt通路还可通过与细胞内其他信号通路如K—ras、RTK及ILK介导的信号通路相互作用，在肿瘤侵袭转移过程中起重要作用。     

低位窦道伤口2例治疗经验及文献复习

随着伤口愈合理念由干性愈合向湿性愈合[1]转变，临床应用新型湿性敷料促进伤口愈合逐渐成为新的伤口治疗方法，对于存在潜行、窦道等空腔的伤口通常会选用填塞湿性敷料缓解炎症、填充肉芽组织、促进伤口愈合。但是，临床一些较深的体表及体腔窦道（特别是低位窦道）、潜行伤口往往因引力、体位等原因致渗出液大量积聚在窦道或潜行底部，使炎症无法得到有效控制，炎症蔓延、浸润更深、范围更大。一般医生会采取如负压、加压、切开等治疗方式，使窦道保持引流通畅。本文报道分别用切开引流和体位引流处理2例患者的经验，供大家参考。     

甲壳类动物4种过敏原的序列分析、抗原表位预测及三维结构建模

目的探明甲壳类动物各种过敏原之间是否存在相似性,以期深入研究甲壳类食品过敏原的构效关系。方法应用生物信息学方法,分析预测了甲壳类动物的4种过敏原—原肌球蛋白(TM)、精氨酸激酶(AK)、肌球蛋白轻链(MLC)和肌质钙结合蛋白(SCP)的二级结构、亲水性、可塑性、抗原性、表面可及性、线性抗原表位和三维结构等。结果 TM为超螺旋结构,而AK、MLC和SCP均为复合蛋白,含有较多的Turn和Coil结构;TM、AK、MLC和SCP 4种过敏原的亲水性区域均在60%以上,可塑性区域约为50%,抗原性区域均在60%以上。TM、AK、MLC和SCP分别有11、10、4和4个线性抗原表位。TM、AK、MLC和SCP的三维结构建模结果与相应的二级结构预测结果一致,基本能够反映此4种过敏原的空间构象。结论通过生物信息学方法分析,同时获得了甲壳类动物4种过敏原TM、AK、MLC和SCP的分子特征、抗原表位及部分三维结构,可望为进一步采用实验方法研究其构效关系奠定理论基础。     

锯缘青蟹原肌球蛋白的过敏动物模型研究

目的建立锯缘青蟹(Scylla serrata)原肌球蛋白(tropomyosin,TM)的食物过敏性小鼠模型,并对其致敏性进行评价。方法锯缘青蟹TM以灌胃方式刺激小鼠使其致敏,并对小鼠粪便组胺、血清IgE以及脾脏细胞IL-4、IL-13、IFN-λ等淋巴因子的水平进行检测。结果 TM组小鼠均出现了不同程度的过敏症状,其血清IgE的含量是阴性对照组(生理盐水)小鼠的2倍;TM组实验小鼠IL-4、IL-13、IFN-λ的水平分别为(17.508±2.189)pg/ml、(3.150±0.434)pg/ml、(15.056±1.974)pg/ml,粪便中组胺含量为6 244.651 nmol/l,与阴性对照组小鼠相比均有显著差异(P<0.05)。结论锯缘青蟹TM以灌胃方式刺激小鼠,TM组小鼠出现了不同程度的过敏症状,其粪便组胺、血清IgE以及脾脏细胞IL-4、IL-13、IFN-λ等淋巴因子的水平与阴性对照组小鼠相比均有显著差异(P<0.05),建立的TM过敏动物模型可望为蟹类过敏的诊断和免疫治疗提供技术依据。     

Wnt信号通路与肿瘤侵袭转移的关系

近年来的研究发现,Wnt-β-catenin信号通路与肿瘤侵袭转移的相关事件如癌细胞的迁移粘附、细胞外基质的降解及肿瘤的血管生成密切相关.Wnt信号还能激活Wnt-Ca2+、Wnt-JNK等非正规通路,与人类肿瘤的侵袭转移也有一定关系.另外,Wnt通路还可通过与细胞内其他信号通路如K-ras、RTK及ILK介导的信号通路相互作用,在肿瘤侵袭转移过程中起重要作用.