卒中后抑郁患者多巴胺代谢系统COMT和DAT基因多态性分析

目的 探讨多巴胺递质代谢相关蛋白儿茶酚氧位甲基转移酶(COMT)Val108/158Met、多巴胺转运体(DAT)40bp可变数目串联重复多态(VNTR)两位点基因多态性与卒中后抑郁(PSD)的关系.方法 选择南方医科大学珠江医院神经内科自2010年1月至2010年6月收治的PSD患者68例作为研究组,同期脑卒中后无抑郁患者91例作为对照组,利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析患者COMT Val108/158Met、DAT 40 bp VNTR位点的基因多态性.结果 COMT基因扩增产物分野生型(G/G)、突变纯合型(A/A)、杂合型(A/G)3种基因型,DAT基因扩增产物分7/7、9/7、10/7、10/9、10/10、11/10、11/11倍重复7种基因型;2组患者COMT等位基因、基因型分布比较差异均有统计学意义(x2=5.703,P=0.017;x2=6.489,P=0.039).研究组男性患者与对照组男性患者之间比较,COMT等位基因、基因型的分布差异均无统计学意义(P＞0.05);研究组女性患者与对照组女性患者之间比较,COMT等位基因、基因型的分布差异均有统计学意义(x2=4.610,P=0.032;x2=6.547,P=0.024);研究组与对照组患者DAT等位基因和基因型的总体分布、杂合度比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 COMT Val108/158Met基因多态性与PSD发生可能有相关性,而DAT40 bp VNTR基因多态性与PSD发生无明显相关性.

Abstract：

Objective To investigate the association of post-stroke depression (PSD) with gene polymorphisms of catechol-O-methyl transferase (COMT) Val1 08/158Met and dopamine transporter 40bp variable number of tandem repeats (VNTR) in dopamine metabolism system. Methods Sixty-eight patients with PSD and 91 patients only suffered from stroke, admitted to our hospital from January 2010to June 2010, were chosen; the gene polymorphisms ofCOMT Val108/158Met and DAT 40 bp VNTR were analyzed by using polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). Results The genotypes of COMT gene amplifications were wild type (G/G),homozygous mutant type (A/A) and heterozygous type (A/G); 7 repeated genotypes (7/7, 9/7, 10/7, 10/9,10/10, 11/10 and 11/11) were noted in the DA T gene amplifications; frequencies of COMT alleles and genotypes were significantly different between the 2 groups (x2=5.703, P=0.017;x2=6.489, P=0.039). The frequencies of COMT alleles and genotypes were significantly different between the 2 female groups (x2=4.610, P=0.032;x2=6.547, P=0.024), but no significant differences were found between the 2 male groups (P＞0.05). The frequencies and heterozygosity of DAT alleles and genotypes showed no obvious differences between the 2 groups (P＞0.05). Conclusion The gene polymorphism of COMT Val108/158Met may be associated with PSD, while that of DAT 40bp VNTR is not.     

IL-1β参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡的研究北大核心CSCD

目的白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌。IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程。本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡作用及其机制。方法设计并合成IL-1β的小干扰RNA(si-IL-1β),转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后并用BCG感染,采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中IL-1β的分泌水平,DCF法检测细胞内ROS水平,AnnexinV-FITC/碘化丙啶(propidine iodide,PI)双荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡相关因子Caspase3、Bad、Bax以及Mcl-1蛋白及其基因(mRNA)的表达。结果 BCG感染巨噬细胞24 h后,IL-1β表达水平极显著上调,并且呈时间梯度依赖性(P<0.01);同时,与对照相比,BCG感染后巨噬细胞存活率下降,约为33%,而凋亡率显著上调到58.56%(P<0.01),并且凋亡关键调控因子Caspase3、Bad、Bax的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01),而抑凋亡蛋白Mcl-1的表达水平显著下调(P<0.01),细胞内ROS富集(P<0.05),而si-IL-1β处理可显著逆转由BCG诱发的细胞凋亡、ROS含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等。结论 BCG可诱导细胞内IL-1β的表达;IL-1β通过上调促凋亡蛋白Bad、Bax表达,下调抑凋亡蛋白Mcl-1表达,上调细胞内ROS的表达并参与调控BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡。这为阐明IL-1β在BCG诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础。     

前庭性偏头痛患者血清5-HT、NO、MMP-9及CGRP的检测及临床意义

目的 探讨血清5-羟色胺(5-HT)、一氧化氮(NO)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及降钙素基因相关肽(CGRP)水平对前庭性偏头痛(VM)患者的临床意义.方法 选取2019年9月至2020年9月郑州大学附属洛阳中心医院收治的60例VM患者为研究组,60例健康体检人员为对照组.检测2组血清5-HT、NO、MMP-9及...     

不同部位高信号血管征与静脉溶栓后神经功能恶化的关系

目的 探讨脑梗死患者磁共振液体衰减反转恢复序列(FLAIR)成像高信号血管征(HVS)与静脉溶栓治疗后早期神经功能恶化(END)的关系.方法 回顾性分析郑州大学附属洛阳中心医院发病时间<4.5 h的急性前循环梗死患者,均符合静脉溶栓标准,并自愿接受阿替普酶(rt-PA)溶栓治疗,收集具有溶栓前和溶栓后24 h多模式磁共...     

重复经颅磁刺激联合卡巴拉汀治疗卒中后认知功能障碍患者的疗效评价

目的 研究重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)联合卡巴拉汀治疗卒中后认知功能障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)的效果.方法 选取洛阳市中心医院2019年3月-2020年3月PSCI患者124例进行前瞻性随机平行对照研究,随机数字表法分为单一组、联合组,各62例.单一组采用重酒石酸卡巴拉汀胶囊,联合组在单一组基础上采用rTMS治疗.比较两组疗效、治疗前、治疗8周后认知功能[蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MOCA)、洛文斯顿作业疗法认知评定量表(Loewenstein occupational therapy cognitive assessment,LOTCA)]、日常记忆能力[行为记忆量表(Rivermead behavioural memory test,RBMT评分)]、日常生活能力[Barthel指数(Barthel Index,BI)]、听觉事件相关电位(P300)检测(波幅、潜伏期)、神经功能[脑脊液β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid protein1-42,Aβ1-42)、t-tau蛋白、磷酸化Tau蛋白(p-Tau181)水平]及不良反应发生率.结果 联合组总有效率96.77％高于单一组83.87％ (P＜0.05);治疗8周后联合组MOCA、LOTCA评分高于单一组(P＜0.05);治疗8周后联合组RBMT评分、BI指数高于单一组(P＜0.05);治疗8周后联合组P300波幅大于单一组,潜伏期小于单一组(P＜0.05);治疗8周后联合组Aβ1-42水平高于单一组,t-tau、p-Tau181蛋白水平低于单一组(P＜0.05).结论 rTMS联合卡巴拉汀治疗PSCI疗效显著,能明显改善认知功能,提升日常记忆及生活能力,促进神经电生理恢复,并通过调节Aβ1-42、Tau蛋白等水平提升神经功能,且安全性高.     

品管圈在减少社区卫生服务中心不合理处方中的应用

目的提高门诊处方质量和患者用药安全性及合理性。方法在品管圈活动的基础上,加入第三方(区卫生局医政科)的力量。使第三方在品管圈开展活动中,协助分析影响处方质量的原因、提出对策并实施,最终由圈员与第三方共同予以效果确认。结果通过本次活动,设立了三个衡量指标,即区医疗质控指标、同城指标、圈能力指标;最后将不合理处方由改善前的5.9%下降到改善后的2.8%,大大提高了门诊处方质量。结论通过品管圈活动,降低了门诊不合理处方数量,同时增加了团队的责任心、自信心,增加了与医生沟通的能力。     

静脉泵控尼莫地平治疗高血压脑出血临床研究

目的探讨早期应用尼莫地平治疗急性高血压脑出血及控制继发性再出血的临床疗效,分析可能机制。方法将符合入组标准的82例急性高血压脑出血患者随机分为2组,实验组42例,应用尼莫地平注射液微量泵静脉泵入,共7d;对照组40例,应用20%甘露醇注射液静滴,2组其余基础治疗均相同。2组均在入院时、入院后1、3、7、21d行头颅CT检查,测量血肿体积、血肿周围水肿带体积,并给予神经功能缺损评分,入院时及28d后行生活自理能力量表评分,并进行比较。结果2组在血肿体积、血肿周围水肿带体积、神经功能缺失评分、生活自理能力量表评分等方面差异均有统计学意义(P均0.05),实验组疗效显著优于对照组。结论脑出血急性期给予尼莫地平降压止血治疗,不仅可以降低血肿扩大及再出血的发生风险,减轻血肿周围水肿带,且可以降低致残率,改善临床转归。     

JAK/STAT信号转导通路在IGF-1抑制左旋多巴诱导的多巴胺能神经元凋亡中的作用

目的 探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)通过JAK/STAT信号转导通路对左旋多巴诱导的多巴胺能神经元凋亡的保护作用.方法 应用100μg/L β神经生长因子(β-NGF)将体外常规培养的PC12细胞诱导分化为多巴胺能神经元.MTT比色法筛选左旋多巴的神经损伤浓度和IGF-1的神经保护浓度(150μmol/L、100nmol/L),实验分为4组:(1)左旋多巴+IGF-1组;(2)左旋多巴+IGF-1+AG490组,AG490(10 μmol/L)在给予左旋多巴和IGF-1前20 min加人;(3)左旋多巴组;(4)对照组.Western blotting检测4组细胞P-JAK2、P-STAT3蛋白表达,Hoechst33258染色和流式细胞仪分别检测细胞凋亡和凋亡率.结果 Westen blotting法检测显示对照组和左旋多巴组P-JAK2、P-STAT3蛋白表达阴性,而左旋多巴+IGF-1组和左旋多巴+IGF-1+AG490组表达阳性.左旋多巴+IGF.1+AG490组P.JAK2、P.STAT3表达强度低于左旋多巴+IGF.1组,差异有统计学意义(P<0.05):Hoechst33258染色结果显示左旋多巴组细胞核固缩及碎裂最明显,较多凋亡小体形成,而左旋多巴+IGF-1组与左旋多巴+IGF-1+AG490组仅有少量凋亡小体形成.流式细胞仪检测显示4组多巴胺能神经元凋亡率不同,差异有统计学意义(F=180.991,P=0.000);与对照组比较,另3组细胞凋亡率均增高,差异有统计学意义(P<0.05);其中左旋多巴组细胞凋亡率最高,其次为左旋多巴+IGF-1+AG490组、左旋多巴+IGF-1组.结论 大剂量左旋多巴对多巴胺能神经元具有毒性作用.IGF-1对左旋多巴诱导的神经细胞毒性作用呈保护作用,JAK2/STAT3信号转导通路参与了此过程.

Abstract：

Objective To explore the protective effect of insulin-like growth factor 1 (IGF-1) on apoptosis of dopaminergic neurons induced by L-dopa via JAK/STAT signaling pathway. Methods PC12 cells were induced to differentiate into dopaminergic neurons with 100 μg/L β-NGF; MTT assay was employed to identify the changes in the viability of PC12 cells following L-dopa treatment at 0, 10,20, 50, 100, 150 and 200 μmol/L, and the different concentrations of IGF-1 at 0, 10, 25, 50 and 100 nmol/L with the same concentration of L-dopa (150 μmol/L); Western blotting was used to detect the levels of P-JAK2/P-STAT3 in PC12 cells treated with PBS (controls), L-dopa, L-dopa+IGF-1 and L-dopa+IGF-1+AG490 for 24 h, and then the apoptosis rate was assessed by flow cytometry and Hchest33258 staining. Results Western blotting showed that the expressions of P-JAK2 and P-STAT3 were detected in the L-dopa+IGF-1 and L-dopa+IGF-1+AG490 treatment groups but not in the control group or L-dopa treatment group; the expression of P-STAT3 in the L-dopa+IGF-1+AG490 treatment group was obviously lower than that in the L-dopa+IGF-1 treatment group (P<0.05). Hchest33258 staining indicated that L-dopa treatment group had the most obvious karyopyknosis and karyorrhexis,much more apoptotic bodies than the L-dopa+IGF-1 and L-dopa+IGF-1+AG490 treatment groups. Flow cytometry showed that the apoptosis rate was significantly different among the 4 groups (F=180.991,P=0.000): as compared with the control group, the other 3 groups had a higher apoptosis rate (P<0.05);L-dopa treatment group (38.13 ±2.54 %) enjoyed the highest level, followed by L-dopa+IGF-1 +AG490treatment group (25.60±1.30 %) and L-dopa+IGF-1 treatment group (20.17±1.54 %). Conclusion L-dopa has toxic effect on PC12 cells; IGF-1 could protect the PC12 cells from the neurotoxic effect of L-dopa and JAK2/STAT3 signaling pathway is activated in this procedure.     

磁共振弥散张量成像对基底节区梗死后抑郁状况的评估

目的 利用磁共振弥散张量成像(DTI)技术研究基底节区梗死患者相关解剖结构的异常改变,评估卒中后抑郁( PSD)的状况.方法 选取基底节区梗死患者,依汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)评分分为PSD组(n=7)、对照组(n=19),完成NIHSS评分.后行DTI检测患者双侧尾状核、苍白球、壳核和背侧丘脑的各向异性(FA)值、表观弥散系数( ADC)值、神经纤维数量.结果 PSD组NIHSS评分(6.29±3.45)明显高于对照组(3.95±1.90;t=2.219,P=0.036),各神经核团的DTI数据与对照组比较差异无统计学意义,左侧壳核的FA值(0.37±0.03)明显低于右侧(0.40±0.02;t =2.243,P=0.045).经Spearman相关分析,卒中后患者的HAMD评分与NIHSS评分呈正相关(r=0.464,P=0.017),与左侧苍白球FA值(r=- 0.563,P=0.005)、右侧苍白球FA值(r=-0.416,P=0.035)、左侧壳核FA值(r=- 0.428,P=0.029)呈负相关.结论 严重的神经功能缺损与缺血性PSD的发生有关,而抑郁程度与NIHSS评分增高、双侧苍白球和左侧壳核的FA值下降有关.相关信息有助于我们对基底节区梗死患者PSD的状况进行评估.