小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒

通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因（CR2）进行定点突变,然后将野生型和突变型小鼠CR2/1（MCR2/1）及人CR2（hCR2)用电穿孔方法导入小鼠SP2/0进行表达,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染,EBER-1杂交结果显示,仅转染hCR2和突变型MCR2（mtMCR2)的SP2/0细胞感染了EB病毒,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。     

稳定表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1基因的鼻咽癌细胞系的建立

目的:建立稳定表达鼻咽癌(NPC)来源潜伏膜蛋白1(LMP1)的鼻咽癌细胞系。方法:利用基因重组技术构建NPC来源LMP1的一般性真核表达载体及上皮特异性表达载体,并将其转染鼻咽癌细胞系CNE-2,用PCR、RT-PCR及蛋白印迹等检测N-LMP1在CNE-2中的整合和表达。结果:①成功构建了N-LMP1的一般性和上皮特异性表达载体。②N-LMP1基因在CNE-2细胞中获得了正确表达。结论:成功建立了稳定表达NPC来源LMP1的鼻咽癌细胞系,为进一步研究LMP1在鼻咽癌细胞中的作用机制奠定基础。     

鼻咽癌中生长因子/细胞因子mRNA差异表达分析

目的：考察鼻咽癌中差异表达的生长因子／细胞因子,推测鼻咽癌发生中可能发生的免疫机制。方法：采用ｃＤＮＡ阵列杂交技术,同时对９８个已知与肿瘤相关的生长因子／细胞因子在鼻咽癌、正常因组织及其他几种头颈部鳞癌的ｍＲＮＡ表达水平进行筛查,筛选出在鼻呖癌中差异表达的生长因子／细胞因子基因。结果：在鼻咽癌中上调的基因包括：早期生长应答蛋白１,肝癌来源生长因子,白介素１β,血小板来源生长因子Ａ链,干细胞因子,畸     

人多聚免疫球蛋白受体转基因鼠的建立

目的构建携带有多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的转基因鼠,使其能以近乎自然的状态感染EBV,观察EBV在鼻咽部病变过程中的作用。方法采用角质上皮特异性启动子ED-L2调控的pIgR基因,用显微注射方法将其导入受精卵中,使该基因能在F0代转基因鼠鼻咽部特异性表达。结果PCR检测F0代pIgR基因阳性率达37.5%(6/16),Southern杂交F0代pIgR基因阳性率为12.5%(2/16)。结论表达多聚免疫球蛋白受体的转基因动物有望成为研究EBV病毒致病机制的一种新的动物模型。     

两种不同来源 LMP1致瘤性的比较研究

目的：比较鼻咽癌来源的LMP1基因（N-LMP1）和标准株B95.8来源的LMP1基因（B-LMP1）的致瘤性。方法：将带有N-LMP1及B-LMP1的两种真核表达载体分别转染小鼠成纤维细胞系NIH3T3，获得稳定表达LMP1的细胞，通过软琼脂集落形成试验及裸鼠致瘤试验比较两种细胞的致瘤性。结果：获得稳定表达N-LMP1和B-LMP1的两种NIH3T3细胞；NIH3T3/N-LMP1的集落形成率和成瘤率均明显高于NIH3T3/B-LMP1。结论：N-LMP1的致瘤性强于B-LMP1，进一步确证了中国鼻咽癌来源的EBVLMP1比一般的EBV LMP1具有更强的致瘤性，也为在中国鼻咽癌流行区可能存在一株特殊的EBV株系提供了一定的依据。     

小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒

通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1杂交结果显示 ,仅转染hCR2和突变型MCR2 (mtMCR2 )的SP2 / 0细胞感染了EB病毒 ,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。     

血小板生成素及其受体的信号传导

血小板生成素具有促进巨核细胞增殖、成熟、产生血小板的功能。为探讨其作用的分子机制，本文综述了近年来血小板生成素基因的结构、功能，对血小板生成素受体及ＪＡＫ－ＳＴＡＴ信号传导途径的作用研究中的新进展。     

WST—1法用于抗恶性肿瘤药物筛选的实验研究

ＷＳＴ－１是一种新型的四唑盐。它生成水溶性的有色物质。比色时不需额外的溶解步骤。在本研究中我们将ＷＳＴ，１用于胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１的抗癌药物筛选试验。我们的研究表明：①最适细胞接种数０．５×１０４－１×１０４／孔。②．ＷＳＴ－１显色法的最佳波长４５０ｎｍ。③．ＷＳＴ－１显色法重复性良好，组内变异系数为３．５％～８．７％。④ＷＳＴ－１法比ＭＴＴ法敏感。⑤．ＷＳＴ－１法比ＭＴＴ法简便。⑥．ＷＳＴ－１法用于抗癌药物筛选结果与ＭＴＴ法具有良好的符合性。结果表明，ＷＳＴ－１法具有快速、简便的特点。是体外瘤株筛选抗癌新药和临床肿瘤药敏试验的可靠方法。