睾丸组织中的TSP50启动子甲基化差异的研究

目的:检测不同组织中TSP50启动子区域的甲基化状态,研究其表达的机制。方法:分离、纯化鼠睾丸中的精原细胞、精母细胞和精子,分别提取人的睾丸组织、Ntera-2细胞、鼠精原细胞、精母细胞和精子的基因组DNA,用重亚硫酸盐处理基因组DNA,PCR扩增人和鼠的TSP50的启动子CpG岛区域,电泳,提纯,连接于质粒中,转导入细胞中,扩增,提取,纯化质粒,测序。结果:人睾丸组织甲基化水平较低,Ntera-2细胞处于较高水平。鼠的精原细胞和精子细胞甲基化水平较高,精母细胞甲基化水平较低。结论:TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化水平调控TSP50蛋白的表达。     

激光显微切割技术在甲基化水平检测中的应用

睾丸特异性蛋白质50 TSP50是利用甲基化敏感差分析技术（MS-RDA技术）从睾丸和乳腺癌组织中分离出来的低甲基化片段。其表达的TSP50蛋白质与丝氨酸蛋白酶具有同原性。通过免疫组织化学技术证明了TSP50的产物特异性表达在乳腺癌中,而正常乳腺组织中则不表达。