遗传性多发性骨软骨瘤一家系11例

先证者（Ⅲ1） 男，29岁．出生后开发现两肘关节处有枣样大小的硬性肿块，10岁左右逐渐长大，导致尽骨变曲，左桡骨头病理脱位，后手术切除，诊断为骨软骨瘤。随着个体生长发育，8-9岁时两腿膝盖胫骨端有骨性隆起，X线显示：左膝盖内侧骨性肿块（图1）。     

缺陷型TGF_1βⅡ型受体真核表达质粒载体的构建

目的:本实验旨在通过构建大鼠缺陷型TGF1βⅡ型受体的真核表达质粒载体,为研究大鼠肝组织因TGF1βⅡ型受体缺陷而阻断TGF1β的作用后,对人工免疫性大鼠的肝组织及其他组织的影响提供实验材料。方法:根据大鼠肝组织TGF1βⅡ型受体的基因序列,设计在特异的位置添加终止密码,在此序列两端加入特异的限制性内切酶的酶切位点,从而构建大鼠的缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体基因序列,再利用基因重组技术,将其连接在真核表达质粒载体中,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序加以验证。结果:运用分子生物学技术,成功获取突变体TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体,经过DNA测序鉴定,确认为实验预期所需。结论:TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体构建成功,其关键涉及基因片段及载体的选择。     

生物技术专业实验教学体系改革设想

生物技术专业是一门实践性很强的学科，现代生物技术的发展又异常迅速，因此对学生实验动手能力提出了更高的要求。近年来，教学观念的转变使人们对实验教学的目的有了新的认识：实验教学不仅是为了验证课堂上所学的理论和仅仅掌握一些实验操作技术，而是为了在巩固理论知识的同时，提高学生的科学思维能力、研究能力，培养学生的探索精神、     

P75NTR在兔骨折不愈合局部组织中的表达及意义

目的探讨P75神经营养因子受体(P75 neurotrophin receptor,P75NTR)在兔骨折不愈合局部组织中的表达及意义。方法30只新西兰大白兔随机分成A、B、C三组,每组10只。A组建立骨折不愈合模型,B组建立骨折模型,C组不予处理为正常组。骨折不愈合造模成功、骨折模型愈合后,利用免疫组织化学、Western blotting及IPP6.0病理图像分析软件对三组组织中P75NTR的表达进行半定量分析,测定其平均吸光度值及P75NTR与β-action的比值。结果 P75NTR平均吸光度值骨折不愈合组为0.3287±0.0419,骨折组为0.0267±0.0187,正常组为0.0159±0.0136。骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(P0.05),骨折组与正常组比较差异无统计学意义(P0.05);P75NTR/β-action骨折不愈合组为3.6434±0.0596,正常组为0.1390±0.0294,骨折组为0.1489±0.0317。骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(P0.05),骨折组与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。骨折不愈合组高表达P75NTR,骨折组和正常组中P75NTR表达较低,骨折不愈合组与其他两组比较差异有统计学意义(两种检测均显示P0.05);骨折组与正常组比较P75NTR的表达无统计学意义(两种检测均显示P0.05)。结论 P75NTR在兔骨折不愈合局部组织中表达,且明显高于骨折组和正常组,它可能是骨折不愈合形成的一个重要因素。     

遗传学实验教学与创新人才培养初探

遗传学是一门发展迅速的生物学分支科学,它从基因水平研究生物的遗传规律,所研究对象涉及了动物、植物、微生物、人类等形形色色的生物,近年来,随着人类基因组计划的实施,在基因组研究,克隆技术,生物制药,基因诊断与治疗等领域中取得了令人瞩目的成果。由于受传统教育思想的影响,多年来实验教学都是以理论教学为中心,验证课堂上所讲的理论知识,学习有关的实验技术,忽略了能力的培养,这种教学方式限制了学生的创新思维和创新能力的培养。本文结合我校的遗传学实验教学改革进行初步探讨。遗传学实验主要表现实验教学是高等院校教学不可或缺的…     

HBV表型耐药方法的建立及临床分离株的表型耐药分析

目的建立HBV表型耐药分析方法 ,体外培养慢性乙型肝炎患者血清HBV分离株并系统分析其对拉米夫定(LAM)的敏感性。方法从1例LAM耐药慢性乙型肝炎患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增RT基因,克隆到pGEM-Teasy载体中,随机挑选10个克隆进行DNA序列测定,并分析RT区LAM耐药相关的突变位点。用XhoI和NcoI双酶切pGEM-Teasy-RT及pTriEx-HBV(C),构建1.1倍HBV野生株和LAM耐药突变株的重组载体pTriEx-wRT和pTriEx-mRT,转染人肝癌细胞系HepG2细胞。转染60h后加入不同浓度(0、0.01、0.1、1、10、100μmol/L)的LAM,药物连续作用5d后,抽提病毒核心颗粒HBV DNA,通过实时荧光PCR及Southern blotting检测不同药物浓度作用下HBV DNA的复制水平。结果成功建立体外HBV表型耐药分析方法。野生未突变株重组载体pTriEx-wRT转染HepG2细胞后,随着LAM浓度的升高,HBV DNA水平明显下降,而突变株重组载体pTriEx-mRT转染HepG2细胞后,HBV DNA水平无明显下降,IC50值与野生株相比增加了2500倍。结论建立的HBV表型耐药分析方法对监测HBV耐药性具有可行性。     

缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体真核表达质粒载体的构建

目的：本实验旨在通过构建大鼠缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体的真核表达质粒载体,为研究大鼠肝组织因TGFβ1Ⅱ型受体缺陷而阻断TGFβ1的作用后,对人工免疫性大鼠的肝组织及其他组织的影响提供实验材料.方法：根据大鼠肝组织TGFβ1Ⅱ型受体的基因序列,设计在特异的位置添加终止密码,在此序列两端加入特异的限制性内切酶的酶切位点,从而构建大鼠的缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体基因序列,再利用基因重组技术,将其连接在真核表达质粒载体中,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序加以验证.结果：运用分子生物学技术,成功获取突变体TGFβ1Ⅱ型受体真核表达质粒载体,经过DNA测序鉴定,确认为实验预期所需.结论：TGFβ1Ⅱ型受体真核表达质粒载体构建成功,其关键涉及基因片段及载体的选择.     

稳恒磁场照射对人鼻咽癌CNE-2细胞生长与凋亡的影响

目的研究稳恒磁场对体外培养的人鼻咽癌细胞（CNE-2）生长抑制与凋亡作用的影响。方法利用磁感应强度为7 mT的自制稳恒磁场对体外培养的CNE-2细胞进行照射,经1、3、9、12、24、36、48、60、72 h不同时间照射处理后,采用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,MTT法检测细胞生长活性,HE染色观察细胞形态学改变,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡情况。结果从照射9 h起细胞生长受到显著抑制（P〈0.05）,生长曲线结果与MTT实验具有良好的一致性。经72 h照射处理后,MTT法、HE染色观察细胞出现形态学改变,但琼脂糖凝胶电泳检测未见细胞DNA断裂现象。结论 7 mT稳恒磁场照射对体外培养的CNE-2细胞生长有显著的抑制作用,而对诱导细胞凋亡的效果有待进一步研究。