体外阻断卵巢颗粒细胞转化生长因子β信号转导通路模型的建立

本实验以选取转化生长因子βⅡ受体（transforming growth factor-βreceptor typeⅡ,TGF-βRⅡ)抗体的不同剂量和不同孵育时间,对原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞表面TGF-βRⅡ进行中和,从而达到建立体外阻断TGF-β信号转导通路模型的目的.为研究与TGF-β信号转导通路相关的各种调节因素提供了体外研究的新模型.     

胸腺发育中AcP及ATPase活性的电镜细胞化学研究

胸腺发育中ＡｃＰ及ＡＴＰａｓｅ活性的电镜细胞化学研究殷彦君孙品伟董静霞毕振武（北京医科大学组织学与胚胎学系）为探讨胸腺基质细胞与胸腺细胞的相互作用，以铈为捕获剂，对１５ｄ，１７ｄ，１９ｄ胎鼠胸腺作酸性磷酸酶（ＡｃＰ）和腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）的电...     

人树突状细胞摄取量子点后的表面标志与超微结构

目的:观察人树突状细胞体外摄取量子点后,其形态、表面标志、超微结构的变化.方法:两种量子点与人未成熟树突状细胞体外共孵育,荧光显微镜下观察量子点在树突状细胞内的分布;免疫细胞化学方法检测树突状细胞表面标志;扫描电镜及透射电镜观察树突状细胞超微结构的改变.结果:与量子点共培养的树突状细胞的细胞质内充满了较强荧光颗粒,共培养前后的树突状细胞表面标志均呈阳性反应.扫描电镜下可见树突状细胞表面有丰富的典型树枝样的突起.透射电镜下可见树突状细胞以胞饮的方式摄入量子点,形成有膜包被的囊泡分布在细胞质内.结论:树突状细胞是通过胞饮作用摄取量子点,且量子点对树突状细胞的形态、表面标志及超微结构没有影响,生物相容性好.     

平滑肌细胞的体外培养

血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）的体外培养是研究高血压、动脉粥样硬化和血管成型术后再狭窄、缺血再灌注损伤等心血管疾病的关键性起始步骤,此法有助于揭示各种心肺疾患的病理机制及药物作用机理。用培养的VSMC进行研究已成为心血管系统疾病的主要研究手段。目前国内外常用的VSMC培养方法为酶消化法和贴块法,而我们发现这两种方法各有利弊,现做如下讨论。     

量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的定位及对其超微结构的影响

目的 观察体外实验量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的分布和对其超微结构的影响.方法 利用量子点与小鼠腹腔巨噬细胞体外共孵育和电子显微镜技术,观察量子点在小鼠腹腔巨噬细胞内的分布及对其超微结构的影响.结果 透射电镜下,量子点被小鼠腹腔巨噬细胞内吞入细胞质内,形成单位膜包被的空泡样结构.扫描电镜下,可见与量子点体外共孵育的小鼠腹腔巨噬细胞的表面有较多的片状细胞突起.结论 量子点可使巨噬细胞活化,并使其表面突起增多;量子点被巨噬细胞内吞后,分布在细胞质内,并形成单位膜包被的空泡样结构.     

同型半胱氨酸、同型半胱氨酸诱导基因抗体及叶酸对人胚心肌细胞同型半胱氨酸诱导基因的表达及细胞增殖的影响

目的：研究同型半胱氨酸(HCY)、同型半胱氨酸诱导基因抗体(HCY-2Ab)及叶酸对人胚心肌细胞HCY-2表达及对心肌细胞增殖的影响。方法：采用免疫细胞化学、RT-PCR法体外测定人胚心肌细胞内HCY-2表达;用细胞计数法和MTT法对心肌细胞增殖的变化定量分析。结果：当HCY的浓度小于1.25mmol／L时,HCY-2的表达随着HCY浓度的增高而逐渐增强,HCY促进细胞的增殖;当HCY浓度超过1.25mmol／L时,则HCY-2的表达逐渐降低,HCY抑制细胞的增殖;加入HCY-2Ab或叶酸,HCY-2的表达减弱,同时抑制细胞的增殖。结论：HCY-2高表达时HCY对心肌细胞的增殖起促进作用;HCY-2低表达时则HCY、HCY-2Ab或叶酸抑制心肌细胞的增殖。     

胰岛B细胞、A细胞的快速双染

组织学特殊染色技术及免疫组织化学技术已广泛应用于基础医学和临床医学的科研工作中。本快速染色法即用组织学醛品红染色法和免疫组织化学 SP法在同一张切片上对胰岛 B细胞和 A细胞进行了双重染色 ,取得较好的效果 ,现作简单介绍。取大鼠胰腺 ,Bouin液固定 ,石蜡包埋 ,切 5 μm厚切片。双染步骤如下第一步 ,胰岛 B细胞的醛品红染色 :切片脱蜡到水 ;入 0 .2 5 %浓硫酸和 0 .2 5 %高锰酸钾等量混和液中 3min;蒸馏水洗后入 5 %草酸 2 min;蒸馏水洗 ;再经 70 %酒精后入醛品红染液 1 5 min;70 %酒精分色后 ,蒸馏水洗。第二步 ,胰岛 A细胞的免…     

同型半胱氨酸、同型半胱氨酸诱导基因-2抗体和叶酸对人胚心肌细胞超微结构的影响

目的研究同型半胱氨酸（HCY）、同型半胱氨酸诱导基因-2抗体（HCY-2Ab）及叶酸对人胚心肌细胞超微结构的影响。方法取培养的人胚心肌细胞,进行HE染色,常规电镜包埋,透射电镜观察。结果当HCY的浓度小于1．0mmol／L时,随着HCY浓度的升高,心肌细胞核内常染色质增多、细胞质内线粒体和粗面内质网均多于空白对照组,而糖原颗粒减少;当浓度超过1．0mmol／L时,心肌细胞逐渐退化,细胞核内常染色质减少,异染色质增多,核膜包裹染色质形成凋亡小体,细胞质内线粒体肿胀、数目减少,粗面内质网减少;加入外源性的HCY-2Ab或叶酸,心肌细胞形态较相同HCY浓度下的好转。结论HCY对培养的人胚心肌细胞超微结构的维持具有正调节和负调节双相作用．外源性的HCY-2Ab和叶酸在一定程度上可以逆转HCY的作用。     

胃溃疡患者胃粘膜淋巴细胞的变化

胃溃疡（ＧＵ）与神经内分泌关系密切．但尚无较系统的研究资料．我们通过免疫组织化学方法观察ＧＵ患者胃粘膜局部淋巴细胞的变化如下．１　材料和方法１．１　材料　收集意外死亡正常人胃标本６例，ＧＵ手术标本１５例，胃组织经１００ｍＬ／Ｌ福尔马林固定．常规石蜡包埋．切成５μｍ厚连续切片．１．２　方法　取每例胃标本的相邻切片，用过氧化物酶标记的链霉卵白素（ＳＰ）法分别显示Ｔ，Ｂ淋巴细胞．主要步骤为：切片脱蜡至ＰＢＳ，甲醇－Ｈ２Ｏ２封闭，ＰＢＳ冲洗后滴加正常羊血清工作液，室温１５ｍｉｎ；鼠抗人ＣＤ４５ＲＯ和ＣＤ…     

Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响

目的 研究Smad2/Smad3蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及FSH对其活化的影响.方法 21d SD雌性大鼠,注射PMSG 20IU,48h后对卵巢颗粒细胞进行原代培养,用TGFβRⅡ抗体及不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,通过免疫细胞化学方法观察TGFβ信号通路中Smad2/Smad3和P-Smad2/P-Smad3(磷酸化Smad2/3)表达的变化.结果 1.Smad2/Smad3主要定位于卵巢颗粒细胞胞质,其活化形式P-Smad2/P-Smad3有少量表达;2.经FSH处理后, Smad2/Smad3向核内转移增多,P-Smad2/P-Smad3的表达增强,并与FSH的作用时间及剂量呈正相关性;3.TGFβRⅡ被抗体完全中和后再用FSH处理,Smad2/Smad3的核阳性率无显著增多, P-Smad2/P-Smad3的表达未见明显增强.结论 1.FSH促进Smad2/Smad3的磷酸化;2.FSH对 Smad2/Smad3的激活作用与TGFβ受体密切相关.