下调长链非编码RNA PVT1表达对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡、侵袭及转移的影响

目的研究下调长链非编码RNA PVT1的表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响。方法体外转染PVT1干扰序列si PVT1-1和si PVT1-2降低胰腺癌细胞系Bx PC-3 PVT1表达,同时转染阴性对照si PVT1-NC作为对照组。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭转移;qRT-PCR检测E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin和PVT1 mRNA表达;Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)和上皮间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、vimentin)表达。结果下调胰腺癌细胞Bx PC-3 PVT1表达能明显抑制细胞增殖、促进细胞凋亡和减少细胞侵袭转移数目(P0.05);E-cadherin蛋白和分子水平升高,N-cadherin、β-catenin、vimentin蛋白和分子水平降低(P0.05);Bax和caspase-3蛋白水平升高,而Bcl-2蛋白水平降低(P0.05)。结论下调长链非编码RNA PVT1表达能抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭转移能力,促进胰腺癌细胞凋亡,且能够逆转胰腺癌细胞上皮间质转化。     

Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响

目的 探讨生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g(Gadd45g)过表达及靶向沉默对垂体瘤AtT-20细胞及小鼠原代星型胶质细胞的增殖、凋亡及自噬等影响.方法 构建 Gadd45g 基因的CDS区序列克隆至真核表达质粒 p3XFLAG-Gadd45g及其shRNA真核表达质粒pLKO .1-sh-Gadd45g ,将p3XFLAG-Gadd45g转染至小鼠垂体瘤AtT-20细胞中.其shRNA真核表达质粒pLKO .1-puro-sh-Gadd45g进行慢病毒包装,病毒感染小鼠星形胶质细胞;Western blot检测FLAG-Gadd45g融合蛋白的表达及RT-PCR检测shRNA沉默效率,CCK-8检测细胞增殖活力 ,Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白的影响.结果 Gadd45g及其特异性shRNA真核表达质粒构建成功.构建的p3XFLAG-Gadd45g质粒在垂体瘤AtT-20细胞中能够表达;Gadd45g shRNA具有沉默效率.在垂体瘤AtT-20细胞中过表达Gadd45g ,可明显抑制细胞增殖 ,并能诱导Caspase-3表达,降低Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P＜0 .05).与之相反,在原代培养的星形胶质细胞中,shRNA干扰Gadd45g表达,可促进细胞增殖,并降低Caspase-3表达,而增加Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P＜0 .05).结论 垂体瘤中Gadd45g的表达缺失可能使得垂体瘤A t T-20细胞凋亡受阻及自噬作用增强 ,从而促进垂体瘤的发生、发展.恢复垂体瘤细胞中Gadd45g的表达及抑制垂体瘤细胞自噬作用有望成为垂体瘤治疗的新方法.     

孕期心理健康状况调查及相关因素分析

目的 通过调查我国孕妇孕期心理健康状况并分析相关因素,了解我国孕产妇的心理特点,发现需重点干预、支持的人群。方法 2015年6-12月,选取下载有深圳辣妈帮科技有限公司开发的孕期伴侣APP的孕妇为线上调查对象。同时选取配合度较好的全国不同地区、经济、文化水平的11个省、市、自治区（安徽省、北京市、广东省、广西壮族自治区、河南省、湖北省、湖南省、江苏省、山西省、上海市和天津市）的建档孕妇为线下调查对象。采用互联网和传统纸质问卷相结合的形式,借助互联网、手机移动设备和现场纸质问卷,通过线上线下并行的方式,开展问卷调查。调查孕妇基本资料（包括年龄、地区、学历、职业、计划妊娠情况、胎次、家庭人口数、家人教育观、与配偶讨论养育问题情况等）,分别采用状态-焦虑分量表（S-AI）、9条目病人健康问卷（PHQ-9）抑郁症筛查量表、生活满意度量表（SWLS）、社会支持评定量表评价孕妇焦虑情况、抑郁情况、生活满意度情况、社会支持情况。结果 线上6 728例孕妇做了问卷;线下发放问卷1 200份,回收问卷1 024份。线上线下共回收问卷7 752份,其中完成焦虑情况测评的有4 530份（58.03%）,完成抑郁情况测评的有2 697份（34.55%）,完成生活满意度情况测评的有2 018份（25.85%）,完成社会支持情况测评的有1 242份（15.91%）。4 530例孕妇焦虑情况得分为（42.9±11.9）分,2 697例孕妇抑郁情况得分为［6(6)］分,2 018例孕妇生活满意度情况得分为［21(11)］分,1 242例孕妇社会支持情况得分为（38.7±7.0）分。不同年龄、地区、学历、职业、计划妊娠情况、胎次、家庭人口数、家人教育观及是否与配偶讨论养育问题情况的孕妇焦虑情况、抑郁情况、生活满意度情况、社会支持情况得分比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 我国孕产妇的焦虑、抑郁情况值得进一步关注,尤其要重点关注学历低、非计划内妊娠、家庭人口数多孕妇的心理状况,鼓励孕妇与配偶、家人更多地交流与沟通,使家人教育观趋向一致、其获得更多家人及配偶的支持,帮助其建立良好心态。     

二甲双胍对人胰腺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及机制

目的 探索不同浓度二甲双胍对人胰腺癌Panc-1 细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 用不同浓度的二甲双胍处理人胰腺癌Panc-1 细胞后,采用MTT 法检测其对癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blot 观察PTEN、p-Akt（Ser473）、mTOR 蛋白表达水平的变化。结果 干预48 h 时,不同浓度二甲双胍（0.5、2.0 和8.0 mmol）对细胞生长的抑制率依次为（7.20±5.92）%、（18.35±4.77）% 和（33.45±4.10）% ;72 h 时对细胞生长的抑制率分别为（24.81±4.04）%、（53.42±4.18）% 和（61.36±2.00）%。该抑制作用随着药物浓度增加和干预时间延长而增强,呈药物浓度依赖性和时间依赖性。流式细胞术检测结果显示,二甲双胍干预48 h时,8.0 mmol 组G1 期细胞比例与对照组和0.5 mmol 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组低于对照组和0.5 mmol 组;G2/M 期细胞比例与对照组和0.5 mmol 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组高于对照组和0.5 mmol 组。二甲双胍作用48 h 时8.0 mmol 组细胞的中晚期凋亡率为（12.64±2.74）%,与对照组（7.01±1.14）% 和0.5 mmol 组（6.19±0.32）% 比较,差异有统计学意义（P <0.05）,8.0 mmol 组高于对照组和0.5 mmol 组。Western blot 检测结果显示二甲双胍作用48 h 时,2.0 mmol 组和8.0 mmol 组与对照组和0.5 mmol 组比较,PTEN 蛋白表达量差异有统计学意义（P <0.05）,2.0 mmol 组和8.0 mmol 组升高,而p-Akt（Ser473）和mTOR 的表达水平降低。结论 二甲双胍能抑制人胰腺癌Panc-1 细胞的增殖能力,引起G2/M 细胞周期阻滞,同时诱导胰腺癌细胞的凋亡,其可能的机制是通过激活PTEN 的表达,抑制PI3K/Akt/mTOR 通路。     

预见性护理对降低阴道分娩产后出血的效果观察

目的:探讨预见性护理对降低阴道分娩产后出血的临床效果与应用价值.方法:选取2014年8月~2015年5月我院产科收治的120例阴道分娩产妇,按照随机数字表法分为两组各组60例,对照组实施常规产科护理,观察组在此基础上给予预见性护理干预,观察两组产后出血情况.结果:观察组产后出血量为1.7%,明显低于对照组,且产后2h、4h出血量均明显低于对照组,P<0.05,差异存在显著统计学意义.结论:对阴道分娩产妇实施预见性护理干预有利于减少产后出血的发生,临床应用价值显著.