基于SEER数据库的大样本人群中UICC/AJCC第8版分期鼻咽癌Ⅲ期预后分析

[目的]基于鼻咽癌第7版与第8版UICC/AJCC(Union for International Cancer Control,UICC/American Joint Committee on Cancer,AJCC)分期，对流行病学和结局数据库(Surveillance,Epidemiology,and End Results Program,SEER)人群的预后进行回顾性分析，验证和比较两版分期系统对鼻咽癌人群，特别是Ⅲ期人群的分期效果。[方法]纳入SEER数据库2010—2019年鼻咽癌患者，利用Kaplan-Meier生存曲线分析总生存情况，用Log-rank检验检测组间生存差异，Cox回归分析总生存相关预后影响因素，评价指标为风险比及P值。用时间依赖ROC曲线、AUC值评估变量对于生存结局的预测效能。[结果]对于总分期，第7版、第8版2年生存率AUC值分别为0.65、0.75,T分期分别为0.65、0.72,N分期分别为0.53、0.57。对于Ⅲ期人群，第7版分期组内存在生存差异(P<0.05)，而第8版分期除T₁N₂M     

γ-干扰素联合顺铂通过调控xCT抑制三阴性乳腺癌转移的实验研究

摘 要：［目的］ 探讨γ-干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）联合顺铂（cisplatin,DDP）抑制三阴性乳腺癌转移的机制。［方法］ 采用BALB/c小鼠构建三阴性乳腺癌模型,观察IFN-γ联合DDP的治疗效果。用流式细胞术检测细胞凋亡水平;CCK-8实验检测细胞增殖;实时荧光定量逆转录PCR（qRT-PCR）检测相关基因的表达;UALCAN 和 Kaplan-Meier Plotter 数据平台分析目的基因表达与乳腺癌预后的相关性;免疫组化检测肿瘤组织中目的蛋白的表达。［结果］ 各治疗组小鼠原位肿瘤体积均显著性缩小（P<0.05）,而IFN-γ与DDP联合治疗组小鼠肺转移灶数目显著减少（P<0.01）。 IFN-γ联合DDP促进小鼠三阴性乳腺癌细胞4T1凋亡（P<0.001）,并显著性抑制肿瘤细胞增殖（P<0.001）。成纤维细胞L929上清能促进4T1细胞增殖（P<0.01）,且该作用被IFN-γ抑制（P<0.01）。谷胱甘肽促进4T1细胞增殖（P<0.001）,并且消除了IFN-γ对L929上清促肿瘤增殖的抑制作用（P<0.01）。qRT-PCR结果显示,L929中胱氨酸/谷氨酸反转运体x（xCT） mRNA表达水平显著性下调（P<0.05）。数据库分析结果显示,乳腺癌患者的xCT 表达水平明显高于正常乳腺组织（P<0.001）,xCT高表达与较差的无远处转移生存期存在显著性相关（P<0.01）。免疫组化结果表明,发生肺转移的乳腺癌患者肿瘤组织中xCT表达水平显著性高于未发生肺转移者（P<0.001）。 ［结论］ IFN-γ联合DDP可能通过抑制L929 xCT的表达减少谷胱甘肽分泌,从而抑制三阴性乳腺癌转移。研究有望为三阴性乳腺癌转移的临床治疗提供新思路。     

基于转录组数据食管癌铜死亡相关基因筛选及预后模型的构建

摘 要： ［目的］ 基于转录组数据筛选食管癌铜死亡相关基因,构建预后模型,并探讨其临床价值。［方法］ 从TCGA和GEO数据库下载食管癌转录组、基因表达和临床数据,对铜死亡相关基因进行鉴定。基于铜死亡相关基因表达量,对TCGA和GEO合并数据进行共识聚类,筛选差异基因,并进行Cox分析和LASSO回归分析,筛选预后基因并构建预后风险模型。基于风险评分及临床因素构建列线图,预测患者的生存率。［结果］ 通过对49个铜死亡相关基因的鉴定,有26个基因在肿瘤组织及正常组织中差异表达。经多因素分析及LASSO回归分析,筛选出6个有预后价值的风险基因（PLEKHA7、GATM、F2RL2、TFF3、DKK1、CLIC3）,并构建了6基因预后模型。基于预后模型的高风险组患者生存率明显低于低风险组,ROC曲线下面积（AUC）为0.916,验证了风险模型具有良好的预测性能。不同风险评分与患者的肿瘤微环境及药物敏感性密切相关。列线图预测了食管癌患者1年、3年和5年的生存概率分别为91.6%、62.4%和56.3%,校准曲线证实其预测的准确性。［结论］ 基于铜死亡相关基因的6基因预后风险模型可以较好地预测食管癌的预后,可能是风险分层、免疫治疗评估和药物敏感性分析有用的生物标志物。     

长链非编码RNA linc01376调控鼻咽癌肿瘤进展机制分析

摘 要：［目的］ 探讨linc01376在鼻咽癌组织与细胞内的表达特征,分析其可能的调控机制。 ［方法］ 采用实时荧光定量（qT-PCR）方法检测鼻咽癌组织和细胞中linc01376表达水平;采用CCK-8法、克隆平板形成实验、流式细胞学检测、划痕实验、Transwell侵袭实验等检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化;通过Western blot实验测定分子蛋白水平,探索linc01376的下游调控机制。［结果］ qT-PCR结果表明,linc01376在鼻咽癌组织中表达明显高于正常鼻咽组织(20.230±1.815 vs 1.281±0.454,P<0.01)。linc01376表达越高,患者分期越晚（χ2=7.670,P<0.05）,肿瘤负荷越大(χ2=6.312,P<0.05)。细胞功能学实验显示与对照组相比,沉默linc01376明显抑制鼻咽癌细胞的增殖(5-8F：2.248±0.055 vs 1.790±0.041,t=6.675,P<0.01;CNE2：1.502±0.046 vs 1.012±0.068,t=5.994,P<0.01)、迁移和侵袭能力（5-8F：182.00±8.60 vs 92.67±6.24,t=11.89,P<0.01;CNE2：166.67±8.18 vs 90.67±3.68,t=11.98,P<0.01）。机制研究发现linc01376可通过影响miR-4757调控下游IGF1的表达,最终激活AKT/p-AKT信号通路发挥促进肿瘤进程作用。［结论］ linc01376在鼻咽癌进展中发挥重要调控作用,可能成为鼻咽癌靶向治疗的新靶点。     

筛选化学诱变原的RNR3调控重组Lac Z 基因酵母细胞的建立

目的：建立可筛选化学诱变物的RNR3调控重组Lac Z 基因酵母细胞。方法：利用降式PCR技术从酵母基因组中扩增RNR3 启动子，将其插入到pMP206/ERE酵母报告载体，构建成RNR3调控的Lac Z酵母报告载体，将该载体转入W303-1A酵母细胞，构建成RNR3调控的重组Lac Z 基因酵母细胞。用数种化学诱变原作用于该重组基因酵母细胞，观察其对RNR3的诱导表达。结果：放线菌素D、丝裂霉素C、阿非迪霉素和溴乙锭不能诱导RNR3的表达，而甲磺酸甲脂、瘤可宁、顺铂、4-硝基-N-氧化喹啉、博来霉素、福莱霉素、5-氟尿嘧啶、喜树碱和羟基脲诱变原与RNR3表达有明显的剂量效应关系。结论：该重组酵母可用于对多种化学诱变原的快速筛选。     

90例不同部位食管癌同步放化疗后疗效分析

目的 探讨颈胸上段食管癌和胸中下段食管癌同步放化疗疗效及食管狭窄情况.方法 选取2011年1月至2014年12月在江苏省苏北人民医院诊治的不同部位食管癌初治患者90例,均行同步放化疗,放疗中位剂量60 Gy,化疗方案为紫杉醇联合奈达铂方案.其中,颈胸上段食管癌48例,胸中下段食管癌42例,比较两组近期有效率、局部控制率、生存率及食管狭窄情况.结果 随访率为100％,颈胸上段食管癌组和胸中下段食管癌组近期有效率分别为81.2％、73.8％(x2=0.717,P=0.397);1年局部控制率分别为90.3％、71.8％(x2=5.865,P=0.015);1年生存率分别为87.5％、69.0％(x2=4.580,P=0.032);中度及以上程度食管狭窄发生率分别为55.6％、29.4％(x2 =5.360,P=0.021).两组在近期疗效方面差异无统计学意义,而颈胸上段食管癌组在1年局部控制率、1年生存率和食管狭窄发生率上均明显高于胸中下段食管癌组,差异有统计学意义.结论 颈胸上段食管癌疗效较胸中下段食管癌好,但颈胸上段食管癌放疗后食管狭窄程度较胸中下段食管癌重.     

基于TCGA数据库构建头颈部鳞癌RNA甲基化调控因子预后模型#br#

目的探讨RNA甲基化调控因子与头颈部鳞癌（HNSCC）患者预后的相关性。方法从TCGA数据库获取HNSCC样本与正常样本的基因表达谱及临床数据，评估43个RNA甲基化调控因子预测预后的价值。使用LASSO回归分析构建预后模型，将患者按风险评分划为高、低风险组，并对模型进行评估。根据高、低风险组差异表达的基因进行GO富集分析和ssGSEA分析。结果HNSCC组织中显著差异表达的RNA甲基化调控因子共有38个。LASSO回归模型中，高风险组的5年生存率低于低风险组（P＜0001）。单因素与多因素COX回归分析结果显示该评分模型是HNSCC患者独立的预后因素（P＜005）。GO富集分析和ssGSEA分析提示高风险组的免疫功能可能受到抑制。结论RNA甲基化调控因子在HNSCC的预后中发挥重要作用。     

左右半结直肠肿瘤转移风险模型构建及评价

目的 探讨左右半结直肠肿瘤患者肝、肺、骨和脑转移的影响因素并对比构建Nomogram图预测转移概率。方法 回顾性筛选和分析2010年至2018年SEER数据库中结直肠肿瘤有肝、肺、骨和脑转移的患者信息。根据肿瘤部位分成左半、右半和直肠肿瘤，利用多因素Logistic回归分析分别筛选转移相关影响因素，建立Nomogram预测图并使用ROC曲线下面积AUC和校准曲线进行检验。结果 筛选出49 335例符合条件的结直肠癌患者。其中，N分期和CEA与肝、肺、骨及脑转移均相关，且与原发肿瘤部位无关，而种族在左右半不同部位对肝转移的影响不同（P<0.05）。肝转移构建的Nomogram模型较好，根据左半，右半和直肠三个原发部位构建的预测肝转移Nomogram模型的AUC分别为0.821（95%CI: 0.813~0.830）、0.841（95%CI: 0.833~0.848）和0.796（95%CI: 0.782~0.811）。结论 影响不同原发肿瘤部位的结直肠癌患者远处转移的因素及其相应的预测模型存在差异。     

鼻咽癌放射抵抗细胞株的建立与鉴定

目的体外构建鼻咽癌放射抵抗细胞株, 为进一步研究鼻咽癌放射抵抗的分子机制提供实验基础。方法采用剂量梯度法照射诱导建立放射抵抗细胞模型5-8F-IR。光学显微镜观察细胞形态变化;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;CCK-8实验检测细胞活力;5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)实验检测细胞增殖能力;彗星实验及免疫荧光实验检测细胞DNA损伤修复能力;流式细胞术检测细胞凋亡水平及周期分布;蛋白质印迹法检测DNA损伤相关蛋白γH2AX及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达水平。结果剂量梯度照射后5-8F-IR细胞形态较亲本5-8F细胞形态变长, 5-8F-IR细胞的克隆形成能力(P<0.01)、细胞活力(P<0.001)、细胞增殖能力(P<0.05)、DNA损伤修复能力(P<0.05)均明显优于亲本细胞5-8F, 照射后5-8F-IR细胞的凋亡率明显低于5-8F细胞(P<0.01), 未接受照射时5-8F-IR细胞处于S期的百分比较5-8F细胞升高, 接受照射后5-8F-IR细胞出现明显的G2/M期阻滞(P<0.01), 同时照射后5-8F-I...