应用免疫沉淀和蛋白质组学发现多发性骨髓瘤肿瘤相关抗原的研究

目的 利用免疫沉淀和蛋白质组学发现多发性骨髓瘤的肿瘤相关抗原,探索多发性骨髓瘤的发病机制和发现新的诊断标志物。方法 收集8例多发性骨髓瘤患者和8例健康对照者的血清标本并分别混合,用Protein G PLUS-Agarose免疫沉淀试剂分离和纯化多发性骨髓瘤患者和正常人血清中的抗体,并用此抗体与多发性骨髓瘤细胞系U266细胞裂解液混合,形成抗体-抗原复合物,通过1维不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(1D-SDS-PAGE)分离蛋白质,切胶酶解后通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)分离并鉴定,用Proteome Discovery软件进行蛋白质数据库检索。结果 MM组较对照组共筛选出14个上调的蛋白,7个下调的蛋白,分别列在表1和表2中。结论 利用免疫沉淀及蛋白质组学筛选出了21个可能与肿瘤自身免疫相关的差异蛋白,其中的α-烯醇化酶、波形蛋白、热休克蛋白90与文献记载有较好的一致性,可作为肿瘤相关抗原的候选蛋白。     

多重耐药革兰阴性杆菌体外联合药效数据库初建

目的研究临床常用抗生素对多重耐药革兰阴性杆菌的协同和相加作用,初步建立体外联合药效数据库。方法选取磷霉素(PHOS)、左氧氟沙星(LEV)、头孢他啶(CAZ)、复方新诺明(SMZ)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)和亚胺培南(IMP)7种抗生素,两两组合为21种药物组。经超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)确认,172株多重耐药革兰阴性杆菌分为耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(20株,A组)、泛耐药的鲍曼不动杆菌(50株,B组)、产ESBLs的肠杆菌(62株,C组)和耐碳青霉烯的铜绿假单胞菌(40株,D组)4个耐药菌组。棋盘稀释法测定21种药物组对4个耐药菌组的体外联合药效,统计学分析采用Whonet5.6。结果172株待测菌株均对7种抗生素单药耐药。联合药效检测结果显示:4组均未出现拮抗作用;对A组耐药菌呈现协同作用的药物组有10组,部分协同作用的有14组,无相加作用,PHOS+LEV药物组协同百分率最高(30%,6/20);对B组耐药菌呈现协同作用的药物组有12组,部分协同作用的有10组,相加作用的有3组,LEV+SMZ药物组协同作用百分率最高(56%,28/50);对C组耐药菌呈现协同作用的药物组有14组,部分协同作用的有17组,相加作用的有16组,IMP+LEV药物组协同作用百分率最高(30.6%,19/62);对D组耐药菌呈现协同作用的药物组有12组,部分协同作用的有14组,相加作用的有13组,IMP+LEV药物组协同作用百分率最高(20%,8/40)。结论喹诺酮类、碳青霉烯类、磺胺类和磷霉素等药物联合应用,对多重耐药革兰阴性杆菌有较好的协同作用,治疗前行体外联合药效监测,可提高抗生素使用的准确性,临床应用价值较高。